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文檔簡介
1、研究蛋白質凝膠的技術進展-DWS 微流變技術介紹凝聚和凝膠過程對起著重要的作用,它們能形成食品所需要的質構,也會帶來不需要的沉淀或是分層現象。因此,研究膠體形成的特性對于穩(wěn)定和形成食品所需結構十分重要,并且通過控制凝膠反應優(yōu)化過程,提高食品品質。對于食品體系的凝膠和凝聚已經有了深入的研究,但凝聚凝膠現象還鮮有。因為研究凝膠過程有以下:首先,蛋白和多糖是大分子,三維結構描述和定量。其次,凝膠過程是一個復雜的反應體系。例如,球蛋白的凝膠過程,通常分為蛋白分子展開,解聚和聚合,凝聚的步驟。在熱變性的過程中,天然蛋白分子伸展,出功能性基團(如巰基和疏水基團)。隨后,為了降低體系的能量,蛋白通過形成二硫
2、鍵或疏水相互作用發(fā)生凝聚。當蛋白濃度高于形成凝膠的臨界點時,凝聚繼續(xù)發(fā)展形成凝膠結構。在整個反應過程中,最終的凝膠和凝聚體的結構受環(huán)境影響(蛋白濃度、pH、離子強度、溫度等)很大。食品是個復雜的體系,一些成分會影響蛋白凝聚凝膠的過程如蛋白一蛋白的相互作用,通過改變二硫鍵形成、疏水相互作用、氫鍵或是范德華力,改變形成凝膠體的凝膠特性。,DWS于傳統的激光散射技術。由于多散射光子疊加,使傳統的靜態(tài)或是動態(tài)激光散射技術都不能用于高濃度的 膠體體系,只能分析稀釋的懸濁體系,其濃度大約 001。而凝膠化、相分離和絮凝現象發(fā)生的濃度,都高于激光散射測量的濃度范圍。但 DWS 卻可以用于混濁的膠體體系,因此
3、, DWS 可以用于研究劑、膠體、化妝品等領域。DWS 的原理當激光照射到組成膠體的顆粒上時,導致發(fā)生和散射而且散射光受顆粒運動狀態(tài)的影響。DWS 測定的是在顆粒間發(fā)生多次散射光子,這時光子的運動途徑可以看作隨機運動或是散布運動。因此,隨時間變化的散射光強度直接與樣品中顆粒運動狀態(tài)有關,測定散射光變化,即可推出顆粒運動狀態(tài),進而得出凝聚的狀態(tài)。DWS 有兩種構造類型:同側型和型,同側型,收集器和檢測器與激光發(fā)射源在同一側;型收集器和檢測器與激光發(fā)射源在異側,所以散射激光必須穿過整個懸濁樣品,散射激光的強度較高。同側型的缺點是有時收集的散射光沒有發(fā)生足夠散射,但是它具有激光能量低并且易于安裝設備
4、的優(yōu)點,因此用于食品凝聚凝膠化的研究。DWS 的特點DWS 可以 測定未稀釋或是未預處理過樣品,得到凝聚顆粒的尺寸、空間相關性的信息。但缺點是:DWS 不能用于已經完全形成的凝膠,因為此時顆粒已經完全,體系中 沒有微粒移動,就不能用復雜的相關函數來推導凝膠的信息。文章時沒有商業(yè)化DWS 設備,只是一些的DWS 設備。因此,當時DWS 的發(fā)展受硬件的限制。但是,現在已經有了。法國formulaction 公司推出的第一款商業(yè)化的 DWS 微流變儀已與 2012 年正式上市。實際案例:DWS 在蛋白質凝膠凝聚中的應用目前,DWS 主要用于研究初始狀態(tài)下的食品凝聚凝膠化過程,如通過添加凝乳酶或酸化導
5、致牛奶凝膠化過程,并測定凝膠網絡的黏彈性。研究表明,DWS 能夠準確測定凝結時間,并且能找到散射光強度變化和形成結構彈性之間的聯系。 DWS 通過測定光子運動平均行程(l*)的變化,發(fā)現使用凝乳酶和酸凝固的酪蛋白凝膠差異明顯。參數l*是性 DWS 特有的表征微觀結構發(fā)展變化和不同類型凝膠形成機理的指標。凝膠化過程中,l*的變化要早于顆粒凝聚尺寸變化和流變學變化。在酸化和凝乳酶誘導的凝膠體系中,隨時間變化,兩者的 l*不同,所以證明在兩種凝膠化過程中蛋白質問不同的相互作用類型。以上結果表明,牛奶中的酪蛋白膠束在未發(fā)牛凝聚時,已經被乳清蛋白和 K酪蛋白形成的微弱的凝膠網絡限制了移動,并最終發(fā)生凝聚。這一假設通過使用改變牛奶中酪蛋白膠束和乳清蛋白比例,得以驗證。結論食品的凝膠研究是一個非常具有
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