1、高效液相色譜法測定復(fù)方磺胺甲噁唑片的含量實驗?zāi)康? 掌握高效液相色譜法測定復(fù)方磺胺甲噁唑片的含量的基本原理2 掌握高效液相色譜儀的操作及注意事項實驗原理-C10H11N3O3S分子質(zhì)量：253.28。本品為白色結(jié)晶性粉末。熔點 167，易溶于稀鹽酸；氫氧化鈉溶液或氨水，幾乎不溶于水。無臭，味微苦。外標(biāo)法是以待測組分的純品作峰面積。實驗儀器、試劑儀器：75-4型紫外可見分光光度計 (上海分析儀器廠 )，高效液相色譜儀，色譜柱，超聲波清洗儀，紫外吸收檢測器，無油隔膜真空泵，抽濾裝置，電子分析天枰，稱量紙，研缽，容量瓶（100ml,50ml,25ml,10ml杯，玻璃棒，移液槍試劑：復(fù)方磺胺甲噁唑片

2、(山東新華制藥股份有限公司 ,批號 0412073 )，甲氧芐啶，磺胺甲噁唑，甲醇（色譜純）,(色譜純)，三乙胺 (色譜純)實驗步驟1.色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：填充劑：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑流動相：水-乙腈-三乙胺（79920011100）調(diào)節(jié)pH值至 ）檢測波長：254nm流速：1.0mL/min進(jìn)樣量：20ul理論塔板數(shù)：按甲氧芐啶計算應(yīng)不低于 2000，甲氧芐啶與磺胺甲噁唑峰之間的分離度應(yīng)大于 5.0。甲氧芐啶峰與磺胺甲噁唑峰的拖尾因子均不得過2.0。2.測定法2-1溶液的配制2-1-1 對照品儲備液的配制：取磺胺甲噁唑 ，精密稱定，置50ml 容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，

3、搖勻，備用。2-1-2 對照品溶液的配制：精密量取上述儲備液 2ml，置 50ml 容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，得濃度約為 0.16mg/ml的磺胺甲噁唑?qū)φ掌啡芤骸?-1-3供試品溶液的配制：取樣品10 片，精密稱定，得其平均片重，粉碎，精密量取細(xì)粉適量（約相當(dāng)于磺胺甲噁唑100ml 容量瓶中，加 5ml 50ml容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，得供試品溶液。2-2供試品的含量測定分別量取上述對照品溶液 20ul、供試品溶液20ul 分別進(jìn)樣。記錄磺含量。方法學(xué)驗證1 線性范圍精密量取磺胺甲噁唑 12.5mg，置 25ml 的容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。分別精密量取上述溶液 0.

4、5ml、1.5ml、2.5ml、3.5ml、4.5ml于 5 個 10ml 容量瓶中加甲醇稀釋至刻度。分別進(jìn)樣 10ul。按上述色譜條件測定歸方程。2 精密度實驗量取上述供試品溶液 20ml，每次吸取 20ul，連續(xù)進(jìn)樣 6 次，測定峰面積，求得磺胺甲噁唑峰面積 RSD3 準(zhǔn)確度試驗取復(fù)方磺胺甲噁唑片 20 片，粉碎，精密量取已知含量的復(fù)方磺胺甲噁唑粉末 5 份（每份取的復(fù)方磺胺甲噁唑粉末的量約相當(dāng)于含磺胺甲噁唑 100ml 甲醇溶解并用甲醇稀釋至刻度，搖勻，過濾，精密量取續(xù)濾液 5ml，置 50ml 容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，得其5 份溶液。每份進(jìn)樣20ul，測定峰面積。求得磺胺甲噁唑的

5、平均回收率。實驗結(jié)果磺胺甲噁唑的濃度（C）C（對）/C（供）對)/A（供）注意事項及參考文獻(xiàn)1 .開機前先將流動相過濾和超聲2 是否漏液并開始過濾，若未漏液，再向濾瓶中添加流動相。3 無法排出液體，氣體仍然殘留在流動相內(nèi)，以致開機排氣時無氣泡排出。4 間升高超過壓力上限，致使泵停止工作。5 .反相高效液相色譜儀沖洗柱子時，應(yīng)盡量避免使用純水流動相沖洗柱子，因為水極性強，會損害色譜柱（反相高效液相色譜儀的色譜柱 C18導(dǎo)致柱效下降。6.沖洗色譜柱時，還可輔助以不同比例的混合流動相沖洗色譜柱，以沖出不同極性的殘留物質(zhì)，但最后還是要用純有機流動相沖洗色譜柱一段時間。7 在實驗過程中會出現(xiàn)壓力超過上限或壓力偏高（在壓力上限范圍內(nèi)有機流動相和水流動相流速之和無法達(dá)到 1ml/min此時應(yīng)用較大流速（1ml/min）的有機流動相充分沖洗色譜柱。若條件允許，濾頭取出放到有機