1、胡頹子對(duì)人胃癌細(xì)胞增殖抑制的實(shí)驗(yàn)研究【摘要】目的討論胡頹子對(duì)人胃癌SG7901細(xì)胞增殖抑制作用。方法istar大鼠隨機(jī)分為5組，1對(duì)照組：自由飲食，2胡頹子組：以濃度250，500，1000g/L胡頹子果實(shí)水煎液ig,35-氟尿嘧啶5-Fu組：50g/kg.b5-Fuip。1周后取各組大鼠血清RPI-1640培養(yǎng)胃癌SG-7901細(xì)胞，采用TT法測(cè)定不同血清對(duì)胃癌SG-7901細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果胡頹子對(duì)胃癌細(xì)胞的增殖有顯著的抑制作用(P0.01),且抑制率隨藥物濃度的升高而增高，存在明顯的量效關(guān)系。結(jié)論胡頹子對(duì)SG-7901細(xì)胞增殖具有抑制作用?！娟P(guān)鍵詞】胡頹子胃癌增殖Abstrat：bje

2、tiveTdetettheinhibitineffetfdetinfelaeagnusnprliferatininhuangastriarinaellSG-7901.ethdsGastriarinaellSG-7901astreatedithratseruhihlletedfrratsfedithdetinfelaeagnusradinistratedith5-flur-2,4(1H,3H).ellprliferatinasassayedbyTTethd.ResultsElaeagnussignifiantlyinhibitedtheprliferatinfgastriarinaellsina

3、dse-dependentanner(p0.01).nlusinElaeagnushasthefuntinfinhibitinggastriarinaellprliferatin.Keyrds：Elaeagnus;Gastriarinrua;Prliferatin胡頹子科有沙棘屬(HippphaeL.)和胡頹子屬(ElaeagnusL.)。胡頹子屬我國(guó)有55種1，本屬為珍貴的藥食兩用植物,其植物果實(shí)中氨基酸包括8種必需氨基酸、有機(jī)酸、維生素、微量元素、多糖類等含量明顯高于栽培果樹，還含有生物類黃酮、揮發(fā)油、萜類和甾體等物質(zhì)25，其果實(shí)酸甜宜食用。有關(guān)胡頹子止咳平喘、澀腸止瀉、活血祛淤以及治療消

4、化不良等已有報(bào)道56。本實(shí)驗(yàn)就胡頹子果實(shí)對(duì)體外SG-7901細(xì)胞增殖的影響進(jìn)展了研究。1材料與方法1.1材料1.1.1胡頹子果實(shí)水煎液(野生胡頹子果實(shí)于2022-04采自湖北恩施土家族苗族自治州巴東野三關(guān),挑選上好果實(shí)用水煎煮3次,過濾后,濃縮成1gl-11kgL-1溶液,-20凍存?zhèn)溆茫?-氟尿嘧啶5-Fu,上海旭東海普藥業(yè)。四甲基谷氮噢鹽(TT)、二甲基亞礬(DS)，Siga公司；RPI-1640培養(yǎng)基為Gib公司產(chǎn)品。1.1.22培養(yǎng)箱，NAP-5410型；酶標(biāo)儀，BI-RAD550型。1.1.3人胃腺癌細(xì)胞SG-7901購(gòu)自上海細(xì)胞生物學(xué)研究所。1.1.4動(dòng)物istar大鼠,雄性,體重

5、250300g(由湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)。1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1含藥動(dòng)物血清的制備大鼠40只，隨機(jī)分為5組，每組8只，分別ig和ip：(1)對(duì)照組，自由飲食；2胡頹子給藥組250，500，1000g/kg7d)，連續(xù)7d，第7次ig6h后取血；35-Fu陽性對(duì)照組,50g/kg7d.ip；均斷頭取血，分別于4,2000r/in離心20in，別離血清,56滅活30in后分裝，-20凍存?zhèn)溆谩?.2.2細(xì)胞增殖抑制試驗(yàn)(TT復(fù)原法)取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的SG-7901細(xì)胞，用含10%胎牛血清的RPI-1640培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞懸液濃度為1.0107個(gè)/L接種細(xì)胞于96孔培養(yǎng)板，每孔200l，置37，5%2

6、，飽和濕度的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h，后更換不含胎牛血清的1640培養(yǎng)液再培養(yǎng)24h，使細(xì)胞同步化；棄上清，各組分別換以含10%相應(yīng)大鼠血清的RPI-1640培養(yǎng)液，每個(gè)組設(shè)6個(gè)復(fù)孔培養(yǎng)48h；再每孔參加5g/lTT溶液20l,繼續(xù)孵育4h,棄上清后再參加200lDS,微量震蕩器振蕩10in，立即用酶標(biāo)儀測(cè)定490595n波長(zhǎng)吸光度值(D)。重復(fù)實(shí)驗(yàn)2次。細(xì)胞抑制率(%)=1-試驗(yàn)組吸光度值/對(duì)照組吸光度值100%1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS11.0軟件，結(jié)果以s表示。2結(jié)果TT測(cè)定：胡頹子血清組與陰性對(duì)照組比擬,在2501000g/L濃度范圍內(nèi)，其A值隨著藥物濃度的增加逐漸減小，說明含胡

7、頹子的血清對(duì)胃腺癌細(xì)胞增殖有顯著抑制作用(P0.01)；且隨胡頹子劑量的增加對(duì)胃癌細(xì)胞的抑制率增加,有明顯相關(guān)性。濃度500，1000g/L的胡頹子血清對(duì)胃癌細(xì)胞抑制率分別為27.59%和44.19%,與5-Fu組對(duì)胃癌細(xì)胞增殖的抑制作用相當(dāng)P0.05)。結(jié)果見表1。表1不同血清對(duì)SG-7901細(xì)胞增殖的影響略與對(duì)照組比擬，aP0.01;gn5-氟尿嘧啶組比擬，bP0.05;n=83討論本實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明，胡頹子果實(shí)具有抑制人胃癌SG-7901細(xì)胞增殖的作用。其抑制胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制率隨藥物濃度的升高而增高，存在明顯的量效關(guān)系。胡頹子的作用與其所含有的豐富活性物質(zhì)親密相關(guān)。如胡頹子果實(shí)含有三萜類化

8、合物熊果酸、多糖、多種微量元素、維生素等等。近年來熊果酸的抗腫瘤作用日益受到重視。研究發(fā)現(xiàn)熊果酸可抑制多種腫瘤細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)其凋亡、對(duì)抗致癌物如B()P，黃曲霉素B1誘發(fā)的基因突變,抑制TPA對(duì)二甲基苯并蒽(DBA)誘導(dǎo)的小鼠皮膚癌的促癌作用,因此認(rèn)為熊果酸具有抗突變、抗促癌作用79。本實(shí)驗(yàn)與張奕穎7等報(bào)道的熊果酸抑制胃癌細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致，說明胡頹子所含熊果酸具有抗腫瘤增殖作用。胡頹子品種繁多，資源豐富,分布于全國(guó)各地。果實(shí)中富含人體所需的營(yíng)養(yǎng)成分,是值得推廣的藥食兩用植物。致謝:醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心肖本見、李玉山在實(shí)驗(yàn)中給予大力協(xié)助,在此表示衷心感謝!【參考文獻(xiàn)】1中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編輯委員會(huì).

9、中國(guó)植物志.北京：科學(xué)出版社，1983：6.2朱篤,徐曲.胡頹子果實(shí)營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定J.江西師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2000,24:90.3陳禮清,宮淵皮,鄧玉林.胡頹子果實(shí)營(yíng)養(yǎng)成分分析及加工利用初研J.四川林業(yè)科技，2000，21：28.4黃泰康,丁志遵,趙守訓(xùn)，等.現(xiàn)代本草綱目.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2001：1843.5張貴君.現(xiàn)代中藥材商品通鑒.北京:中國(guó)中醫(yī)藥出版社,2001：1611.6陳新.川渝地區(qū)胡頹子屬藥用植物資源研究J.成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2001，24：40.7張奕穎,鄧濤,胡志芳，等.熊果酸體外抗胃癌細(xì)胞SG7901機(jī)制的研究J.中草藥，2022，37：555.8張維文，黎銀燕，張貴平，等.熊果酸誘導(dǎo)人乳腺癌細(xì)胞F27凋亡的實(shí)驗(yàn)研究J.中草藥，2022，28：29