1、無菌查驗(yàn)考證方案種類：編號(hào)：部門：頁碼：無菌查驗(yàn)方法考證版次：新訂代替:制定人:年代日審批會(huì)簽:贊成人：年代日奏效日期：年代日1/6無菌查驗(yàn)考證方案考證目的1.1確認(rèn)所用的檢查方法合用于一次性活檢鉗的無菌檢查。1.2確認(rèn)檢查結(jié)果的正確性、靠譜性、重復(fù)性和可操作性及檢查方法的圓滿性。考證范圍合用于我企業(yè)生產(chǎn)的一次性活檢鉗無菌查驗(yàn)。查驗(yàn)依照中國藥典2010版附錄無菌檢查法ISO11737-2:2009醫(yī)療器材的滅菌微生物學(xué)方法第一部分：確認(rèn)滅菌過程的無菌試驗(yàn)GB/醫(yī)用輸液、輸血、注射用具查驗(yàn)方法第2部分：生物學(xué)試驗(yàn)方法考證器材查驗(yàn)環(huán)境：無菌檢查應(yīng)在環(huán)境干凈度10000級(jí)下的局部100級(jí)的單向流空氣

2、地區(qū)內(nèi)進(jìn)行操作。設(shè)施：醫(yī)用凈化工作臺(tái)、生物安全柜、無菌檢查膜過濾器、電動(dòng)吸引器、電熱干燥箱、霉菌培育箱、數(shù)顯生化培育箱、壓力蒸汽滅菌器、電子天平、pH計(jì)、冰箱、恒溫水浴鍋、顯微鏡等。培育基及稀釋液：硫乙醇酸鹽流體培育基、改進(jìn)馬丁培育基、氯化鈉-蛋白胨緩沖液、%蛋白胨水溶液、營養(yǎng)瓊脂。其余實(shí)驗(yàn)資料：微孔濾膜（孔徑，直徑約50mm）、無菌過濾杯、無菌剪刀、無菌鑷子、無菌鉗子、無菌手套、吸管（1ml和10ml）、酒精燈、三角燒瓶、接種環(huán)、培育皿?？甲C方案原理：活檢鉗的形狀為不溶物，為微生物轉(zhuǎn)移更完好，特采用無菌檢查法中的薄膜過濾法。設(shè)施器材：考證中所用器材、設(shè)施已經(jīng)過國家計(jì)量單位判斷合格并有判斷證書

3、。培育基：考證中所用培育基以經(jīng)過培育基敏捷度實(shí)驗(yàn)檢測(cè)合格。操作步驟：供試品的取樣依照GB/T有關(guān)規(guī)定進(jìn)行逐批取樣。將所需物件，供試品表面消毒，經(jīng)過傳達(dá)窗，紫外線照耀半小時(shí).無菌室紫外線消毒半小時(shí)。操作人員用洗手液、自來水沖刷雙手，封閉紫外燈，換拖鞋，脫外套放入衣柜，穿干凈白大衣，進(jìn)入緩沖間，再用洗手液、純化水沖刷雙手，用75%乙醇敵手進(jìn)行消毒，衣著無菌衣、帽、口罩、手套等。進(jìn)入菌檢室，翻開醫(yī)用干凈工作臺(tái)風(fēng)機(jī)，運(yùn)轉(zhuǎn)最少15分鐘以上。將所需物件由傳達(dá)窗拿出，兩只消毒液桶分別擱置于菌檢干凈工作臺(tái)一側(cè)，其余物件擱置于傳達(dá)窗一側(cè)的方形桌上，剝?nèi)ヅＦぜ埻獍b。醫(yī)用干凈工作臺(tái)內(nèi)點(diǎn)燃酒精燈。翻開3個(gè)養(yǎng)瓊脂平板

4、，置于醫(yī)用干凈工作臺(tái)的不一樣樣地點(diǎn)。2/6無菌查驗(yàn)考證方案取供試品，在醫(yī)用干凈工作臺(tái)內(nèi)，翻開包裝袋，當(dāng)心將供試品拿出，將其剪成約10cm的小段，浸入500ml%無菌蛋白胨水溶液中，充分振搖作為供試液。將供試液均勻轉(zhuǎn)入三個(gè)薄膜過濾器的濾杯中，開啟電動(dòng)吸引器開關(guān)進(jìn)行過濾，用蛋白胨-氯化鈉緩沖液每次100ml沖刷濾膜三次，用平口鑷子夾取濾膜（過程保持濾膜的圓滿性），一張轉(zhuǎn)移到100ml改進(jìn)馬丁培育基，另兩張轉(zhuǎn)入100ml硫乙醇酸鹽流體培育基，此中一只做陽性比較，內(nèi)并用記號(hào)筆在各試管上做好標(biāo)志。用同批的沖刷液和浸提介質(zhì)各100ml經(jīng)過兩個(gè)集菌儀過濾，同法一張加硫乙醇酸鹽培育基100ml，另一張加改進(jìn)馬

5、丁培育基100ml分別作陰性比較。用記號(hào)筆在試管上注明供試品名稱、批次、查驗(yàn)日期。依照上述方法，在同一條件下，重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)步驟，作為平行樣品。用%新潔爾滅溶液或75%乙醇溶液對(duì)菌檢室醫(yī)用干凈工作臺(tái)、地面進(jìn)行消毒。操作人員走開菌檢室，換掉無菌衣、口罩、手套，衣著白大衣，改換拖鞋，進(jìn)入菌檢準(zhǔn)備間。將菌檢實(shí)驗(yàn)物件由傳達(dá)窗拿出，將待加陽性比較的供試品轉(zhuǎn)入陽性比較間，置于生物安全柜內(nèi)并翻開風(fēng)機(jī)。制備金黃色葡萄球菌菌懸液（約含金黃色葡萄球菌50100cfu/ml），取1ml加入作為陽性的硫乙醇酸鹽流體培育基中，作為陽性比較。培育條件：凡硫乙醇酸鹽流體培育基、營養(yǎng)瓊脂培育基培育物，置于3035數(shù)顯生化培育箱

6、內(nèi)培育，改進(jìn)馬丁流體培育基培育物置于2328霉菌培育箱內(nèi)培育，培育時(shí)間均為14天。每日察看結(jié)果并記錄。結(jié)果判斷陽性比較管中應(yīng)生長優(yōu)秀，陰性比較管不得長菌。不然，考證無效。若供試品管均澄清，或雖顯污濁但經(jīng)確證無菌生長，判斷供試品符合規(guī)定；若供試品管中任何1管顯污濁并確證有菌生長，判供試品不符合規(guī)定，除非能充分證明試驗(yàn)結(jié)果無效即生長的微生物非供試品所含。當(dāng)符合以下最少一個(gè)條件時(shí)，方可判斷考證結(jié)果無效：無菌檢查試驗(yàn)所用的設(shè)施及環(huán)境的微生物監(jiān)控結(jié)果不符合無菌檢查的要求。回首無菌試驗(yàn)過程，發(fā)現(xiàn)可能有惹起微生物污染的要素。陰性比較管有菌生長。供試品管中生長的微生物經(jīng)判斷后，確證是因無菌試驗(yàn)中所使用的物件和無菌操作技術(shù)不妥惹起的。3/6無菌查驗(yàn)考證方案考證若經(jīng)確認(rèn)無效，應(yīng)重試。重試時(shí)，從頭取同量供試品，依法重試，若無菌生長，判供試品考證方案有效，如有菌生長，判斷供試品考證方案無效。4/6無菌查驗(yàn)考證方案有關(guān)記錄產(chǎn)品名稱規(guī)格型號(hào)生產(chǎn)批號(hào)滅菌批號(hào)查驗(yàn)依照查驗(yàn)日期查驗(yàn)結(jié)果天數(shù)1234567891011121314培育基供硫試乙品醇1酸供試鹽品流25/6無菌查驗(yàn)考證方案陽體性培養(yǎng)1陽基性2陰性供改試良品馬1丁供試培品養(yǎng)基1陰性考證結(jié)