動物細胞工程1（08上海生物）.制備單克隆抗體所采用的細胞工程技術(shù)包括①細胞培養(yǎng) ②細胞融合 ③胚胎移植 ④細胞核移植A.①② B.①③ C.②③ D.③④2.（浙江卷）6.實驗小鼠皮膚細胞培養(yǎng)（非克隆培養(yǎng)）的基本過程如圖所示。下列敘述錯誤的是A.甲過程需要對實驗小鼠進行消毒 B.乙過程對皮膚組織可用胰蛋白酶消化C.丙過程得到的細胞大多具有異倍體核型 D.T過程得到的細胞具有異質(zhì)性（15屆海淀高三上期中11）下列有關(guān)胚胎干細胞的敘述，不正確的是A.能分化為多種細胞B.不具有發(fā)育的全能性C.保持細胞分類能力 D.分化過程一般不可逆（15屆海淀高三上期中15）下列敘述不正確的是A.植物組織培養(yǎng)的再分化過程不需要添加植物生長調(diào)節(jié)劑B.原代培養(yǎng)的動物細胞基因型一般發(fā)不發(fā)生改變C.轉(zhuǎn)基因植物的培育一般需要借助于植物組織培養(yǎng)技術(shù)D.單克隆抗體制備以細胞融合和細胞培養(yǎng)技術(shù)為基礎(chǔ)（15屆海淀高三上期中16）用于動物細胞培養(yǎng)的組織和細胞大都來自胚胎或出生不久的幼齡動物，其主要原因是這樣的組織細胞A.容易產(chǎn)生各種變異 B.具有更強的全能性C.取材十分方便 D.具有更強的分裂能力（15屆海淀高三上期中17）科學家培育克隆羊時，使用了三種細胞核的供體細胞，分別將這些細胞核移入去核卵細胞的細胞質(zhì)中，形成重組細胞，發(fā)育成重組胚胎，這些重組胚胎的發(fā)育情況如下。細胞核供體細胞類型妊娠數(shù)/受體母羊數(shù)乳腺上皮細胞1/13胚胎成纖維細胞4/10早期胚胎細胞14/27據(jù)此分析并不正確的是A.早期胚胎細胞作為細胞核的供體細胞妊娠成功率最高B.克隆羊的遺傳信息與細胞核的供體細胞完全不同C.體細胞核移植難度高于胚胎細胞核移植D.重組細胞的發(fā)育與去核卵細胞的細胞質(zhì)有關(guān)（15屆海淀高三上期末6）動物細胞培養(yǎng)中存在“接觸抑制”現(xiàn)象，如果清除一部分貼壁細胞，鄰近細胞又迅速分裂重新填滿這一區(qū)域，然后再次停止分裂。據(jù)此作出假設，不合理的是A.清除部分細胞，鄰近細胞釋放某種信號分子重新啟動細胞周期B.細胞接觸后，為動物細胞停止分裂離開細胞周期提供了信號C.細胞周期是有其內(nèi)在節(jié)律性的，不受環(huán)境因素的干擾D.細胞膜表面上可能存在接受鄰近細胞信號的受體（15屆海淀高三上期末18）關(guān)于動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，不正確的是A.動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基不同B.動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋白酶C.煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個體，小鼠雜交瘤細胞可離體培養(yǎng)增殖D.動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)，莖尖培養(yǎng)可用于植物脫除病毒（15屆朝陽高三上期末29）某實驗室做了下圖所示的實驗研究。下列相關(guān)敘述中正確的是甲小鼠的纖維母細胞造呈母誘導干細胞?肝細胞、神經(jīng)細胞、上皮細胞等'一細艮③ ④細胞當單克隆抗體將H1N1病毒外殼蛋白注入乙小鼠一AY細胞A.與纖維母細胞相比，過程①形成的誘導干細胞的全能性較低B.單克隆抗體不需細胞膜上載體蛋白的協(xié)助就能釋放到細胞外C.每個丫細胞只產(chǎn)生一種抗體，故過程④不需進行篩選

D.過程②是誘導干細胞的結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程10（2015四川卷.6.）2015年2月3日，英國議會下院通過一項歷史性法案，允許以醫(yī)學手段培育'三親嬰兒〃。三親嬰兒的培育過程可選用如下技術(shù)路線。據(jù)圖分析，下列敘述錯誤的是??A.該技術(shù)可避免母親的線粒體遺傳病基因傳遞給后代B.捐獻者攜帶的紅綠色盲基因不能遺傳給三親嬰兒C.三親嬰兒的染色體全部來自母親提供的細胞核D.三親嬰兒的培育還需要早期環(huán)胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù).（江蘇卷）22.小鼠雜交瘤細胞表達的單克隆抗體用于人體試驗時易引起過敏反應為了克服這個缺陷，可選擇性擴增抗體的可變區(qū)基因（目的基因）后再重組表達。下列相關(guān)敘述正確的是A.設計擴增目的基因的引物時不必考慮表達載體的序列B.用PCR方法擴增目的基因時不必知道基因的全部序列C.PCR體系中一定要添加從受體細胞中提取的DNA聚合酶D.一定要根據(jù)目的基因編碼產(chǎn)物的特性選擇合適的受體細胞.（重慶卷）2.題2圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。下列有關(guān)敘述，正確的是小晶腹腔體外培養(yǎng)小晶腹腔體外培養(yǎng)單克隆抗體題2網(wǎng)A.①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應T淋巴細胞B.②中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細胞的形成C.③同時具有脾臟細胞和鼠骨髓瘤細胞的特性D.④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細胞群.（全國大綱卷）2.關(guān)于動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，錯誤的是A.動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基不同B.動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋白酶C.煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個體，小鼠雜交瘤細胞可離體培養(yǎng)增殖D.動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)，莖尖培養(yǎng)可用于植物脫除病毒.（豐臺2）下列過程不屬于克隆的是???A.單個大腸桿菌形成單菌落 B.壁虎斷尾后長出新尾巴C.PCR擴增抗除草劑基因 D.利用柳樹枝條繁殖植株15.（08理綜I）5.下列關(guān)于細胞工程的敘述，錯誤的是（）??A.電刺激可誘導植物原生質(zhì)體融合或動物細胞融合B.去除植物細胞的細胞壁和將動物組織分散成單個細胞均需酶處理C.小鼠骨髓瘤細胞和經(jīng)抗原免疫小鼠的B淋巴細胞融合可制務單克隆抗體D.某種植物甲乙兩品種的體細胞雜種與甲乙兩品種雜交后代的染色體數(shù)目相同

16（2015年江蘇卷.3.）下列關(guān)于動物細胞工程和胚胎工程的敘述，正確的是A.乳腺細胞比乳腺癌細胞更容易進行離體培養(yǎng)B.細胞核移植主要在同種動物、同種組織的細胞之間進行C.采用胚胎分割技術(shù)產(chǎn)生同卵多胚的數(shù)量是有限的D.培養(yǎng)早期胚胎的培養(yǎng)液中含維生素、激素等多種能源物質(zhì)（2012江蘇卷）22.下列事實能體現(xiàn)細胞全能性的是A.棉花根尖細胞經(jīng)誘導形成幼苗 B.單細胞的DNA在體外大量擴增C.動物雜交瘤細胞產(chǎn)生單克隆抗體D.小鼠體細胞經(jīng)誘導培育成小鼠（2015年天津，6）2015年2月3日，英國議會下院通過一項歷史性法案，允許以醫(yī)學手段培育“三親嬰兒”。三親嬰兒的培育過程可選用如下技術(shù)路線。親嬰兒的培育過程可選用如下技術(shù)路線。據(jù)圖分析，下列敘述錯誤的是（）A、該技術(shù)可避免母親的線粒體遺傳病基因傳遞給后代B、捐獻者攜帶的紅綠色盲基因不能遺傳給三親嬰兒C、三親嬰兒的染色體全部來自母親提供的細胞核D、三親嬰兒的培育還需要早期環(huán)胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)（2015年江蘇，3）下列關(guān)于動物細胞工程和胚胎工程的敘述，正確的是A.乳腺細胞比乳腺癌細胞更容易進行離體培養(yǎng)B.細胞核移植主要在同種動物、同種組織的細胞之間進行C.采用胚胎分割技術(shù)產(chǎn)生同卵多胚的數(shù)量是有限的D.培養(yǎng)早期胚胎的培養(yǎng)液中含維生素、激素等多種能源物質(zhì)（15屆海淀高三上期中36）（8分）抗體的結(jié)構(gòu)如右圖所示，它有兩條H鏈和兩條L鏈。同一物種C區(qū)氨基酸序列恒定，不同抗體的結(jié)合抗原的V區(qū)氨基酸序列有差異。（1）抗體結(jié)構(gòu)中肽鍵數(shù)目為p,氨基酸數(shù)目為a,二者的關(guān)系式為（2）取免疫后小鼠的B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合，經(jīng)篩選到雜交瘤細胞。將得到的雜交瘤細胞進行克隆化培養(yǎng)和 檢測以獲得具有特點的雜交瘤細胞。將得到的雜交瘤細胞進行體內(nèi)或放入培養(yǎng)箱進行體外培養(yǎng)，從細胞培養(yǎng)液中提取出單克隆抗體。（3）由于鼠源性抗體會使人產(chǎn)生免疫反應，導致該抗體失效，科研人員制備了嵌合性單克隆抗體，初步解決了這一問題。推測嵌合性抗體應由鼠源性抗體的 區(qū)和人抗體的 區(qū)組合而成。（4）為進一步獲得更符合治療要求的單克隆抗體，科研人員對抗體結(jié)構(gòu)進行精細研究，找到既不影響抗體空間結(jié)構(gòu)又降低免疫反應的序列，通過基因工程技術(shù)對抗體結(jié)構(gòu)進行人源化改造。這種人源單克隆抗體屬于 工程的產(chǎn)物。答案：（1）p=a-4（或“a=p+4”）（2）抗體能無限增殖并產(chǎn)生專一（特定）抗體CO2（恒溫）（3）VC（4）氨基酸蛋白質(zhì)（豐臺31）為治療某種遺傳性糖尿病，研究人員完成如下工作。I輸入重組細胞A選擇具有正常胰島B細胞

功能的胰島樣細胞I輸入重組細胞A選擇具有正常胰島B細胞

功能的胰島樣細胞X胰島樣細胞，定向誘導圖1利用現(xiàn)代生物技術(shù)治療遺傳性糖尿病的流程示意圖（1）圖1中①是取自患者體細胞的 ，過程②表示技術(shù)。TOC\o"1-5"\h\z（2）圖1中過程③表示技術(shù)，需要用到的兩類酶是 。（3）重組細胞在體外培養(yǎng)時，培養(yǎng)液中除了加入誘導物外，還應加入水、無機鹽、維生素、葡萄糖、氨基酸、等必需的營養(yǎng)成分，并在含5%CO2的無菌、恒溫培養(yǎng)箱中進行，CO2的作用是 。（4）定向誘導使重組細胞B發(fā)生 ，從而形成功能專一的胰島樣細胞。為檢測胰島樣細胞是否具有胰島B細胞的正常生理功能，研究人員分別控制甲、乙兩組培養(yǎng)液中 的濃度，將胰島樣細胞先后放在甲、乙兩組培養(yǎng)液中，保溫相同時間后檢測胰島素的分泌量。若誘導成功，則圖2中甲組應為情況下測得的胰島素分泌量，理由是 。（1）細胞核（1分） 核移植（1分） （2）轉(zhuǎn)基因（或：基因工程） 限制酶和DNA連接酶（3）動物血清（1分） 調(diào)節(jié)細胞培養(yǎng)液的pH（1分）（4）細胞分化（基因選擇性表達）葡萄糖葡萄糖濃度較高胰島素有降低血糖的功能，血糖濃度高時分泌量增多22.（15屆東城高三上期末31）科研人員為了解胰島素樣生長因子1（IGF1）對體外培養(yǎng)的兔關(guān)節(jié)軟骨細胞增殖以及細胞超微結(jié)構(gòu)的影響，進行了相關(guān)實驗。（1）取動物的軟骨，切碎后用處理使之分散成單個細胞，加入細胞培養(yǎng)液制成細胞懸液進行培養(yǎng)。將配制好的一定濃度的第2代軟骨細胞接種到七塊細胞培養(yǎng)板上，待細胞貼壁生長后，將每塊細胞培養(yǎng)板上的一半細胞加入濃度為100Hg?L-的IGF1,另一半用培養(yǎng)。每24h取出一塊培養(yǎng)板進行細胞的計數(shù)，繪制曲線如下圖。根據(jù)曲線分析，加入IGF1后可使縮短。（2）取第4代生長良好的軟骨細胞兩瓶，棄去原培養(yǎng)液，實驗組加入含IGF1的細胞培養(yǎng)液，與對照組一起繼續(xù)培養(yǎng)48h。電鏡下觀察細胞的超微結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)，實驗組細胞中線粒體變豐富，表明IGF1處理后，細胞內(nèi)供能充足，活躍；粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)增多，核糖體數(shù)量懶丁”表明IGF1處理后細胞內(nèi) .旺盛；細胞核體積增大，說明在IGF1作用下細胞持續(xù)增殖，細胞核中均合成旺盛。答案：（1）胰蛋白酶；不添加IGF1的細胞培養(yǎng)液；細胞周期（2）細胞代謝；蛋白質(zhì)合成DNA、RNA23.（15屆西城高三上期末22）為探究兩種抗癌藥物A和B聯(lián)合作用的效果，用A和B單獨及聯(lián)合處理體外培養(yǎng)的肝癌細胞，測定細胞周期各階段細胞所占比例及細胞凋亡率，結(jié)果如下表所示。請分析回答：組另IJ細胞周期細胞凋亡率（%）G,(%)S(%)Gc+分裂期（％）對照組132.7122.01245.285.29僅用藥物A34.1263.152.7318.14僅用藥物B90.276.543.1931.86藥物A.B聯(lián)合使用45.4648.386.1652.46（1）體外培養(yǎng)肝癌細胞時，培養(yǎng)基中除水、糖、氨基酸、無機鹽、微量元素、促生長因子外，通常還需要加入;傳代培養(yǎng)時，貼滿瓶壁的細胞需要用 等處理后分瓶繼續(xù)也關(guān)培養(yǎng)。（2）結(jié)果顯示，藥物A主要使肝癌細胞的細胞周期阻滯于 期，推測其作用機理是：（3）細胞內(nèi)ERK蛋白被磷酸化為pERK,可導致細胞增殖。用藥物B處理肝癌細胞后，與對照組相比，ERK蛋白含量無顯著變化，pERK的含量明顯下降，由此推測，藥物B可能通過 影響人肝癌細胞的增殖。（4）細胞凋亡是 控制的細胞編程性死亡。上述四組實驗結(jié)果，說明聯(lián)合用藥對肝癌細胞凋亡的作用是 ，兩種藥物在治療癌癥的效果上表現(xiàn)為 作用。答案：（1）血清、抗生素胰蛋白酶（2）S期阻斷DNA的復制（3）抑制ERK的磷酸化過程（4）基因促進凋亡作用強于單處理組協(xié)同24.（2014新課標卷I,40）［生物一一選修3：現(xiàn)代生物科技專題］（15分）某研究者用抗原（A）分別免疫3只同種小鼠（X、Y和Z）,每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價（能檢測出抗原抗體反應的血清最大稀釋倍數(shù)），結(jié)果如下圖所示。

32000280002400020000160001200080004000若要制備雜交瘤細胞，需取免疫后小鼠的3淋巴細胞（染色體數(shù)目40條），并將該細胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細胞（染色體數(shù)目60條）按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導細胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細胞?；卮鹣铝袉栴}：TOC\o"1-5"\h\z（1）制備融合所需的B淋巴細胞時，所用免疫小鼠的血清抗體效價需達到16000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過次免疫后才能有符合要求的。達到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細胞的是 小鼠，理由是 。（2）細胞融合實驗完成后，融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外，可能還有 ，體系中出現(xiàn)多種類型細胞的原因是 。（3）雜交瘤細胞中有 個細胞核，染色體數(shù)目最多是 條。（4）未融合的B淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是 ?！敬鸢浮浚?）四YY小鼠的抗體效價最高（2）B淋巴細胞相互融合形成的細胞，骨髓瘤細胞相互融合形成的細胞細胞融合是隨機的，且融合率達不到100%（3）1 100（4）不能無限增殖25.（2015重慶卷.7.）（10分）2014年埃博拉病在非洲蔓延，我國派出醫(yī)療隊首次在境外組建醫(yī)院，幫助非洲防控埃博拉疫情。（1）研究表明，埃博拉病毒侵入機體后，通過靶向感染、破壞吞噬細胞等，使其不能暴露該病毒的，以致感染信息不能呈遞給 ，從而無法正常激活細胞免疫和體液免疫應答過程，導致機體對該病毒的 免疫功能下降。因此病毒在體內(nèi)快速增殖、致病。（2）對志愿者接種埃博拉試驗疫苗后，機體免疫系統(tǒng)能產(chǎn)生相應的抗體，還能產(chǎn)生的免疫細胞有 。（3）用埃博拉病毒的某種蛋白免疫小鼠，通過 技術(shù)獲得雜交瘤細胞，用于生產(chǎn)單克隆抗體治療該病?！敬鸢浮刻赜锌乖蚩乖?MHC；T細胞；特異性記憶細胞、效應T細胞細胞融合或細胞雜交26.（新課標I卷）40【生物一一選修3現(xiàn)代生物科技專題】（15分）閱讀如下材料：材料甲：科學家將牛生長激素基因?qū)胄∈笫芫言?，得到了體型巨大的“超級小鼠〃；科學家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育出轉(zhuǎn)基因煙草。材料乙：T4溶菌酶在翁度較高時易失去活性，科學家對編碼T4溶菌酶的基因進行改造，使其表達的T4溶菌酶的第3位的異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼?，在該半胱氨酸與第97為的半胱氨酸之間形成了一個二硫鍵，提高了T4溶菌酶的耐熱性。材料丙：兔甲和兔乙是同一物種的兩個雌性個體，科學家兔甲受精卵發(fā)育成的胚胎移植到兔乙的體內(nèi)，成功產(chǎn)出兔甲的后代，證實了同一物種的胚胎課在不同個體的體內(nèi)發(fā)育?；卮鹣铝袉栴}：（1）材料甲屬于基因工程的范疇。將基因表達載體導入小鼠的受精卵中常用法。構(gòu)建基因表達載體常用的工具酶有 和。在培育轉(zhuǎn)基因植物是，常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化發(fā)，農(nóng)桿菌的作用是 。（2）材料乙屬于工程范疇。該工程是指以分子生物學相關(guān)理論為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對進行改造，或制造制造一種的技術(shù)。在該實例中，引起T4溶菌酶空間結(jié)構(gòu)改變的原因是組成該酶肽鏈的 序列發(fā)生了改變。（4）材料丙屬于胚胎工程的范疇。胚胎移植是指將獲得的早期胚胎移植到 種的，生理狀況相同的另一個雌性動物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育成新個體的技術(shù)。在資料丙的實例中，兔甲稱為體，兔乙稱為體?！敬鸢浮浚?）顯微注射法 限制性內(nèi)切酶DNA連接酶農(nóng)桿菌可感染植物，將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細胞中（2） 蛋白質(zhì)現(xiàn)有蛋白質(zhì) 新蛋白質(zhì) 氨基酸（3）同供體受體27.（2014山東卷，36）（12分）【現(xiàn)代生物科技專題】人組織纖溶酶原激活物（htPA）是一種重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下:

（1）htPA基因與載體用切割后，通過DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達載體。檢測目的基因是否已插入受體細胞DNA，可采用技術(shù)。（2）為獲取更多的卵（母）細胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其。采集的精子需要經(jīng)過，才具備受精能力。（3）將重組表達載體導入受精卵常用的方法是 。為了獲得母羊，移植前需對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進行。利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個轉(zhuǎn)基因個體，這體現(xiàn)了早期胚胎細胞的（4）若在轉(zhuǎn)ht-PA基因母羊的羊乳中檢測到，說明目的基因成功表達?！敬鸢浮竣磐N限制性核酸內(nèi)切酶（或同種限制酶）； DNA分子雜交（或核酸探針）（2）超數(shù)排卵； 獲能（處理）（3）顯微注射法； 性別鑒定；全能性（4）htPA（或人組織纖溶酶原激活物）.（福建卷）33.［生物-現(xiàn)代生物科技專題］必答題（10分）克隆豬成功率較低，與早期胚胎細胞的異常凋亡有關(guān)。Be/-2基因是細胞凋亡抑制基因，用PCR技術(shù)可以檢測該基因轉(zhuǎn)錄水平，進而了解該基因與不同胚胎時期細胞凋亡的關(guān)系?？寺∝i的培育及該基因轉(zhuǎn)錄水平檢測流程如圖。不同發(fā)育時期不同發(fā)育時期（1）圖中重組細胞的細胞核來自細胞，早期胚胎移入受體子宮后繼續(xù)發(fā)育，經(jīng)桑椹胚、囊胚和 胚最終發(fā)育為克隆豬。（2）在PCR過程中可檢測出cDNA中Bel-2cDNA的分子數(shù)，進而計算總mRNA中Bel-2mRNA的分子數(shù)，從而反映出Bel-2基因的轉(zhuǎn)錄水平。①圖中X表示過程。②從基因組數(shù)據(jù)庫中查詢Bel-2mRNA的核甘酸序列，以便根據(jù)這一序列設計合成用于PCR擴增，PCR擴增過程第一輪循環(huán)的模板是?！敬鸢浮浚?）體原腸（2）①反轉(zhuǎn)錄②引物Bel-2cDNA.（海南卷）31.【生物一一選修3：現(xiàn)代生物科技專題】（15分）單純皰疹病毒I型e551）可引起水泡性口唇炎。利用雜交瘤技術(shù)制備出抗HSV-1的單克隆抗體可快速檢測HSV-1?；卮鹣铝袉栴}：（1）在制備抗HSV-I的單克隆抗體的過程中，先給小鼠注射一種純化的HSV-1蛋白，一段時間后，若小鼠血清中抗―的抗體檢測呈陽性，說明小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了—反應，再從小鼠的—中獲取B淋巴細胞。將該B淋巴細胞與小鼠的—細胞融合，再經(jīng)過篩選、檢測，最終可獲得所需的雜交瘤細胞，該細胞具有的特點是—。（2）若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體，可將該雜交瘤細胞注射到小鼠的—中使其增殖，再從—中提取、純化獲得。（3）通過上述方法得到的單克隆抗體可準確地識別這種HSV-I蛋白，其原因是該抗體具有—和—等特性?！緟⒖即鸢浮浚?）HSV-1蛋白（1分） 體液免疫（1分，其他合理答案也給分）脾臟（1分，其他合理答案也給分） 骨髓瘤（1分）無限增值且產(chǎn)生專一抗體（3分，其他合理答案也給分）⑵腹腔腹水（每空2分，共4分）⑶純度高（2分）特異性強（2分，其他合理答案也給分）30（2012山東卷）35.（8分）【生物一現(xiàn)代生物科技專題】毛角蛋白^型中間絲（KIFII）基因與絨山羊的羊絨質(zhì)量密切相關(guān)。獲得轉(zhuǎn)KIFII基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡單流程如圖。轉(zhuǎn)基四城山羊成年年綠山單建人目前第成好雉竭胞因的生胤\羊股兒喪程如圖。轉(zhuǎn)基四城山羊成年年綠山單建人目前第成好雉竭胞因的生胤\羊股兒喪②.㈱蛆蟆央0-重施袞述蚊體（1）過程①中最常用的運載工具是 ，所需要的酶是限制酶和。（2）在過程②中，用處理將皮膚組織塊分散成單個成纖維細胞。在培養(yǎng)過程中，將成纖維細胞置于5%CO2的氣體環(huán)境中，CO2的作用是 。（3）在過成③中，用處理以獲取更多的卵（母）細胞。成熟卵（母）細胞在核移植前需要進行 處理。（4）從重組細胞到早期胚胎過程中所用的胚胎工程技術(shù)是 。在胚胎移植前，通過 技術(shù)可獲得較多胚胎。答案：（1）質(zhì)粒 DNA連接酶（2）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶） 維持培養(yǎng)基（液）的pH（3）促性腺激素（或促濾泡素，孕馬血清） 去核（4）（早期）胚胎培養(yǎng) 胚胎分割（16分）（豐臺1模）研究發(fā)現(xiàn)，胰腺癌的發(fā)生及惡性發(fā)展與端粒酶活性高有關(guān)。為尋找抑制胰腺癌細胞增殖存活的有效途徑，研究人員針對人端粒酶RNA（hTR）序列（5,-CCUAAC-3,）合成3種寡核甘酸：PS-ODN1、PS-ODN2和PS-ODN3。分別將3種寡核甘酸加入胰腺癌P3細胞和人成纖維細胞培養(yǎng)液中，在相同且適宜條件下培養(yǎng)一段時間后，測定細胞存活率和P3細胞端粒酶活性，結(jié)果如下表。序列成纖維細胞存活率/%P3細胞存活率/%P3細胞端粒酶相對活性PS-ODN15‘-GTTAGG-3;103.0433.340.28PS-ODN25,-CCTAAC-3,95.3681.370.97PS-ODN35,-AACTCG-3/106.491.540.95表PS-ODN處理后細胞存活率和端粒酶活性請回答問題：（1）癌細胞表面 減少，導致其極易在體內(nèi)擴散。部分胰腺癌患者出現(xiàn)血糖升高的癥狀，其原因是 O（2）將胰腺癌P3細胞和人皮膚成纖維細胞培養(yǎng)在含有 等營養(yǎng)物質(zhì)（答出兩種即可）的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)過程中需充入5%CO2其目的是—（3）測定細胞存活率時以 的培養(yǎng)液中的細胞數(shù)量為100%o由表中數(shù)據(jù)可知，可引起P3細胞存活率明顯下降，其原因是該寡核甘酸序列可以與hTR序列，從而降低端粒酶的活性。（4）PS-ODN序列對成纖維細胞的存活率無顯著影響，是因為 o答案：31.（16分，每空2分）（1）糖蛋白胰島素分泌不足（2）葡萄糖、無機鹽、血清等 調(diào)節(jié)細胞培養(yǎng)液的pH值（3）不含PS-ODN PS-ODN1 堿基互補配對（4）成纖維細胞的端粒酶活性低32.（2016全國卷II）［生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題］（15分）下圖表示通過核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動物（二倍體）的流程?；卮鹣铝袉栴}：（1）圖中A表示正常細胞核，染色體數(shù)為2n,則其性染色體的組成可為。過程①表示去除細胞核，該過程一般要在卵母細胞培養(yǎng)至適當時期再進行，去核時常采用的方法。②代表的過程是。（2）經(jīng)過多次傳代后，供體細胞中的穩(wěn)定性會降低，因此，選材時必須關(guān)注傳代次數(shù)。（3）若獲得的克隆動物與供體動物性狀不完全相同，從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是 。（4）與克隆羊”多莉（利）”培養(yǎng)成功一樣，其他克隆動物的成功獲得也證明了?！敬鸢浮浚?5分）（1）XX或XY 顯微操作（去核法） 胚胎移植（2）遺傳物質(zhì) （3）卵母細胞的細胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會對克隆動物的形狀產(chǎn)生影響（4）已經(jīng)分化的動物體細胞核具有全能性。33（08江蘇生物）B題。下面是以小鼠為對象進行的研究工作，請分析回答問題。（1）進行小鼠胚胎工程操作時，首先在光控周期下（光照14h，黑暗10h）飼養(yǎng)成年雌鼠，并注射促進性腺激素，目的是 。然后從雌鼠輸卵管中取出卵子，在一定條件下培養(yǎng)成熟；并從雄鼠附睪中取出精子，在一定條件下培養(yǎng)一段時間，目的是 。再在37℃，5%CO2條件下，精卵共同作用4h，沖洗后繼續(xù)培養(yǎng)。定時在顯微鏡下觀察胚胎的變化，第5天右以看到胚胎發(fā)生收縮，細胞間隙擴大，接著胚胎內(nèi)部出現(xiàn)裂隙，這是胚胎期開始的標志。（2）如果體外受精后，在精核與卵核融合之前，用微型吸管除雄核，再用細胞松弛素B處理（作用類似于用秋水仙素處理植物細胞），處理后的受精卵可發(fā)育成小鼠。這種方法在動物新品種選育中的顯著優(yōu)點是 O（3）如果將小鼠甲的體細胞核移入小鼠乙的去核卵細胞中，由重組細胞發(fā)育成小鼠丙，則小鼠丙的基因來源于O答案：（1）促進排卵（或超數(shù)排卵）使精子獲能囊胚（2）容易獲得純合子并縮短育種時間（3）小鼠甲（體細胞）的核基因和小鼠乙（卵細胞）的細胞質(zhì)基因（4）外源基因的插入使受精卵內(nèi)生命活動必需的某些基因不能正常表達34.（08寧夏）［生物一選修3現(xiàn)代生物科技專題］（15分）回答下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)的問題：⑴在動物細胞培養(yǎng)過程中。當貼壁細胞分裂生長到細胞表面 時，細胞會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的O此時，瓶壁上形成的細胞層數(shù)是 O要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理，可用的酶是⑵隨著細胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細胞分裂停止，進而出現(xiàn) 現(xiàn)象；但極少數(shù)細胞可以連續(xù)增殖，其中有些細胞會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成 細胞，該種細胞的黏著性 ,細胞膜表面蛋白質(zhì)（糖蛋白）的量 O⑶現(xiàn)用某種大分子染料，對細胞進行染色時，觀察到死細胞被染色，而活細胞不染色，原因是 O⑷檢查某種毒物是否能改變細胞染色體的數(shù)目，最好選用細胞分裂到 期的細胞用顯微鏡進行觀察。⑸在細胞培養(yǎng)過程中，通常在條件下保存細胞。因為在這種條件下，細胞中的活性降低，細胞 的速率降低。⑹給患者移植經(jīng)細胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后，發(fā)生了排斥現(xiàn)象，這是因為機體把移植的皮膚組織當作 進行攻擊答案：38、［生物一選修3現(xiàn)代生物科技專題］（15分）⑴相互接觸 接觸抑制 單層（或一層）胰蛋白酶⑵衰老甚至死亡不死性降低 減少⑶由于活細胞的膜具有選擇透過性，大分子染料不能進入活細胞內(nèi)，故活細胞不能著色（或由于死細胞的膜喪失了選擇透過性，大分子染料能夠進入死細胞內(nèi)而著色）⑷中⑸冷凍（或超低溫、液氮）酶新陳代謝 ⑹抗原35.（2011山東卷）人類疾病的轉(zhuǎn)基因動物模型常用于致病機理的探討及治療藥物的篩選。利用正常大鼠制備遺傳（3）子代大鼠如果，即可分別在分子水平和個體水平上說明高血壓相關(guān)基因已成功表和切割后連接成重組載體，35.（2011山東卷）人類疾病的轉(zhuǎn)基因動物模型常用于致病機理的探討及治療藥物的篩選。利用正常大鼠制備遺傳（3）子代大鼠如果，即可分別在分子水平和個體水平上說明高血壓相關(guān)基因已成功表和切割后連接成重組載體，達，然后可用其建立高血壓轉(zhuǎn)基因動物模型。（4）在上述轉(zhuǎn)基因大鼠的培育過程中，所用到的主要胚胎工程技術(shù)是、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植。答案：卵巢（2）目的基因運載體同一種限制酣 限制S5識別位點（3）檢測到相應蛋白質(zhì)出現(xiàn)高血壓 （4）體■外受精35（07高考寧夏）39.B.［生物一一選修3現(xiàn)代生物科技專題］現(xiàn)有A和B兩個肉牛品種，A品種牛的細胞組成可表示為A細胞核、A細胞質(zhì)，B品種牛則為B細胞核、B細胞質(zhì)。（1）如果要獲得一頭克隆牛，使其細胞由A細胞核和B細胞質(zhì)組成，基本步驟是，從A品種牛體內(nèi)取出體細胞，進行體外培養(yǎng)。然后再從培養(yǎng)細胞中取出注入B品種牛的卵母細胞，經(jīng)過某處刺激和培養(yǎng)后，可形成胚胎，該胚胎被稱為,將該胚胎移入代孕母牛的中，通過培育可達到目的。（2）一般來說，要想大量獲得這種克隆牛比較難，原因之一是卵母細胞的數(shù)量 ，為解決這一問題，可以用激素處理B品種母牛。（3）克隆牛的產(chǎn)生說明具有全能性?？寺∨５男誀钪饕憩F(xiàn)—品種牛的特征。由A、B兩品種雜交得到的牛與克隆牛相比，雜交牛細胞核的遺傳物質(zhì)來自個親本，細胞質(zhì)來自性親本，克隆牛和雜交牛的遺傳物質(zhì)組成（相同，不同）答案：（1）細胞核去核重組胚胎子宮（2）不足促性腺⑶動物體細胞核A兩雌不同36（2011福建卷）一對表現(xiàn)型正常的夫婦，生了一個鐮刀型細胞貧血癥（常染色體隱性遺傳?。┗純?。在他們欲生育第二胎時，發(fā)現(xiàn)妻子的雙側(cè)輸卵管完全堵塞，不能完成體內(nèi)受精。醫(yī)生為該夫婦實施了體外受精和產(chǎn)前基因診斷，過程如右圖。炎帝事子河抽取工分禺請回答：（1）過程①是指在體外進行的（2）在對胎兒進行鐮刀形細胞貧處理，從而使精子與卵子結(jié)合形成受精卵；過程②稱為 ?？诎Y的產(chǎn)前基因診斷時，要先從羊水中的胎兒細胞提取物質(zhì)③進行PCR擴增。然后用旅/II對擴增產(chǎn)物進行切割，產(chǎn)生多個片段的酶切產(chǎn)物。據(jù)此判斷， 族/I