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【一、基因工程】一、DNA重組所需的三種工具:1、限制性內(nèi)切酶——“手術(shù)刀”作用:切割磷酸二酯鍵
①EcoRⅠ→產(chǎn)生粘性末端
②SmaⅠ→產(chǎn)生平末端2、DNA連接酶——“分子縫合針”作用:鏈接磷酸二酯鍵
①E˙coliDNA連接酶→連接粘性末端②T4DNA連接酶→連接平末端或粘性末端3、載體——“分子運(yùn)輸車”條件:①有一個(gè)或者多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)
②能自我復(fù)制
③有特殊的標(biāo)記基因(常用質(zhì)粒作為載體)【一、基因工程】一、DNA重組所需的三種工具:1
二、基因工程的基本操作程序目的基因的獲取基因表達(dá)載體的構(gòu)建將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的檢測(cè)與鑒定二、基因工程的基本操作程序目的基因的獲取基因表達(dá)載體的構(gòu)建21、目的基因的獲?。?)從基因文庫(kù)獲取種類:基因組文庫(kù):部分基因文庫(kù):(如cDNA文庫(kù))含有一種生物的全部基因含有一種生物的部分基因(2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因(3)人工合成1、目的基因的獲取種類:基因組文庫(kù):部分基因文庫(kù):(如cDN3比較項(xiàng)目DNA復(fù)制PCR技術(shù)區(qū)別解旋方式解旋酶催化DNA在高溫下變性解旋場(chǎng)所細(xì)胞內(nèi)(主要在細(xì)胞核內(nèi))細(xì)胞外(主要在PCR擴(kuò)增儀中)酶解旋酶、DNA聚合酶耐熱的DNA聚合酶溫度細(xì)胞內(nèi)溫和條件控制溫度,需90℃~95℃高溫結(jié)果合成DNA分子合成DNA片段或基因聯(lián)系(1)模板:均需要脫氧核苷酸雙鏈作為模板(2)原料:均為四種脫氧核苷酸(3)酶:均需DNA聚合酶(4)引物:都需要引物,使DNA聚合酶從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸PCR技術(shù)與DNA復(fù)制的比較比較項(xiàng)目DNA復(fù)制PCR技術(shù)區(qū)別解旋方式解旋酶催化DNA在高4質(zhì)粒DNA分子限制酶處理一個(gè)切口兩個(gè)黏性末端兩個(gè)切口獲得目的基因DNA連接酶重組DNA分子(重組質(zhì)粒)——核心同一種2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建①過程::②組成:必須有啟動(dòng)子、目的基因、終止子以及標(biāo)記基因等。質(zhì)粒DNA分子限制酶處理一個(gè)切口兩個(gè)切口DNA連接酶重組DN5方法導(dǎo)入植物細(xì)胞導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞導(dǎo)入微生物細(xì)胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法(單子葉)花粉管通道法——顯微注射法——
感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子(
Ca2+法)3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞方法導(dǎo)入植物細(xì)胞導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞導(dǎo)入微生物細(xì)胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍64、目的基因的檢測(cè)與鑒定——檢查是否成功檢測(cè)—鑒定—①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA
上是否插入了目的基因②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定,如抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等方法——方法——方法——DNA分子雜交分子雜交抗原-抗體雜交4、目的基因的檢測(cè)與鑒定——檢查是否成功檢測(cè)—鑒定—①檢測(cè)轉(zhuǎn)7三、基因工程的應(yīng)用(1)植物方面1、抗蟲轉(zhuǎn)基因植物2、抗病轉(zhuǎn)基因植物3、抗逆轉(zhuǎn)基因植物4、改良植物品質(zhì)(2)動(dòng)物方面1、提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度2、改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)3、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物4、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作器官移植的供體(3)基因治療:將外源基因通過基因轉(zhuǎn)移技術(shù)將其插入病人的適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞中,使外源基因制造的產(chǎn)物能治療某種疾病。(只是改變體細(xì)胞的基因,生殖細(xì)胞未改變,后代可能還會(huì)患病。)三、基因工程的應(yīng)用(1)植物方面81、在基因工程中,把選出的目的基因(共1000個(gè)脫氧核苷酸對(duì),其中腺嘌嶺脫氧核苷酸是460個(gè))放入DNA擴(kuò)增儀中擴(kuò)增4代,那么,在擴(kuò)增儀中應(yīng)放入胞嘧啶脫氧核苷酸的個(gè)數(shù)是()個(gè)A.540
B.8100
C.17280
D.75602、在判斷抗蟲基因是否成功轉(zhuǎn)入棉花基因組的方法中,不屬于分子檢測(cè)的是(
)。A.通過觀察害蟲吃棉葉是否死亡B.檢測(cè)目的基因片段與DNA探針能否形成雜交帶C.檢測(cè)目的基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA與DNA探針能否形成雜交帶D.檢測(cè)目的基因表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)能否與特定抗體形成雜交帶1、在基因工程中,把選出的目的基因(共1000個(gè)脫氧核苷酸93、哪項(xiàng)不是基因表達(dá)載體的組成部分()
A.啟動(dòng)子B.終止密碼
C.標(biāo)記基因D.目的基因4、(2008,全國(guó)高考)已知某種限制酶在一線性DNA分子上有3個(gè)酶切位點(diǎn)。如果該線性DNA分子在3個(gè)酶切位點(diǎn)上都被該酶切斷,則會(huì)產(chǎn)生a、b、c、d四種不同長(zhǎng)度的DNA片段。現(xiàn)有多個(gè)上述線性DNA分子,若在每個(gè)DNA分子上至少有1個(gè)酶切位點(diǎn)被該酶切斷,則從理論上講,經(jīng)該酶酶切后,這些線性DNA分子最多能產(chǎn)生長(zhǎng)度不同的DNA片段種數(shù)是
()A.3B.4 C.9
D.12
a
b
c
d3、哪項(xiàng)不是基因表達(dá)載體的組成部分()A.310【二、蛋白質(zhì)工程】1、蛋白質(zhì)工程的實(shí)質(zhì):定向改造或生產(chǎn)人類所需的蛋白質(zhì)。2、結(jié)果:可以生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)3、操作對(duì)象:基因結(jié)構(gòu)4、過程:先反中心法則,后順中心法則。預(yù)期的蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)【二、蛋白質(zhì)工程】1、蛋白質(zhì)工程的實(shí)質(zhì):定向改造或生產(chǎn)人類所11【三、細(xì)胞工程】一、植物細(xì)胞工程(一)植物的組織培養(yǎng)1、細(xì)胞全能性:已經(jīng)分化的細(xì)胞仍具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。原因:生物的每一個(gè)細(xì)胞都含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)。2、全能性大小:受精卵>生殖細(xì)胞>體細(xì)胞植物細(xì)胞>動(dòng)物細(xì)胞分化程度低>分化程度高細(xì)胞分裂能力強(qiáng)>細(xì)胞分裂能力弱幼嫩的細(xì)胞>衰老的細(xì)胞
【三、細(xì)胞工程】一、植物細(xì)胞工程1、細(xì)胞全能性:已經(jīng)分化的細(xì)123、植物組織培養(yǎng)(1)培養(yǎng)基:
①水
②
無(wú)機(jī)鹽
③有機(jī)小分子:糖、氨基酸等
④激素:生長(zhǎng)素,細(xì)胞分裂素⑤瓊脂:起支持作用還需提供適宜的條件(如無(wú)菌環(huán)境和適宜溫度)3、植物組織培養(yǎng)(1)培養(yǎng)基:13(2)過程:離體細(xì)胞、組織、器官脫分化(無(wú)光)再分化(有光)愈傷組織胚狀體或叢芽試管苗愈傷組織特點(diǎn):細(xì)胞排列疏松、高度液泡化、細(xì)胞壁薄、呈無(wú)定形狀態(tài)注意:取材須取形成層,生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例。(2)過程:離體細(xì)胞、組織、器官脫分化(無(wú)光)再分化(有光14(二)植物體細(xì)胞雜交(二)植物體細(xì)胞雜交15意義:克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙、培育新品種胚狀體→胚薄膜→種皮培養(yǎng)基→胚乳應(yīng)用:(1)微型繁殖(2)作物脫毒(3)人工種子(4)單倍體育種(5)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)意義:克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙、培育新品種胚狀體→胚16二、動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官細(xì)胞懸浮液胰蛋白酶(分解彈性纖維)10代細(xì)胞原代培養(yǎng)50代細(xì)胞細(xì)胞株無(wú)限傳代細(xì)胞系遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)改變,無(wú)限增殖傳代培養(yǎng)原代細(xì)胞二、動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物171、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件(1)無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境(2)營(yíng)養(yǎng)(3)溫度和pH(4)氣體環(huán)境1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件(1)無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境182、植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較項(xiàng)目原理培養(yǎng)基結(jié)果培養(yǎng)目的植物
動(dòng)物細(xì)胞全能性細(xì)胞增殖固體蔗糖植物激素液體葡萄糖動(dòng)物血清培養(yǎng)成植株培養(yǎng)成細(xì)胞株細(xì)胞系快速繁殖培養(yǎng)無(wú)病毒植株獲得細(xì)胞產(chǎn)品、細(xì)胞2、植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較項(xiàng)目原理培養(yǎng)基結(jié)果培養(yǎng)目19多莉羊的培育過程卵細(xì)胞C母綿羊子宮A母綿羊B母綿羊乳腺細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核細(xì)胞核移植胚胎移植早期胚胎多莉羊分娩卵裂融合后的卵細(xì)胞細(xì)胞拆合技術(shù)妊娠3、多莉羊的培育過程卵細(xì)胞C母綿羊子宮A母綿羊B母綿羊乳腺細(xì)胞細(xì)204、克隆技術(shù)1、概念:是指從一個(gè)共同的祖先,通過無(wú)性繁殖的方法產(chǎn)生出來(lái)的一群遺傳特性相同的DNA分子、細(xì)胞或個(gè)體,是一種人工誘導(dǎo)的無(wú)性繁殖方式。①分子水平克?。篜CR技術(shù)②細(xì)胞水平克隆:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(單克隆抗體)③個(gè)體水平克?。嚎寺⊙蚨嗬?、哺乳動(dòng)物核移植:胚胎細(xì)胞移植、體細(xì)胞移植4、克隆技術(shù)1、概念:是指從一個(gè)共同的祖先,通過無(wú)性繁殖的方21
5、動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞A細(xì)胞B雜種細(xì)胞滅活的病毒物理法(電擊)化學(xué)法(聚乙二醇)仙臺(tái)病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒過程:5、動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞A細(xì)胞B雜種細(xì)胞滅活的病毒物理法(電擊226、單克隆抗體(1)概念:由單個(gè)B淋巴細(xì)胞經(jīng)過無(wú)性繁殖(克?。?,形成基因型相同的細(xì)胞群,這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。
(2)特點(diǎn):
特異性強(qiáng)、靈敏度高,可大量制備
6、單克隆抗體(1)概念:由單個(gè)B淋巴細(xì)胞經(jīng)過無(wú)性繁殖(克隆23
(3)單克隆抗體制備過程
注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選,繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體(3)單克隆抗體制備過程注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞245、植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞工程中所用技術(shù)與原理不相符的是
(
)
A.纖維素酶、果膠酶處理和胰蛋白酶處理——酶的專一性
B.植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)——細(xì)胞的全能性
C.原生質(zhì)體融合和動(dòng)物細(xì)胞融合——生物膜的流動(dòng)性
D.紫草細(xì)胞培養(yǎng)和雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)——細(xì)胞分裂6、下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是(
)A.培養(yǎng)中的人效應(yīng)T細(xì)胞能產(chǎn)生單克隆抗體
B.培養(yǎng)中的人B細(xì)胞能夠無(wú)限地增殖C.人的成熟紅細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)能形成細(xì)胞株
D.用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個(gè)肝細(xì)胞5、植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞工程中所用技術(shù)與原理不相符的是257、(多選)下列關(guān)于單克隆抗體的制備和應(yīng)用的敘述中,正確的是
(
)A.B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合,一般不需要滅活的仙臺(tái)病毒或聚乙二醇誘導(dǎo)B.融合后形成的雜交瘤細(xì)胞既能無(wú)限增殖,又能產(chǎn)生單克隆抗體C.體外培養(yǎng)時(shí),一個(gè)效應(yīng)B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體,但不能無(wú)限增殖D.單克隆抗體與常規(guī)抗體相比,特異性強(qiáng),靈敏度高,優(yōu)越性明顯7、(多選)下列關(guān)于單克隆抗體的制備和應(yīng)用的敘述中,正確的是26精原細(xì)胞有絲分裂初級(jí)精母細(xì)胞次級(jí)精母細(xì)胞精子細(xì)胞精子MⅠ第一階段第二階段第三階段MⅡ1.精子發(fā)生的過程多個(gè)精原細(xì)胞染色體復(fù)制變形!精原細(xì)胞經(jīng)過有絲分裂產(chǎn)生多個(gè)初級(jí)精母細(xì)胞。初級(jí)精母細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂形成含有單倍染色體的精子細(xì)胞。細(xì)胞核---高爾基體---中心體---線粒體---其他物質(zhì)---頭部頂體尾原生質(zhì)滴線粒體鞘(能量)初情期精原細(xì)胞有絲分裂初級(jí)精母細(xì)胞次級(jí)精母細(xì)胞精子細(xì)胞精子MⅠ第一27卵原細(xì)胞有絲分裂多個(gè)卵原細(xì)胞染色體復(fù)制初級(jí)卵母細(xì)胞MⅠ第一極體次級(jí)卵母細(xì)胞兩個(gè)第二極體第二極體卵子退化消失MⅡ排卵前后完成!在受精過程完成!被卵泡細(xì)胞包圍,形成卵泡2、卵子的形成過程:性別分化后卵原細(xì)胞有絲分裂多個(gè)卵原細(xì)胞染色體復(fù)制初級(jí)卵母細(xì)胞MⅠ第一極28過程受精前的準(zhǔn)備階段受精階段準(zhǔn)備階段1精子獲能準(zhǔn)備階段2卵子的準(zhǔn)備即精子必須在雌性動(dòng)物生殖道內(nèi)發(fā)生相應(yīng)生理變化后,才能獲得受精能力的現(xiàn)象。即卵子在輸卵管內(nèi)達(dá)到減數(shù)第二分裂中期(MⅡ)時(shí),才具備受精能力。包括精子穿越放射冠和透明帶,進(jìn)入卵黃膜,原核形成和配子結(jié)合。3、受精過程受精前的準(zhǔn)備階段受精階段準(zhǔn)備階段1準(zhǔn)備階段2即精子必須在294、受精過程的要點(diǎn):1.精子在受精前必須獲能。精子獲能的地點(diǎn)是_____________________。
2.在受精過程中,精子連續(xù)突破放射冠和透明帶兩道障礙都是依靠精子的哪些部分?___________.3.防止多個(gè)精子進(jìn)入卵中受精的兩道屏障分別是____________和_________________.(排他性!)4.卵子是在什么時(shí)候才徹底完成第二次減數(shù)分裂的?_________.透明帶反應(yīng)卵黃膜的封閉作用頂體等雌性動(dòng)物的生殖道里受精時(shí)5.受精作用完成的標(biāo)志是_________________________________.透明帶和卵黃膜之間出現(xiàn)兩個(gè)極體.這兩個(gè)極體分別是___________________第一、第二極體各一個(gè)4、受精過程的要點(diǎn):1.精子在受精前必須獲能。精子獲能的地點(diǎn)30受精卵:最初發(fā)育在輸卵管進(jìn)行有絲分裂。卵裂期:在透明帶內(nèi)進(jìn)行有絲分裂,細(xì)胞數(shù)量不斷增加,但胚胎總體積并不增加,或略有減少。桑椹胚:由具有全能性細(xì)胞構(gòu)成,細(xì)胞數(shù)在32個(gè)左右,排列緊密,形似桑椹。囊胚(內(nèi)含囊胚腔):開始分化。
內(nèi)細(xì)胞團(tuán):發(fā)育成胎兒各組織;
滋養(yǎng)層細(xì)胞:發(fā)育成胎膜和胎盤原腸胚(內(nèi)含原腸腔)5、胚胎發(fā)育受精卵:最初發(fā)育在輸卵管進(jìn)行有絲分裂。卵裂期:在透明帶內(nèi)進(jìn)行318、精子與卵子結(jié)合過程中穿越的兩道屏障是()①頂體反應(yīng)②透明帶反應(yīng)③卵黃膜封閉作用④精子穿越放射冠
A.①②B.②③
C.③④D.②④9、在受精過程中()①精子必須發(fā)生頂體反應(yīng),釋放頂體酶②頂體酶可使精子穿過放射冠、透明帶、卵細(xì)胞膜③卵細(xì)胞恢復(fù)并很快完成了第一次成熟分裂④精子和卵細(xì)胞的細(xì)胞核分別形成雄原核和雌原核⑤透明帶反應(yīng)防止了多精入卵和多精受精的發(fā)生
A.①②⑤B.①④⑤
C.②③④D.②④⑤8、精子與卵子結(jié)合過程中穿越的兩道屏障是()326、體外受精(1)卵子的收集和培養(yǎng)沖卵法:用促性腺激素處理母畜,促使其超數(shù)排卵,并從其輸卵管里沖取卵子,直接和獲能精子在體外受精采集法:從已被屠宰的母畜的卵巢里采集卵母細(xì)胞,經(jīng)體外人工培養(yǎng)后,再與獲能精子體外受精(2)精子的采集和獲能:
采集:假陰道法,手握法和電刺激等。獲能:培養(yǎng)法、化學(xué)誘導(dǎo)法6、體外受精(1)卵子的收集和培養(yǎng)沖卵法:用促性腺激素處理母33(3)受精:在獲能溶液或?qū)S玫氖芫芤褐型瓿墒芫^程。7、胚胎的早期培養(yǎng):(1)培養(yǎng)液的成分應(yīng)包括:水、無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及動(dòng)物血清等。①試管牛的哪些階段是在試管中完成的?______________________________________.②培育試管牛要利用哪些重要的生物技術(shù)?______________________________________.
體外受精,早期胚胎發(fā)育(如卵裂)體外受精,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),胚胎移植(3)受精:在獲能溶液或?qū)S玫氖芫芤褐型瓿墒芫^程。7、胚348、胚胎工程的應(yīng)用前景(一)胚胎工程技術(shù)包括哪些?1.體外受精
2.胚胎移植
3.胚胎分割
4體外生產(chǎn)胚胎技術(shù)
5.胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)(二)目前應(yīng)用較多的是哪些?
胚胎移植、胚胎分割、體外生產(chǎn)胚胎技術(shù)。8、胚胎工程的應(yīng)用前景(一)胚胎工程技術(shù)包括哪些?35(1)胚胎移植
①概念:將雌性動(dòng)物體內(nèi)的早期胚胎(或者通過其他方式得到的胚胎),移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi),使之發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。②胚胎移植的基本程序:(1)供體、受體的選擇和處理(2)配種或進(jìn)行人工受精(3)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存(4)胚胎移植(手術(shù)法、非手術(shù)法)(5)移植后的檢查(1)胚胎移植②胚胎移植的基本程序:36選擇供體母牛(良種!)受體母牛【同期發(fā)情處理】-超數(shù)排卵(!)供體公牛(良種)配種沖卵(收集胚胎)質(zhì)量檢查、培養(yǎng)胚胎移植妊娠檢查分娩(胚胎移植的犢牛)②胚胎移植的基本程序(以牛為例):選擇供體母牛(良種!)受體母?!就诎l(fā)情處理】-超數(shù)排卵(!371)加速育種工作和品種改良;2)可以充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛力,縮短繁殖周期,增加其一生中繁殖的后代數(shù)量。3)大量節(jié)省購(gòu)買種畜的費(fèi)用;4)一胎多產(chǎn);5)保存品種資源和瀕危物種;③胚胎移植的現(xiàn)狀和意義:1)加速育種工作和品種改良;③胚胎移植的現(xiàn)狀和意義:38(2)胚胎分割(無(wú)性繁殖、克隆)①概念:采用顯微手術(shù)(機(jī)械方法)的方法將早期胚胎分割成2分胚,4分胚或8分胚,經(jīng)體內(nèi)或體外培養(yǎng)后植入受體,以得到同卵雙胎或同卵多胎的技術(shù)。②理論基礎(chǔ):
動(dòng)物胚胎細(xì)胞的全能性。所以胚胎分割的時(shí)期為:囊胚或桑椹胚。③注意:內(nèi)細(xì)胞團(tuán)要均等分割。(2)胚胎分割(無(wú)性繁殖、克?。诶碚摶A(chǔ):39(3)干細(xì)胞①概念:是一種未充分分化,尚不成熟的細(xì)胞,具有分裂、分化為各種組織、器官和人體的潛在功能。②分類:全能干細(xì)胞:受精卵(具全能性)
萬(wàn)能干細(xì)胞:胚胎干細(xì)胞(具全能性)多能干細(xì)胞:(骨髓中的造血干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞、皮膚干細(xì)胞等,不能發(fā)育成個(gè)體。)
專能干細(xì)胞:(只能產(chǎn)生一種細(xì)胞,如腸上皮細(xì)胞)(3)干細(xì)胞②分類:40③胚胎干細(xì)胞:簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞,是由早期胚胎(卵裂、桑椹胚、囊胚期)或原始性腺中分離出來(lái)的一類細(xì)胞,能分裂、分化成各種組織器官。用途:1)治療人類的某些頑癥。利用ES細(xì)胞可以誘導(dǎo)分化形成新的組織細(xì)胞的特性,移植ES細(xì)胞可使壞死或退化的部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能。2)培育出人造組織器官,用于器官移植。3)ES細(xì)胞也是研究體外細(xì)胞分化的理想材料。③胚胎干細(xì)胞:簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞,是由早期胚胎(卵裂、桑椹胚4110、下列有關(guān)動(dòng)物胚胎移植的敘述中,錯(cuò)誤的是()A.受孕母畜體內(nèi)的受精卵或胚胎均能移植B.受體母畜必須處于與供體母畜同步發(fā)情的狀態(tài)C.超數(shù)排卵技術(shù)要使用一定的激素D.試管嬰兒只是受精及早期卵裂過程在試管中進(jìn)行10、下列有關(guān)動(dòng)物胚胎移植的敘述中,錯(cuò)誤的是(4211、下列對(duì)于優(yōu)良種畜的胚胎移植的說法不正確的是()A.供體母牛必須是同一物種的良種B.受體母牛必須是同一物種的良種C.供體公牛必須是同一物種的良種D.受體母??梢允峭晃锓N的一般健康牛11、下列對(duì)于優(yōu)良種畜的胚胎移植的說法不正確的是(4312、利用胚胎干細(xì)胞治療肝衰竭,實(shí)現(xiàn)此過程的重要原因是()A.細(xì)胞分裂
B.細(xì)胞特化C.細(xì)胞分化
D.細(xì)胞增殖13、下列能正確表示高等動(dòng)物胚胎發(fā)育順序的是
(
)A、受精卵→卵裂→原腸胚→囊胚→組織器官的分化
B、卵→卵裂→原腸胚→組織器官分化C、受精卵→囊胚→原腸胚→幼體D、受精卵→桑椹胚→囊胚→原腸胚→組織器官的分化12、利用胚胎干細(xì)胞治療肝衰竭,實(shí)現(xiàn)此過程的重要原因是(44(三)生物技術(shù)的安全性和倫理問題1、轉(zhuǎn)基因生物的安全性(1)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性問題①
安全:滯后效應(yīng)、過敏原、營(yíng)養(yǎng)成分改變。②
安全:對(duì)生物多樣性的影響。③
安全:對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響。食物環(huán)境生物(2)轉(zhuǎn)基因生物存在安全性的原因①目前對(duì)基因的結(jié)構(gòu)基因間的
、基因的調(diào)控機(jī)制等都了解得相當(dāng)有限。②目的基因往往是
的基因。③外源基因插入宿主基因組的部位是
的。相互作用異種生物隨機(jī)(三)生物技術(shù)的安全性和倫理問題食物環(huán)境生物(2)轉(zhuǎn)基因生物452、生物技術(shù)中的倫理問題(1)克隆人:兩種不同觀點(diǎn),多數(shù)人持否定態(tài)度。①否定的理由:克隆人嚴(yán)重違反了人類倫理道德,是克隆技術(shù)的濫用;克隆人沖擊了現(xiàn)有的婚姻、家庭和兩性關(guān)系等傳統(tǒng)的倫理道德觀念;克隆人是在人為地制造在心理上和社會(huì)地位上都不健全的人等。②肯定的理由:技術(shù)性問題可以通過胚胎分級(jí)、基因診斷和染色體檢查等方法解決;不成熟的技術(shù)也只有通過實(shí)踐才能成熟。③中國(guó)政府的態(tài)度:禁止生殖性克隆,不反對(duì)治療性克隆。四不原則:不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人的實(shí)驗(yàn)。2、生物技術(shù)中的倫理問題46(2)設(shè)計(jì)試管嬰兒:兩種不同觀點(diǎn),多數(shù)人認(rèn)可。①否定的理由:把試管嬰兒當(dāng)作人體零配件工廠,是對(duì)生命的不尊重;早期生命也有活下去的權(quán)利,拋棄或殺死多余胚胎,無(wú)異于“謀殺”。②肯定的理由:解決了不育問題;提供造血干細(xì)胞是救治患者最好、最快捷的方法;提供臍帶血并不會(huì)對(duì)試管嬰兒造成損傷。(3)基因身份證①否定的理由:引起基因歧視,勢(shì)必造成遺傳性失業(yè)大軍、造成個(gè)人婚姻困難、人際關(guān)系疏遠(yuǎn)等嚴(yán)重后果。②肯定的理由:通過基因檢測(cè)可以及早采取預(yù)防措施,適時(shí)進(jìn)行治療,達(dá)到挽救患者生命的目的;對(duì)于基因歧視對(duì)象,通過正確的科學(xué)知識(shí)傳播、倫理道德教育和立法得以解決。(2)設(shè)計(jì)試管嬰兒:兩種不同觀點(diǎn),多數(shù)人認(rèn)可。(3)基因身份473、禁止生物武器(1)生物武器的特點(diǎn):①致病力強(qiáng),傳染性大。②有潛伏期。(潛伏期的癥狀不明顯,難以及時(shí)發(fā)現(xiàn)。)③污染面積大,危害時(shí)間長(zhǎng)。④傳染途徑(生物武器可通過多種途徑使人感染發(fā)病。)種類例證病菌炭疽桿菌、傷寒桿菌、霍亂弧菌病毒天花病毒、動(dòng)物痘病毒生化毒劑肉毒桿菌毒素經(jīng)基因重組的致病菌通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)改造的蠟狀桿菌、重組流感病毒(2)生物武器的種類:3、禁止生物武器種類例證病菌炭疽桿菌、傷寒桿菌、霍亂弧菌病毒48《禁止生物武器公約》《禁止生物武器公約》4914、(2012·浙江五校聯(lián)考)下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物與環(huán)境安全的敘述錯(cuò)誤的是
(
)A.重組的微生物在降解污染物的過程中可能產(chǎn)生二次污染。B.種植抗蟲棉可以減少農(nóng)藥的使用量,對(duì)環(huán)境沒有任何負(fù)面影響。C.如果轉(zhuǎn)基因花粉中有毒蛋白或過敏蛋白,可能會(huì)通過食物鏈傳遞到人體內(nèi)。D.轉(zhuǎn)基因生物所帶來(lái)的環(huán)境安全問題是可以解決的。15、設(shè)計(jì)試管嬰兒未利用下列哪項(xiàng)技術(shù)手段(
)A.體外受精技術(shù)B.胚胎移植技術(shù)C.植入前胚胎遺傳學(xué)診斷技術(shù)D.轉(zhuǎn)基因技術(shù)14、(2012·浙江五校聯(lián)考)下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物與環(huán)境安全5016、下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物安全性的敘述中,錯(cuò)誤的是()A.我國(guó)已經(jīng)對(duì)轉(zhuǎn)基因食品和轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品強(qiáng)制實(shí)施了產(chǎn)品標(biāo)識(shí)制度B.國(guó)際上大多數(shù)國(guó)家都在轉(zhuǎn)基因食品標(biāo)簽上警示性注明可能的危害C.開展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、預(yù)警跟蹤和風(fēng)險(xiǎn)管理是保障轉(zhuǎn)基因生物安全的前提D.目前對(duì)轉(zhuǎn)基因生物安全性的爭(zhēng)論主要集中在食用安全性和環(huán)境安全性上16、下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物安全性的敘述中,錯(cuò)誤的是(5117、據(jù)統(tǒng)計(jì),從20世紀(jì)90年代至今,全世界包括基因制藥在內(nèi)的生物技術(shù)藥物的銷售額以年均30%的速度增長(zhǎng),生物制藥已成為21世紀(jì)的朝陽(yáng)產(chǎn)業(yè)。下列有關(guān)說法不正確的是
()
A.我們可以利用轉(zhuǎn)基因工程技術(shù)使哺乳動(dòng)物本身變成“批量生產(chǎn)藥物的工廠”B.對(duì)于基因制藥,我們應(yīng)該科學(xué)地認(rèn)識(shí)和評(píng)估,保障公眾的知情權(quán)C.利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)還可以進(jìn)行基因治療,現(xiàn)在技術(shù)已經(jīng)完全成熟D.由于轉(zhuǎn)基因生物的安全問題,國(guó)家應(yīng)建立相應(yīng)的評(píng)估及預(yù)警機(jī)制17、據(jù)統(tǒng)計(jì),從20世紀(jì)90年代至今,全世界包括基因制藥在內(nèi)52【一、基因工程】一、DNA重組所需的三種工具:1、限制性內(nèi)切酶——“手術(shù)刀”作用:切割磷酸二酯鍵
①EcoRⅠ→產(chǎn)生粘性末端
②SmaⅠ→產(chǎn)生平末端2、DNA連接酶——“分子縫合針”作用:鏈接磷酸二酯鍵
①E˙coliDNA連接酶→連接粘性末端②T4DNA連接酶→連接平末端或粘性末端3、載體——“分子運(yùn)輸車”條件:①有一個(gè)或者多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)
②能自我復(fù)制
③有特殊的標(biāo)記基因(常用質(zhì)粒作為載體)【一、基因工程】一、DNA重組所需的三種工具:53
二、基因工程的基本操作程序目的基因的獲取基因表達(dá)載體的構(gòu)建將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的檢測(cè)與鑒定二、基因工程的基本操作程序目的基因的獲取基因表達(dá)載體的構(gòu)建541、目的基因的獲?。?)從基因文庫(kù)獲取種類:基因組文庫(kù):部分基因文庫(kù):(如cDNA文庫(kù))含有一種生物的全部基因含有一種生物的部分基因(2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因(3)人工合成1、目的基因的獲取種類:基因組文庫(kù):部分基因文庫(kù):(如cDN55比較項(xiàng)目DNA復(fù)制PCR技術(shù)區(qū)別解旋方式解旋酶催化DNA在高溫下變性解旋場(chǎng)所細(xì)胞內(nèi)(主要在細(xì)胞核內(nèi))細(xì)胞外(主要在PCR擴(kuò)增儀中)酶解旋酶、DNA聚合酶耐熱的DNA聚合酶溫度細(xì)胞內(nèi)溫和條件控制溫度,需90℃~95℃高溫結(jié)果合成DNA分子合成DNA片段或基因聯(lián)系(1)模板:均需要脫氧核苷酸雙鏈作為模板(2)原料:均為四種脫氧核苷酸(3)酶:均需DNA聚合酶(4)引物:都需要引物,使DNA聚合酶從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸PCR技術(shù)與DNA復(fù)制的比較比較項(xiàng)目DNA復(fù)制PCR技術(shù)區(qū)別解旋方式解旋酶催化DNA在高56質(zhì)粒DNA分子限制酶處理一個(gè)切口兩個(gè)黏性末端兩個(gè)切口獲得目的基因DNA連接酶重組DNA分子(重組質(zhì)粒)——核心同一種2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建①過程::②組成:必須有啟動(dòng)子、目的基因、終止子以及標(biāo)記基因等。質(zhì)粒DNA分子限制酶處理一個(gè)切口兩個(gè)切口DNA連接酶重組DN57方法導(dǎo)入植物細(xì)胞導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞導(dǎo)入微生物細(xì)胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法(單子葉)花粉管通道法——顯微注射法——
感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子(
Ca2+法)3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞方法導(dǎo)入植物細(xì)胞導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞導(dǎo)入微生物細(xì)胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍584、目的基因的檢測(cè)與鑒定——檢查是否成功檢測(cè)—鑒定—①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA
上是否插入了目的基因②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定,如抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等方法——方法——方法——DNA分子雜交分子雜交抗原-抗體雜交4、目的基因的檢測(cè)與鑒定——檢查是否成功檢測(cè)—鑒定—①檢測(cè)轉(zhuǎn)59三、基因工程的應(yīng)用(1)植物方面1、抗蟲轉(zhuǎn)基因植物2、抗病轉(zhuǎn)基因植物3、抗逆轉(zhuǎn)基因植物4、改良植物品質(zhì)(2)動(dòng)物方面1、提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度2、改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)3、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物4、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作器官移植的供體(3)基因治療:將外源基因通過基因轉(zhuǎn)移技術(shù)將其插入病人的適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞中,使外源基因制造的產(chǎn)物能治療某種疾病。(只是改變體細(xì)胞的基因,生殖細(xì)胞未改變,后代可能還會(huì)患病。)三、基因工程的應(yīng)用(1)植物方面601、在基因工程中,把選出的目的基因(共1000個(gè)脫氧核苷酸對(duì),其中腺嘌嶺脫氧核苷酸是460個(gè))放入DNA擴(kuò)增儀中擴(kuò)增4代,那么,在擴(kuò)增儀中應(yīng)放入胞嘧啶脫氧核苷酸的個(gè)數(shù)是()個(gè)A.540
B.8100
C.17280
D.75602、在判斷抗蟲基因是否成功轉(zhuǎn)入棉花基因組的方法中,不屬于分子檢測(cè)的是(
)。A.通過觀察害蟲吃棉葉是否死亡B.檢測(cè)目的基因片段與DNA探針能否形成雜交帶C.檢測(cè)目的基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA與DNA探針能否形成雜交帶D.檢測(cè)目的基因表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)能否與特定抗體形成雜交帶1、在基因工程中,把選出的目的基因(共1000個(gè)脫氧核苷酸613、哪項(xiàng)不是基因表達(dá)載體的組成部分()
A.啟動(dòng)子B.終止密碼
C.標(biāo)記基因D.目的基因4、(2008,全國(guó)高考)已知某種限制酶在一線性DNA分子上有3個(gè)酶切位點(diǎn)。如果該線性DNA分子在3個(gè)酶切位點(diǎn)上都被該酶切斷,則會(huì)產(chǎn)生a、b、c、d四種不同長(zhǎng)度的DNA片段。現(xiàn)有多個(gè)上述線性DNA分子,若在每個(gè)DNA分子上至少有1個(gè)酶切位點(diǎn)被該酶切斷,則從理論上講,經(jīng)該酶酶切后,這些線性DNA分子最多能產(chǎn)生長(zhǎng)度不同的DNA片段種數(shù)是
()A.3B.4 C.9
D.12
a
b
c
d3、哪項(xiàng)不是基因表達(dá)載體的組成部分()A.362【二、蛋白質(zhì)工程】1、蛋白質(zhì)工程的實(shí)質(zhì):定向改造或生產(chǎn)人類所需的蛋白質(zhì)。2、結(jié)果:可以生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)3、操作對(duì)象:基因結(jié)構(gòu)4、過程:先反中心法則,后順中心法則。預(yù)期的蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)【二、蛋白質(zhì)工程】1、蛋白質(zhì)工程的實(shí)質(zhì):定向改造或生產(chǎn)人類所63【三、細(xì)胞工程】一、植物細(xì)胞工程(一)植物的組織培養(yǎng)1、細(xì)胞全能性:已經(jīng)分化的細(xì)胞仍具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。原因:生物的每一個(gè)細(xì)胞都含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)。2、全能性大小:受精卵>生殖細(xì)胞>體細(xì)胞植物細(xì)胞>動(dòng)物細(xì)胞分化程度低>分化程度高細(xì)胞分裂能力強(qiáng)>細(xì)胞分裂能力弱幼嫩的細(xì)胞>衰老的細(xì)胞
【三、細(xì)胞工程】一、植物細(xì)胞工程1、細(xì)胞全能性:已經(jīng)分化的細(xì)643、植物組織培養(yǎng)(1)培養(yǎng)基:
①水
②
無(wú)機(jī)鹽
③有機(jī)小分子:糖、氨基酸等
④激素:生長(zhǎng)素,細(xì)胞分裂素⑤瓊脂:起支持作用還需提供適宜的條件(如無(wú)菌環(huán)境和適宜溫度)3、植物組織培養(yǎng)(1)培養(yǎng)基:65(2)過程:離體細(xì)胞、組織、器官脫分化(無(wú)光)再分化(有光)愈傷組織胚狀體或叢芽試管苗愈傷組織特點(diǎn):細(xì)胞排列疏松、高度液泡化、細(xì)胞壁薄、呈無(wú)定形狀態(tài)注意:取材須取形成層,生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例。(2)過程:離體細(xì)胞、組織、器官脫分化(無(wú)光)再分化(有光66(二)植物體細(xì)胞雜交(二)植物體細(xì)胞雜交67意義:克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙、培育新品種胚狀體→胚薄膜→種皮培養(yǎng)基→胚乳應(yīng)用:(1)微型繁殖(2)作物脫毒(3)人工種子(4)單倍體育種(5)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)意義:克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙、培育新品種胚狀體→胚68二、動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官細(xì)胞懸浮液胰蛋白酶(分解彈性纖維)10代細(xì)胞原代培養(yǎng)50代細(xì)胞細(xì)胞株無(wú)限傳代細(xì)胞系遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)改變,無(wú)限增殖傳代培養(yǎng)原代細(xì)胞二、動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物691、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件(1)無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境(2)營(yíng)養(yǎng)(3)溫度和pH(4)氣體環(huán)境1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件(1)無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境702、植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較項(xiàng)目原理培養(yǎng)基結(jié)果培養(yǎng)目的植物
動(dòng)物細(xì)胞全能性細(xì)胞增殖固體蔗糖植物激素液體葡萄糖動(dòng)物血清培養(yǎng)成植株培養(yǎng)成細(xì)胞株細(xì)胞系快速繁殖培養(yǎng)無(wú)病毒植株獲得細(xì)胞產(chǎn)品、細(xì)胞2、植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較項(xiàng)目原理培養(yǎng)基結(jié)果培養(yǎng)目71多莉羊的培育過程卵細(xì)胞C母綿羊子宮A母綿羊B母綿羊乳腺細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核細(xì)胞核移植胚胎移植早期胚胎多莉羊分娩卵裂融合后的卵細(xì)胞細(xì)胞拆合技術(shù)妊娠3、多莉羊的培育過程卵細(xì)胞C母綿羊子宮A母綿羊B母綿羊乳腺細(xì)胞細(xì)724、克隆技術(shù)1、概念:是指從一個(gè)共同的祖先,通過無(wú)性繁殖的方法產(chǎn)生出來(lái)的一群遺傳特性相同的DNA分子、細(xì)胞或個(gè)體,是一種人工誘導(dǎo)的無(wú)性繁殖方式。①分子水平克?。篜CR技術(shù)②細(xì)胞水平克隆:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(單克隆抗體)③個(gè)體水平克隆:克隆羊多利2、哺乳動(dòng)物核移植:胚胎細(xì)胞移植、體細(xì)胞移植4、克隆技術(shù)1、概念:是指從一個(gè)共同的祖先,通過無(wú)性繁殖的方73
5、動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞A細(xì)胞B雜種細(xì)胞滅活的病毒物理法(電擊)化學(xué)法(聚乙二醇)仙臺(tái)病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒過程:5、動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞A細(xì)胞B雜種細(xì)胞滅活的病毒物理法(電擊746、單克隆抗體(1)概念:由單個(gè)B淋巴細(xì)胞經(jīng)過無(wú)性繁殖(克?。?,形成基因型相同的細(xì)胞群,這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。
(2)特點(diǎn):
特異性強(qiáng)、靈敏度高,可大量制備
6、單克隆抗體(1)概念:由單個(gè)B淋巴細(xì)胞經(jīng)過無(wú)性繁殖(克隆75
(3)單克隆抗體制備過程
注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選,繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體(3)單克隆抗體制備過程注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞765、植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞工程中所用技術(shù)與原理不相符的是
(
)
A.纖維素酶、果膠酶處理和胰蛋白酶處理——酶的專一性
B.植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)——細(xì)胞的全能性
C.原生質(zhì)體融合和動(dòng)物細(xì)胞融合——生物膜的流動(dòng)性
D.紫草細(xì)胞培養(yǎng)和雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)——細(xì)胞分裂6、下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是(
)A.培養(yǎng)中的人效應(yīng)T細(xì)胞能產(chǎn)生單克隆抗體
B.培養(yǎng)中的人B細(xì)胞能夠無(wú)限地增殖C.人的成熟紅細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)能形成細(xì)胞株
D.用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個(gè)肝細(xì)胞5、植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞工程中所用技術(shù)與原理不相符的是777、(多選)下列關(guān)于單克隆抗體的制備和應(yīng)用的敘述中,正確的是
(
)A.B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合,一般不需要滅活的仙臺(tái)病毒或聚乙二醇誘導(dǎo)B.融合后形成的雜交瘤細(xì)胞既能無(wú)限增殖,又能產(chǎn)生單克隆抗體C.體外培養(yǎng)時(shí),一個(gè)效應(yīng)B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體,但不能無(wú)限增殖D.單克隆抗體與常規(guī)抗體相比,特異性強(qiáng),靈敏度高,優(yōu)越性明顯7、(多選)下列關(guān)于單克隆抗體的制備和應(yīng)用的敘述中,正確的是78精原細(xì)胞有絲分裂初級(jí)精母細(xì)胞次級(jí)精母細(xì)胞精子細(xì)胞精子MⅠ第一階段第二階段第三階段MⅡ1.精子發(fā)生的過程多個(gè)精原細(xì)胞染色體復(fù)制變形!精原細(xì)胞經(jīng)過有絲分裂產(chǎn)生多個(gè)初級(jí)精母細(xì)胞。初級(jí)精母細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂形成含有單倍染色體的精子細(xì)胞。細(xì)胞核---高爾基體---中心體---線粒體---其他物質(zhì)---頭部頂體尾原生質(zhì)滴線粒體鞘(能量)初情期精原細(xì)胞有絲分裂初級(jí)精母細(xì)胞次級(jí)精母細(xì)胞精子細(xì)胞精子MⅠ第一79卵原細(xì)胞有絲分裂多個(gè)卵原細(xì)胞染色體復(fù)制初級(jí)卵母細(xì)胞MⅠ第一極體次級(jí)卵母細(xì)胞兩個(gè)第二極體第二極體卵子退化消失MⅡ排卵前后完成!在受精過程完成!被卵泡細(xì)胞包圍,形成卵泡2、卵子的形成過程:性別分化后卵原細(xì)胞有絲分裂多個(gè)卵原細(xì)胞染色體復(fù)制初級(jí)卵母細(xì)胞MⅠ第一極80過程受精前的準(zhǔn)備階段受精階段準(zhǔn)備階段1精子獲能準(zhǔn)備階段2卵子的準(zhǔn)備即精子必須在雌性動(dòng)物生殖道內(nèi)發(fā)生相應(yīng)生理變化后,才能獲得受精能力的現(xiàn)象。即卵子在輸卵管內(nèi)達(dá)到減數(shù)第二分裂中期(MⅡ)時(shí),才具備受精能力。包括精子穿越放射冠和透明帶,進(jìn)入卵黃膜,原核形成和配子結(jié)合。3、受精過程受精前的準(zhǔn)備階段受精階段準(zhǔn)備階段1準(zhǔn)備階段2即精子必須在814、受精過程的要點(diǎn):1.精子在受精前必須獲能。精子獲能的地點(diǎn)是_____________________。
2.在受精過程中,精子連續(xù)突破放射冠和透明帶兩道障礙都是依靠精子的哪些部分?___________.3.防止多個(gè)精子進(jìn)入卵中受精的兩道屏障分別是____________和_________________.(排他性!)4.卵子是在什么時(shí)候才徹底完成第二次減數(shù)分裂的?_________.透明帶反應(yīng)卵黃膜的封閉作用頂體等雌性動(dòng)物的生殖道里受精時(shí)5.受精作用完成的標(biāo)志是_________________________________.透明帶和卵黃膜之間出現(xiàn)兩個(gè)極體.這兩個(gè)極體分別是___________________第一、第二極體各一個(gè)4、受精過程的要點(diǎn):1.精子在受精前必須獲能。精子獲能的地點(diǎn)82受精卵:最初發(fā)育在輸卵管進(jìn)行有絲分裂。卵裂期:在透明帶內(nèi)進(jìn)行有絲分裂,細(xì)胞數(shù)量不斷增加,但胚胎總體積并不增加,或略有減少。桑椹胚:由具有全能性細(xì)胞構(gòu)成,細(xì)胞數(shù)在32個(gè)左右,排列緊密,形似桑椹。囊胚(內(nèi)含囊胚腔):開始分化。
內(nèi)細(xì)胞團(tuán):發(fā)育成胎兒各組織;
滋養(yǎng)層細(xì)胞:發(fā)育成胎膜和胎盤原腸胚(內(nèi)含原腸腔)5、胚胎發(fā)育受精卵:最初發(fā)育在輸卵管進(jìn)行有絲分裂。卵裂期:在透明帶內(nèi)進(jìn)行838、精子與卵子結(jié)合過程中穿越的兩道屏障是()①頂體反應(yīng)②透明帶反應(yīng)③卵黃膜封閉作用④精子穿越放射冠
A.①②B.②③
C.③④D.②④9、在受精過程中()①精子必須發(fā)生頂體反應(yīng),釋放頂體酶②頂體酶可使精子穿過放射冠、透明帶、卵細(xì)胞膜③卵細(xì)胞恢復(fù)并很快完成了第一次成熟分裂④精子和卵細(xì)胞的細(xì)胞核分別形成雄原核和雌原核⑤透明帶反應(yīng)防止了多精入卵和多精受精的發(fā)生
A.①②⑤B.①④⑤
C.②③④D.②④⑤8、精子與卵子結(jié)合過程中穿越的兩道屏障是()846、體外受精(1)卵子的收集和培養(yǎng)沖卵法:用促性腺激素處理母畜,促使其超數(shù)排卵,并從其輸卵管里沖取卵子,直接和獲能精子在體外受精采集法:從已被屠宰的母畜的卵巢里采集卵母細(xì)胞,經(jīng)體外人工培養(yǎng)后,再與獲能精子體外受精(2)精子的采集和獲能:
采集:假陰道法,手握法和電刺激等。獲能:培養(yǎng)法、化學(xué)誘導(dǎo)法6、體外受精(1)卵子的收集和培養(yǎng)沖卵法:用促性腺激素處理母85(3)受精:在獲能溶液或?qū)S玫氖芫芤褐型瓿墒芫^程。7、胚胎的早期培養(yǎng):(1)培養(yǎng)液的成分應(yīng)包括:水、無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及動(dòng)物血清等。①試管牛的哪些階段是在試管中完成的?______________________________________.②培育試管牛要利用哪些重要的生物技術(shù)?______________________________________.
體外受精,早期胚胎發(fā)育(如卵裂)體外受精,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),胚胎移植(3)受精:在獲能溶液或?qū)S玫氖芫芤褐型瓿墒芫^程。7、胚868、胚胎工程的應(yīng)用前景(一)胚胎工程技術(shù)包括哪些?1.體外受精
2.胚胎移植
3.胚胎分割
4體外生產(chǎn)胚胎技術(shù)
5.胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)(二)目前應(yīng)用較多的是哪些?
胚胎移植、胚胎分割、體外生產(chǎn)胚胎技術(shù)。8、胚胎工程的應(yīng)用前景(一)胚胎工程技術(shù)包括哪些?87(1)胚胎移植
①概念:將雌性動(dòng)物體內(nèi)的早期胚胎(或者通過其他方式得到的胚胎),移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi),使之發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。②胚胎移植的基本程序:(1)供體、受體的選擇和處理(2)配種或進(jìn)行人工受精(3)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存(4)胚胎移植(手術(shù)法、非手術(shù)法)(5)移植后的檢查(1)胚胎移植②胚胎移植的基本程序:88選擇供體母牛(良種!)受體母?!就诎l(fā)情處理】-超數(shù)排卵(!)供體公牛(良種)配種沖卵(收集胚胎)質(zhì)量檢查、培養(yǎng)胚胎移植妊娠檢查分娩(胚胎移植的犢牛)②胚胎移植的基本程序(以牛為例):選擇供體母牛(良種!)受體母?!就诎l(fā)情處理】-超數(shù)排卵(!891)加速育種工作和品種改良;2)可以充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛力,縮短繁殖周期,增加其一生中繁殖的后代數(shù)量。3)大量節(jié)省購(gòu)買種畜的費(fèi)用;4)一胎多產(chǎn);5)保存品種資源和瀕危物種;③胚胎移植的現(xiàn)狀和意義:1)加速育種工作和品種改良;③胚胎移植的現(xiàn)狀和意義:90(2)胚胎分割(無(wú)性繁殖、克?。俑拍?采用顯微手術(shù)(機(jī)械方法)的方法將早期胚胎分割成2分胚,4分胚或8分胚,經(jīng)體內(nèi)或體外培養(yǎng)后植入受體,以得到同卵雙胎或同卵多胎的技術(shù)。②理論基礎(chǔ):
動(dòng)物胚胎細(xì)胞的全能性。所以胚胎分割的時(shí)期為:囊胚或桑椹胚。③注意:內(nèi)細(xì)胞團(tuán)要均等分割。(2)胚胎分割(無(wú)性繁殖、克?。诶碚摶A(chǔ):91(3)干細(xì)胞①概念:是一種未充分分化,尚不成熟的細(xì)胞,具有分裂、分化為各種組織、器官和人體的潛在功能。②分類:全能干細(xì)胞:受精卵(具全能性)
萬(wàn)能干細(xì)胞:胚胎干細(xì)胞(具全能性)多能干細(xì)胞:(骨髓中的造血干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞、皮膚干細(xì)胞等,不能發(fā)育成個(gè)體。)
專能干細(xì)胞:(只能產(chǎn)生一種細(xì)胞,如腸上皮細(xì)胞)(3)干細(xì)胞②分類:92③胚胎干細(xì)胞:簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞,是由早期胚胎(卵裂、桑椹胚、囊胚期)或原始性腺中分離出來(lái)的一類細(xì)胞,能分裂、分化成各種組織器官。用途:1)治療人類的某些頑癥。利用ES細(xì)胞可以誘導(dǎo)分化形成新的組織細(xì)胞的特性,移植ES細(xì)胞可使壞死或退化的部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能。2)培育出人造組織器官,用于器官移植。3)ES細(xì)胞也是研究體外細(xì)胞分化的理想材料。③胚胎干細(xì)胞:簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞,是由早期胚胎(卵裂、桑椹胚9310、下列有關(guān)動(dòng)物胚胎移植的敘述中,錯(cuò)誤的是()A.受孕母畜體內(nèi)的受精卵或胚胎均能移植B.受體母畜必須處于與供體母畜同步發(fā)情的狀態(tài)C.超數(shù)排卵技術(shù)要使用一定的激素D.試管嬰兒只是受精及早期卵裂過程在試管中進(jìn)行10、下列有關(guān)動(dòng)物胚胎移植的敘述中,錯(cuò)誤的是(9411、下列對(duì)于優(yōu)良種畜的胚胎移植的說法不正確的是()A.供體母牛必須是同一物種的良種B.受體母牛必須是同一物種的良種C.供體公牛必須是同一物種的良種D.受體母??梢允峭晃锓N的一般健康牛11、下列對(duì)于優(yōu)良種畜的胚胎移植的說法不正確的是(9512、利用胚胎干細(xì)胞治療肝衰竭,實(shí)現(xiàn)此過程的重要原因是()A.細(xì)胞分裂
B.細(xì)胞特化
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