流式細胞術(shù)的基本概念流式細胞術(shù)（,簡稱）是一種可以快速、準確、客觀，并且同時檢測單個微粒（通常是細胞）的多項特性的技術(shù)，同時可以對特定群體加以分選研究對象為生物顆粒，如各種細胞、微生物及人工合成微球等研究的微粒特性包括多種物理及生物學特征，并加以定量1流式細胞術(shù)的基本概念流式細胞術(shù)（,簡稱）是一種可以快速、散射光信號和熒光信號前向角散射光（,） 入射激光的前向散射光信號 細胞相對大小及其表面積側(cè)向角散射光（,） 入射激光90角的散射光信號 細胞粒度及細胞內(nèi)相對復雜性熒光素與特異抗體結(jié)合，熒光抗體與細胞抗原結(jié)合越多，產(chǎn)生的熒光信號越強。2散射光信號和熒光信號前向角散射光（,）245示意圖345示意圖3抗原分布

表面,胞漿,核內(nèi)是共同檢測還是分別檢測?表面胞漿核內(nèi)CD3,CD4,CD8,tetramercytokinesDNA3,4,8,+3,4,8,++3,4,8,++4抗原分布

表面,胞漿,核內(nèi)表面胞漿核內(nèi)CD3,CD4,C設門08-033075設門08-033075設門全部細胞門內(nèi)細胞08-033076設門全部細胞門內(nèi)細胞08-03307677血液腫瘤分類進程8血液腫瘤分類進程8白血病免疫分型的理論基礎(chǔ)白血病/淋巴瘤免疫分型采用的抗原標志是表達于正常造血細胞不同分化發(fā)育階段的分化抗原。雖然是惡性腫瘤細胞，但仍能表達正常血細胞所具有的抗原，因而仍可依據(jù)其抗原的表達譜對白血病/淋巴瘤進行免疫分型。為了正確分析白血病/淋巴瘤細胞，必須對正常造血細胞分化抗原的表達模式有充分的了解。只有熟悉正常細胞的抗原表達模式，才能辨認白血病/淋巴瘤細胞的存在。9白血病免疫分型的理論基礎(chǔ)白血病/淋巴瘤細胞類型鑒定(1993)100:534-40.(1993)667:265-28010細胞類型鑒定(1993)100:534-40.1045示意圖正常骨髓細胞血液腫瘤細胞老化粒細胞、噬酸細胞早幼—成熟粒細胞M3、單核細胞M4、M5

淋巴細胞、、正常前體細胞M0、M1、M2、嗜堿性粒細胞M4、M5、成熟紅細胞、血小板M6、M7、細胞碎片非血液來源細胞1145示意圖正常骨髓細胞血液B淋巴細胞分化與抗原表達關(guān)系圖(2006)’s12B淋巴細胞分化與抗原表達關(guān)系圖(2006)’s1T淋巴細胞分化與抗原表達關(guān)系圖(2006)’s13T淋巴細胞分化與抗原表達關(guān)系圖(2006)’s1粒細胞分化與抗原表達關(guān)系圖(2006)’s14粒細胞分化與抗原表達關(guān)系圖(2006)’s14單核細胞分化與抗原表達關(guān)系圖(2006)’s15單核細胞分化與抗原表達關(guān)系圖(2006)’s15非腫瘤T淋巴細胞表型16非腫瘤T淋巴細胞表型16非腫瘤B淋巴細胞表型17非腫瘤B淋巴細胞表型17非腫瘤粒細胞、單核細胞表型18非腫瘤粒細胞、單核細胞表型18非腫瘤粒細胞、單核細胞表型19非腫瘤粒細胞、單核細胞表型19白血病免疫分型根據(jù)白血病細胞表達的系列相關(guān)抗原，確定其系列來源。如：淋系、粒單系、紅系、巨核系等。根據(jù)白血病細胞表達的系列分化其相關(guān)抗原進一步分型。如：早前B，前B，普通B…20白血病免疫分型根據(jù)白血病細胞表達的系列相關(guān)抗原，確定其系列來初治急白分型–>20%MyeloidLineageCD13+and/orCD117+and/orCD33+CD7+and/orCD2+CD19+T-LineageB-LineageMyeloid,noorminimalmaturationCD34+/-CD117+/-HLADR+CD56+CD15-/+CD11b-,CD14-PromyeloidCD15+/-CD117+/-CD34-HLADR-CD11b-,CD14-CD14+CD4+/-HLADR+CD15+CD11b+Myelomonocytic&Monocytic紅系和巨核系的鑒定需要另外增加二線抗體。如71、、41、6121初治急白分型–>20%MyeloidLinea322322423423424424初治急淋分型AcuteLeukemia–BlastsPresent>20%CD7+and/orCD2+CD19+T-LineageB-Lineage2+5+48+3-2+5+4+8+3+253-4-8-10-10+B1010+

25初治急淋分型AcuteLeukemia–Blasts26262727

白血病免疫分型的價值確定的細胞類型（B細胞或T細胞）和的分化階段。鑒定的特征。對形態(tài)學上未分化的急性白血病有助于鑒定細胞類型。診斷一些少見類型的白血病。如：M6、M7、M0等。28白血病免疫分型的價值確定的細胞類型（B細胞或T細胞）和多發(fā)性骨髓瘤（）多發(fā)性骨髓瘤是漿細胞異常增生性疾病。正常漿細胞為3845，使用3845雙標記檢測外周血和骨髓標本，可以準確劃定漿細胞群。通常使用38和45，結(jié)合輕鏈檢查，對多發(fā)性骨髓瘤細胞進行分析。另外，正常漿細胞的表面標記為1956-，而多發(fā)性骨髓瘤細胞通常為1956+。138目前認為是漿細胞最特異的指標。這樣，使用流式細胞儀對外周血或骨髓標本進行多參數(shù)分析，并計算異常漿細胞含量，對于多發(fā)性骨髓瘤的診斷和治療評估具有重要意義。29多發(fā)性骨髓瘤（）多發(fā)性骨髓瘤是漿細胞異常增生性3030流式免疫表型診斷血液腫瘤的劣勢1、纖維化、硬化的骨髓可能沒有足夠的細胞分析。2、細胞太多聚集或成團也可能沒有足夠的分析細胞。3、硬化的組織也很難得到足夠的分析細胞。4、組織結(jié)構(gòu)關(guān)系、形態(tài)關(guān)系丟失。5、比例太低的單克隆B細胞很難檢測到。31流式免疫表型診斷血液腫瘤的劣勢1、纖維化、硬化的骨髓可能沒有流式免疫表型診斷血液腫瘤的劣勢6、沒有異常免疫表型的T細胞淋巴瘤也可能很難檢測。7、異常的T細胞免疫表型不一定提示T細胞腫瘤，也可能是感染引起的單核細胞增多癥、反應性皮膚病、炎癥性疾病。8、取材不好或樣品保存不當，可能導致假陰性的結(jié)果。9、的腫瘤細胞水平低，所以免疫表型檢測或診斷不可靠。10、治療或復發(fā)可能引起腫瘤細胞表面抗原改變。32流式免疫表型診斷血液腫瘤的劣勢6、沒有異常免疫表型的T細胞淋謝謝!33謝謝!33流式細胞術(shù)的基本概念流式細胞術(shù)（,簡稱）是一種可以快速、準確、客觀，并且同時檢測單個微粒（通常是細胞）的多項特性的技術(shù)，同時可以對特定群體加以分選研究對象為生物顆粒，如各種細胞、微生物及人工合成微球等研究的微粒特性包括多種物理及生物學特征，并加以定量34流式細胞術(shù)的基本概念流式細胞術(shù)（,簡稱）是一種可以快速、散射光信號和熒光信號前向角散射光（,） 入射激光的前向散射光信號 細胞相對大小及其表面積側(cè)向角散射光（,） 入射激光90角的散射光信號 細胞粒度及細胞內(nèi)相對復雜性熒光素與特異抗體結(jié)合，熒光抗體與細胞抗原結(jié)合越多，產(chǎn)生的熒光信號越強。35散射光信號和熒光信號前向角散射光（,）245示意圖3645示意圖3抗原分布

表面,胞漿,核內(nèi)是共同檢測還是分別檢測?表面胞漿核內(nèi)CD3,CD4,CD8,tetramercytokinesDNA3,4,8,+3,4,8,++3,4,8,++37抗原分布

表面,胞漿,核內(nèi)表面胞漿核內(nèi)CD3,CD4,C設門08-0330738設門08-033075設門全部細胞門內(nèi)細胞08-0330739設門全部細胞門內(nèi)細胞08-033076407血液腫瘤分類進程41血液腫瘤分類進程8白血病免疫分型的理論基礎(chǔ)白血病/淋巴瘤免疫分型采用的抗原標志是表達于正常造血細胞不同分化發(fā)育階段的分化抗原。雖然是惡性腫瘤細胞，但仍能表達正常血細胞所具有的抗原，因而仍可依據(jù)其抗原的表達譜對白血病/淋巴瘤進行免疫分型。為了正確分析白血病/淋巴瘤細胞，必須對正常造血細胞分化抗原的表達模式有充分的了解。只有熟悉正常細胞的抗原表達模式，才能辨認白血病/淋巴瘤細胞的存在。42白血病免疫分型的理論基礎(chǔ)白血病/淋巴瘤細胞類型鑒定(1993)100:534-40.(1993)667:265-28043細胞類型鑒定(1993)100:534-40.1045示意圖正常骨髓細胞血液腫瘤細胞老化粒細胞、噬酸細胞早幼—成熟粒細胞M3、單核細胞M4、M5

淋巴細胞、、正常前體細胞M0、M1、M2、嗜堿性粒細胞M4、M5、成熟紅細胞、血小板M6、M7、細胞碎片非血液來源細胞4445示意圖正常骨髓細胞血液B淋巴細胞分化與抗原表達關(guān)系圖(2006)’s45B淋巴細胞分化與抗原表達關(guān)系圖(2006)’s1T淋巴細胞分化與抗原表達關(guān)系圖(2006)’s46T淋巴細胞分化與抗原表達關(guān)系圖(2006)’s1粒細胞分化與抗原表達關(guān)系圖(2006)’s47粒細胞分化與抗原表達關(guān)系圖(2006)’s14單核細胞分化與抗原表達關(guān)系圖(2006)’s48單核細胞分化與抗原表達關(guān)系圖(2006)’s15非腫瘤T淋巴細胞表型49非腫瘤T淋巴細胞表型16非腫瘤B淋巴細胞表型50非腫瘤B淋巴細胞表型17非腫瘤粒細胞、單核細胞表型51非腫瘤粒細胞、單核細胞表型18非腫瘤粒細胞、單核細胞表型52非腫瘤粒細胞、單核細胞表型19白血病免疫分型根據(jù)白血病細胞表達的系列相關(guān)抗原，確定其系列來源。如：淋系、粒單系、紅系、巨核系等。根據(jù)白血病細胞表達的系列分化其相關(guān)抗原進一步分型。如：早前B，前B，普通B…53白血病免疫分型根據(jù)白血病細胞表達的系列相關(guān)抗原，確定其系列來初治急白分型–>20%MyeloidLineageCD13+and/orCD117+and/orCD33+CD7+and/orCD2+CD19+T-LineageB-LineageMyeloid,noorminimalmaturationCD34+/-CD117+/-HLADR+CD56+CD15-/+CD11b-,CD14-PromyeloidCD15+/-CD117+/-CD34-HLADR-CD11b-,CD14-CD14+CD4+/-HLADR+CD15+CD11b+Myelomonocytic&Monocytic紅系和巨核系的鑒定需要另外增加二線抗體。如71、、41、6154初治急白分型–>20%MyeloidLinea355322456423457424初治急淋分型AcuteLeukemia–BlastsPresent>20%CD7+and/orCD2+CD19+T-LineageB-Lineage2+5+48+3-2+5+4+8+3+253-4-8-10-10+B1010+

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白血病免疫分型的價值確定的細胞類型（B細胞或T細胞）和的分化階段。鑒定的特征。對形態(tài)學上未分化的急性白血病有助于鑒定細胞類型。診斷一些少見類型的白血病。如：M6、M7、M0等。61白血病免疫分型的價值確定的細胞類型（B細胞或T細胞