2021-2022學(xué)年高考生物模擬試卷請(qǐng)考生注意：1．請(qǐng)用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應(yīng)位置上，請(qǐng)用0．5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫在答題紙相應(yīng)的答題區(qū)內(nèi)。寫在試題卷、草稿紙上均無效。2．答題前，認(rèn)真閱讀答題紙上的《注意事項(xiàng)》，按規(guī)定答題。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．用熒光標(biāo)記的特定DNA片段作為探針，與染色體上對(duì)應(yīng)的DNA片段結(jié)合，能在染色體上定位特定的基因，其定位原理如圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．合成熒光探針?biāo)柙鲜菐?biāo)記的脫氧核苷酸B．熒光探針與染色體共同煮沸，DNA雙鏈中氫鍵斷裂而形成單鏈C．降溫復(fù)性時(shí)，探針與基因分子雜交遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則D．二倍體生物細(xì)胞減數(shù)分裂和有絲分裂過程中，最多可有8個(gè)熒光點(diǎn)2．下列關(guān)于乳酸菌和酵母菌的敘述，正確的是（）A．遺傳物質(zhì)都是DNA，都與蛋白質(zhì)結(jié)合組成染色體B．在無氧條件下，兩者的有氧呼吸過程都會(huì)受到抑制C．在有氧條件下，兩者都能將葡萄糖分解產(chǎn)生C02并釋放能量D．在基因指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成時(shí)，兩種微生物共用一套遺傳密碼3．如圖表示某植物葉肉細(xì)胞中部分物質(zhì)轉(zhuǎn)化途徑，其中①?④代表有關(guān)生理過程。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．參與①的色素有葉綠素和類胡蘿卜素B．①、②均在生物膜上進(jìn)行C．①、②、④均有ATP生成D．④產(chǎn)生的[H]全部來自C6H12O64．如圖所示，通常當(dāng)血壓偏低時(shí)，血管緊張素原在相應(yīng)酶催化下，轉(zhuǎn)變?yōu)樯锘钚暂^低的血管緊張素Ⅰ，進(jìn)而轉(zhuǎn)變成血管緊張素Ⅱ，引起血管強(qiáng)烈收縮，使血壓升高到正常水平。以下敘述不正確的是A．血管緊張素原、腎素和血管緊張素轉(zhuǎn)換酶均在核糖體上合成B．血管緊張素Ⅰ是十肽化合物、血管緊張素Ⅱ含有7個(gè)肽鍵C．血管緊張素Ⅰ和血管緊張素Ⅱ均能與斐林試劑產(chǎn)生紫色反應(yīng)D．利用血管緊張素轉(zhuǎn)換酶的抑制劑可使高血壓患者降低血壓5．下列關(guān)于生物學(xué)研究方法與操作的敘述，正確的是（）A．可直接利用高倍鏡觀察植物細(xì)胞有絲分裂中期的圖像B．可利用放射性同位素標(biāo)記法追蹤光合作用過程中能量的轉(zhuǎn)化途徑C．刺激離體神經(jīng)纖維一端某點(diǎn)時(shí)，其上連接的電流計(jì)的指針偏轉(zhuǎn)一次D．利用搖床振蕩可增加酵母菌有氧呼吸裝置中培養(yǎng)液的溶氧量6．下列關(guān)于生物變異的敘述。錯(cuò)誤的是（）A．貓叫綜合征是染色體結(jié)構(gòu)變異引起的遺傳病B．人工誘變可提高基因突變的頻率，并且可獲得預(yù)期性狀C．非姐妹染色單體上的等位基因互換后可能引起基因重組D．花藥的離體培養(yǎng)有利于獲得純合基因型，從而縮短育種年限二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）山雞椒是我國野生芳香植物，其果實(shí)、花、葉和根等各器官中均含有一定的精油。山雞椒精油的主要成分是檸檬烯和檸檬醛。請(qǐng)回答下列問題：（1）提取山雞椒精油與玫瑰精油的方法相同，常采用的方法是____________________，提取原理是____________________，形成油水混合物，冷卻后，混合物又重新分出油層和水層。此方法不適用于胡蘿卜素的提取，原因是____________________。（2）獲得山雞椒精油與水的混合物后，向液體中加入__________可加速油水分層。然后再利用分液漏斗可將這兩層液體分開，分離得到的油層中還含有一定的水分，一般可以加入一些__________除去油層中的水分，__________后除去固體物質(zhì)即可得到山雞椒精油。（3）分別提取山雞椒果實(shí)和葉片的精油，其出油率如圖所示，由圖中結(jié)果分析，最適合作提取山雞椒精油原料的是____________________，原因是____________________。8．（10分）科學(xué)家從某細(xì)菌中提取抗鹽基因，轉(zhuǎn)入煙草并培育成轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草。下圖是轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的培育過程，含目的基因的DNA和質(zhì)粒上的箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。請(qǐng)分析回答下列問題：（1）在該過程中，研究人員首先獲取了抗鹽基因（目的基因），并采用____________技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增，該技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提是_________________________，以便根據(jù)這一序列合成引物，同時(shí)該技術(shù)必須用_____________酶；然后構(gòu)建基因表達(dá)載體，其目的是_________________________。（2）用圖中的質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SmaI酶切割，原因是________________________。（3）圖中⑤、⑥依次表示植物組織培養(yǎng)過程中抗鹽煙草細(xì)胞的____________、____________過程。（4）為確定轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草是否培育成功，既要進(jìn)行分子雜交檢測，又要在個(gè)體水平上鑒定，后者具體過程是_____________________________________________________________。9．（10分）正常細(xì)胞不能合成干擾素，但含有干擾素基因。我國科學(xué)家釆用基因工程技術(shù)生產(chǎn)干擾素a-2b已實(shí)現(xiàn)量產(chǎn)。具體做法是將產(chǎn)生干擾素的人白細(xì)胞的mRNA分離，反轉(zhuǎn)錄得到干擾素基因。將含有四環(huán)素、氨芐青霉素抗性基因的質(zhì)粒PBR322和干擾素基因進(jìn)行雙酶切，用連接酶連接。將重組載體DNA分子在一定條件下導(dǎo)入大腸桿菌，在培養(yǎng)基中篩選培養(yǎng)，檢測干擾素的表達(dá)量，選出高效表達(dá)的工程菌。請(qǐng)回答：（1）在分化誘導(dǎo)因子作用下，正常細(xì)胞可以擺脫抑制、合成干擾素，該過程發(fā)生的實(shí)質(zhì)是________________________________（2）據(jù)下圖分析，構(gòu)建重組載體DNA分子時(shí)，可以選用_____兩種限制酶對(duì)質(zhì)粒pBR322和干擾素基因進(jìn)行雙酶切，目的是既能保證目的基因和質(zhì)粒正向連接，又能防止_____________________________(答兩點(diǎn))。（3）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌中，然后將細(xì)菌涂布到含_____的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，就可得到含質(zhì)粒PBR322或重組質(zhì)粒的細(xì)菌單菌落；再從每一個(gè)單菌落中挑取部分細(xì)菌轉(zhuǎn)涂到含有_____的培養(yǎng)基上，不能生長的絕大部分是含有重組質(zhì)粒的細(xì)菌，原因是_____（4）干擾素在體外保存非常困難，如果將其分子中的一個(gè)半胱氨酸變成絲氨酸，在-70°C條件下可以保存半年。實(shí)現(xiàn)這一轉(zhuǎn)變需要直接對(duì)_____進(jìn)行修飾或改造，這屬于蛋白質(zhì)工程的范疇。10．（10分）科研人員利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對(duì)干擾素基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療。其技術(shù)流程如下圖1所示，圖2、圖3分別表示了干擾素基因及質(zhì)粒的相關(guān)信息。（1）在圖1治療過程中是否體現(xiàn)細(xì)胞的全能性____（是/否），為什么？________________________。（2）圖1步驟③將基因?qū)隕S細(xì)胞而不是導(dǎo)入到上皮細(xì)胞是因?yàn)镋S細(xì)胞具有__________________。（3）據(jù)圖2、圖3，對(duì)干擾素基因片段和質(zhì)粒進(jìn)行酶切時(shí)，可選用的限制酶組合為________________。（4）為了得到實(shí)驗(yàn)所需的大量干擾素基因，研究人員利用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。由于DNA復(fù)制時(shí)，子鏈只能由5′向3′方向延伸，因此可以從下圖A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選取_____________作為引物。若要將1個(gè)干擾素基因復(fù)制4次，則需要在緩沖液中至少加入_______個(gè)引物。（5）將步驟③獲得的ES細(xì)胞在熒光顯微鏡下觀察，選擇發(fā)_____________色熒光的細(xì)胞進(jìn)行體外誘導(dǎo)。為檢測干擾素基因是否表達(dá)，可以采用_____________方法進(jìn)行檢測。11．（15分）因含N、P元素的污染物大量流入，某湖泊曾爆發(fā)“水華”。為防治“水華”，在控制上游污染源的同時(shí)，研究人員依據(jù)生態(tài)學(xué)原理嘗試在湖泊中投放以藻類和浮游動(dòng)物為食的鰱魚和鳙魚，對(duì)該湖泊生態(tài)系統(tǒng)進(jìn)行修復(fù)，創(chuàng)造了浮床生態(tài)工藝法凈化生活污水（含有機(jī)物和無機(jī)物），在水域中固定浮床上種植特殊的水生、半水生植物以吸收水中的氮、磷等元素，取得了明顯效果。（1）在該湖泊生態(tài)系統(tǒng)的組成成份中，引起“水華”的藻類屬于______________，湖泊中各種生物共同構(gòu)成______________________。（2）生活污水流入湖泊中，通過物理沉降、化學(xué)分解和____________，使污水得到凈化。若流入該湖泊的生活污水過量，則會(huì)導(dǎo)致生態(tài)系統(tǒng)遭到破壞，原因是___________________。（3）浮游動(dòng)物以藻類為食，銀魚主要以浮游動(dòng)物為食，由圖可知，將鰱、鳙魚苗以一定比例投放到該湖泊后，造成銀魚生物積累量_____________，引起該變化的原因是___________________。（4）浮床生態(tài)工藝法能防止“水華”發(fā)生的原因是____________。（答兩點(diǎn)即可）

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、D【解析】

該題圖示中介紹了DNA探針的制作過程，需要先由限制酶將待標(biāo)記的DNA切割開，后續(xù)使用DNA聚合酶將被熒光標(biāo)記的脫氧核苷酸聚合上去，從而制作了DNA探針。使用DNA探針定位特定的基因時(shí)依靠了堿基的互補(bǔ)配對(duì)原則，將DNA探針與配對(duì)的部位結(jié)合在一起從而帶上標(biāo)記?！驹斀狻緼、圖中顯示制作熒光標(biāo)記的DNA探針時(shí)，使用了DNA聚合酶聚合DNA片段，因此可推測需要帶標(biāo)記的脫氧核苷酸，A正確；B、DNA分子雙鏈之間的氫鍵在加熱的情況下，會(huì)斷裂形成單鏈結(jié)構(gòu)，B正確；C、由圖中信息可知，降溫以后DNA復(fù)性為雙鏈結(jié)構(gòu)，此時(shí)DNA探針也與相關(guān)位置通過堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合在一起，C正確；D、一個(gè)DNA上某個(gè)特定的基因只能被標(biāo)記一次，由于同源染色體上具有等位基因，因此正常情況下一個(gè)二倍體生物的體細(xì)胞中應(yīng)該存在2個(gè)熒光點(diǎn)，當(dāng)進(jìn)行有絲分裂或者減數(shù)分裂的時(shí)候DNA會(huì)發(fā)生一次復(fù)制，細(xì)胞中最多會(huì)存在4個(gè)熒光點(diǎn)，D錯(cuò)誤；故選D。2、D【解析】

本題考查原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)的異同、細(xì)胞呼吸等知識(shí)，要求學(xué)生識(shí)記原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)的異同，明確原核細(xì)胞只有DNA，無染色體；明確乳酸菌只能進(jìn)行無氧呼吸，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。【詳解】A、乳酸菌屬于原核生物，只有DNA，無染色體，A錯(cuò)誤；B、乳酸菌只能進(jìn)行有氧呼吸，B錯(cuò)誤；C、乳酸菌不能進(jìn)行有氧呼吸，只能進(jìn)行無氧呼吸，有氧條件會(huì)抑制乳酸菌的無氧呼吸，且其分解產(chǎn)物為乳酸，C錯(cuò)誤；D、原、真核生物的遺傳密碼是通用的，因此在基因指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成時(shí)，兩種微生物共用一套遺傳密碼，D正確。故選D。3、D【解析】

據(jù)圖分析：圖示表示光合作用與呼吸作用的過程，①表示水的光解過程，②表示有氧呼吸的第三階段，③表示暗反應(yīng)階段三碳化合物的還原過程，④表示有氧呼吸的第一二階段。據(jù)此分析作答。【詳解】A、葉肉細(xì)胞中參與①光反應(yīng)的色素有葉綠素和類胡蘿卜素，A正確；B、①表示水的光解過程，發(fā)生在類囊體薄膜上，②表示有氧呼吸的第三階段，發(fā)生在葉肉細(xì)胞的線粒體內(nèi)膜上，B正確；C、光合作用過程中水的光解，即過程①和有氧呼吸的三個(gè)階段④②都有ATP的生成，C正確；D、④表示有氧呼吸的第一二階段，有氧呼吸的第一階段產(chǎn)生的[H]來自于葡萄糖，第二階段產(chǎn)生的[H]來自于丙酮酸和水，D錯(cuò)誤。故選D。4、C【解析】

根據(jù)題意“當(dāng)血壓偏低時(shí)，血管緊張素原在相應(yīng)酶催化下，轉(zhuǎn)變?yōu)樯锘钚暂^低的血管緊張素Ⅰ，進(jìn)而轉(zhuǎn)變成血管緊張素Ⅱ”，說明腎素和血管緊張素轉(zhuǎn)換酶均為催化作用的酶，本質(zhì)是蛋白質(zhì)。由圖可知：血管緊張素、血管緊張素Ⅰ和血管緊張素Ⅱ均為氨基酸構(gòu)成的蛋白質(zhì)，三者氨基酸的數(shù)量不同，功能也不同。【詳解】由分析可知，血管緊張素原、腎素和血管緊張素轉(zhuǎn)換酶均為蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)的合成場所是核糖體，A正確；由圖可知血管緊張素Ⅰ是由十個(gè)氨基酸構(gòu)成的十肽化合物、血管緊張素Ⅱ是由八個(gè)氨基酸構(gòu)成的八肽化合物，肽鍵數(shù)=氨基酸個(gè)數(shù)-肽鏈數(shù)，故含有7個(gè)肽鍵，B正確；斐林試劑只能檢測還原性糖，血管緊張素Ⅰ和血管緊張素Ⅱ都是多肽，可由雙縮脲試劑檢測，C錯(cuò)誤；根據(jù)題意，通常當(dāng)血壓偏低時(shí)，血管緊張素原在腎素和血管緊張素轉(zhuǎn)換酶的作用下，可轉(zhuǎn)化形成血管緊張素Ⅱ，引起血管強(qiáng)烈收縮，使血壓升高到正常水平，故利用血管緊張素轉(zhuǎn)換酶的抑制劑可抑制血管緊張素Ⅱ的形成，從而使高血壓患者降低血壓，D正確。故選C。5、D【解析】

1、用同位素標(biāo)記化合物，讓它們一起運(yùn)動(dòng)、遷移，再用探測儀器進(jìn)行追蹤，可以明確化學(xué)反應(yīng)的詳細(xì)過程。用來研究細(xì)胞內(nèi)的元素或化合物的來源、分布和去向等，進(jìn)而了解細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能、化學(xué)物質(zhì)的變化、反應(yīng)機(jī)理等。2、光學(xué)顯微鏡使用時(shí)先在低倍鏡下調(diào)清物像，然后移動(dòng)裝片將觀察的目標(biāo)移至視野的中央，轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，換上高倍物鏡，如果視野較暗可以通過調(diào)整光圈和反光鏡調(diào)整，若物像不夠清晰可以調(diào)整細(xì)準(zhǔn)焦螺旋。3、神經(jīng)纖維在未受到刺激時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的鉀離子外流，形成靜息電位，即表現(xiàn)為外正內(nèi)負(fù)；受到刺激時(shí)，細(xì)胞膜上的鈉離子通道開放，鈉離子內(nèi)流，形成動(dòng)作電位，即表現(xiàn)為外負(fù)內(nèi)正。神經(jīng)纖維上興奮部位和未興奮部位之間形成電流，興奮就以局部電流的形式進(jìn)行傳導(dǎo)?！驹斀狻緼、觀察處于有絲分裂中期的植物細(xì)胞，需要先在低倍鏡下找到目標(biāo)，再換用高倍鏡觀察，A錯(cuò)誤；B、細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)代謝途徑可以采用同位素標(biāo)記法進(jìn)行追蹤研究，但不能追蹤光合作用過程中能量的釋放形式，B錯(cuò)誤；C、刺激離體神經(jīng)纖維一端某點(diǎn)時(shí)，由于興奮在神經(jīng)纖維上可以雙向傳導(dǎo)，其上連接的電流計(jì)指針會(huì)偏轉(zhuǎn)二次，C錯(cuò)誤；D、利用搖床震蕩可增加酵母菌有氧呼吸裝置中培養(yǎng)液的溶氧量，D正確。故選D。6、B【解析】

可遺傳的變異包括基因突變、基因重組和染色體變異：（1）基因突變是指基因中堿基對(duì)的增添、缺失或替換，這會(huì)導(dǎo)致基因結(jié)構(gòu)的改變，進(jìn)而產(chǎn)生新基因；（2）基因重組是指在生物體進(jìn)行有性生殖的過程中，控制不同性狀的非等位基因重新組合，包括兩種類型：①自由組合型：減數(shù)第一次分裂后期，隨著非同源染色體自由組合，非同源染色體上的非等位基因也自由組合。②交叉互換型：減數(shù)第一次分裂前期（四分體），基因隨著同源染色體的非等位基因的交叉互換而發(fā)生重組。此外，某些細(xì)菌（如肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)）和在人為作用（基因工程）下也能產(chǎn)生基因重組。（3）染色體變異包括染色體結(jié)構(gòu)變異（重復(fù)、缺失、易位、倒位）和染色體數(shù)目變異?！驹斀狻緼、“貓叫綜合癥”是人的第5號(hào)染色體部分缺失引起的，屬于染色體結(jié)構(gòu)異常，A正確；B、人工誘變的原理是基因突變，基因突變是不定向，所以不能獲得預(yù)期性狀，B錯(cuò)誤；C、減數(shù)第一次分裂前期（四分體），同源染色體上非姐妹染色單體上的等位基因互換屬于交叉互換，可能引起基因重組，C正確；D、花藥的離體培養(yǎng)實(shí)質(zhì)是培養(yǎng)精子，獲得單倍體植株，再利用秋水仙素加倍后獲得純合基因型，從而縮短育種年限，D正確。故選B?！军c(diǎn)睛】本題考查生物變異的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因重組的類型；識(shí)記基因突變的概念及意義，明確只有基因突變才能產(chǎn)生新基因；識(shí)記染色體變異的類型，能正確區(qū)分交叉互換型基因重組和染色體結(jié)構(gòu)變異中的易位，識(shí)記單倍體育種的步驟。二、綜合題：本大題共4小題7、水蒸氣蒸餾法利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來胡蘿卜素不易揮發(fā)，不能隨水蒸氣蒸餾出來NaCl無水Na2SO4過濾干品果實(shí)干品果實(shí)出油率最高【解析】

植物芳香油的提取方法：蒸餾法、壓榨法和萃取等。（1）蒸餾法：芳香油具有揮發(fā)性。把含有芳香油的花、葉等放入水中加熱，水蒸氣能將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油攜帶出來，形成油水混合物；冷卻后，油水混合物又會(huì)重新分成油層和水層，除去水層便得到芳香油，這種提取方法叫蒸餾法。根據(jù)蒸餾過程中原料放置的位置的標(biāo)準(zhǔn)，將水蒸氣蒸餾法劃分為水中蒸餾、水上蒸餾和水氣蒸餾。（2）萃取法：這種方法需要將新鮮的香花等植物材料浸泡在乙醚、石油醚等低沸點(diǎn)的有機(jī)溶劑中，使芳香油充分溶解，然后蒸去低沸點(diǎn)的溶劑，剩下的就是芳香油。（3）壓榨法：在橘子、檸檬、甜橙等植物的果皮中，芳香油的含量較多，可以用機(jī)械壓力直接榨出，這種提取方法叫壓榨法?！驹斀狻浚?）水蒸氣蒸餾法的原理是利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來，形成油水混合物，冷卻后，混合物又會(huì)重新形成油層和水層。提取山雞椒精油與玫瑰精油常采用的方法是水蒸氣蒸餾法。因胡蘿卜素不易揮發(fā)，不能隨水蒸氣蒸餾出來，故此方法不適用于胡蘿卜素的提取。（2）分離裝置中常加入氯化鈉的目的是增加水層密度，使油水層更易分離。為了吸收油層中的水分，常加入無水硫酸鈉，過濾后除去固體物質(zhì)即可得到山雞椒精油。（3）由圖中結(jié)果可知，干品果實(shí)出油率最高，其最適合作提取山雞椒精油原料。【點(diǎn)睛】本題考查從生物材料中提取某些特定成分，對(duì)于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)采用的方法、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象等，需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過程中注意積累。8、PCR要有一段已知目的基因的核苷酸序列Taq（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用SmaⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因脫分化再分化將培育的煙草幼苗栽培于含有一定鹽的土壤中，觀察該煙草植株的生長狀態(tài)【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）基因工程的第一步是獲取目的基因，該基因工程中目的基因是抗鹽基因，然后采用PCR技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增目的基因的前提是要獲得一段已知目的基因核苷酸序列以便合成引物，同時(shí)還必須用Taq（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）酶；獲得目的基因后，進(jìn)行基因表達(dá)載體的構(gòu)建，以保證目的基因在受體細(xì)胞中能穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。（2）圖中的質(zhì)粒和目的基因中SmaⅠ的酶切位點(diǎn)包含在質(zhì)粒的抗性基因和目的基因中，因此在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)不能使用SmaI酶切割，若選擇該酶會(huì)導(dǎo)致質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因被切割。（3）圖中⑤為脫分化形成愈傷組織的過程，⑥為再分化形成耐鹽幼苗的過程，這兩個(gè)過程是植物組織培養(yǎng)過程中的關(guān)鍵步驟。（4）為確定轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草是否培育成功，既要進(jìn)行分子雜交檢測，又要在個(gè)體水平上鑒定，個(gè)體水平上鑒定的具體做法是將培育的煙草幼苗栽培于含有一定鹽濃度的土壤中，觀察該煙草植株的生長狀態(tài)，若生長良好則意味著培育成功?！军c(diǎn)睛】熟知基因工程的原理和操作要點(diǎn)是解答本題的關(guān)鍵！PCR技術(shù)的原理和應(yīng)用也是本題的考查點(diǎn)之一，辨圖能力是解答本題的前提。9、基因的選擇性表達(dá)酶B、酶C質(zhì)粒與目的基因自身環(huán)化；防止同時(shí)破壞質(zhì)粒中的兩個(gè)標(biāo)記基因氨芐青霉素四環(huán)素目的基因的插入破壞了四環(huán)素抗性基因，重組質(zhì)粒上只含有氨芐青霉素抗性基因，而質(zhì)粒上含氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因，在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)菌不能生長，而只導(dǎo)入質(zhì)粒的細(xì)菌能生長基因【解析】

1、基因表達(dá)載體的組成：目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因等。標(biāo)記基因可便于目的基因的鑒定和篩選。2、由于不同限制酶識(shí)別的堿基序列不同，所以在切割質(zhì)粒和目的基因時(shí)常用雙酶切，可防止目的基因反向粘連和質(zhì)粒自行環(huán)化。【詳解】（1）細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因選擇性表達(dá)，故在分化誘導(dǎo)因子作用下，正常細(xì)胞可以擺脫抑制、合成干擾素，該過程發(fā)生的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)。（2）標(biāo)記基因可用于鑒定目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，所以重組質(zhì)粒上至少要保留一個(gè)標(biāo)記基因，由于兩個(gè)標(biāo)記基因上均含有酶A的切點(diǎn)，所以不能用酶A切割，為了防止連接時(shí)目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化，故在構(gòu)建重組載體DNA分子時(shí)，可以選用酶B和酶C兩種限制酶對(duì)質(zhì)粒pBR322和干擾素基因進(jìn)行雙酶切。（3）由于質(zhì)粒和重組質(zhì)粒上都含有氨芐青霉素抗性基因，而未導(dǎo)入質(zhì)粒的細(xì)菌不含有該抗性基因，所以將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌中，然后將細(xì)菌涂布到含氨芐青霉素的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，就可得到含質(zhì)粒PBR322或重組質(zhì)粒的細(xì)菌單菌落；由于目的基因的插入破壞了四環(huán)素抗性基因，重組質(zhì)粒上只含有氨芐青霉素抗性基因，而質(zhì)粒上含有氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因，因此再從前面培養(yǎng)基上獲得的每一個(gè)單菌落中挑取部分細(xì)菌轉(zhuǎn)涂到含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上，不能生長的絕大部分是含有重組質(zhì)粒的細(xì)菌。（4）蛋白質(zhì)工程是通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造的一項(xiàng)技術(shù)?！军c(diǎn)睛】本題考查基因工程和蛋白質(zhì)工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的操作工具及操作步驟等，掌握各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱理解和應(yīng)用層次的考查。10、否并沒有發(fā)育成完整個(gè)體發(fā)育的全能性HindIII和PstI或EcoRI和PstIB和C30綠色抗原-抗體雜交【解析】

1.細(xì)胞的全能性是指已經(jīng)分化的細(xì)胞，仍然具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。目前已經(jīng)證明了植物細(xì)胞具有全能性，動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。通常情況下分化程度越高的細(xì)胞全能性越低，生殖細(xì)胞的全能性高于體細(xì)胞，植物細(xì)胞的全能性高于植物細(xì)胞。2.哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞，是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細(xì)胞。ES細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上，表現(xiàn)為體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，即可以分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。3.目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原--抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）在圖1治療過程中并未體現(xiàn)細(xì)胞的全能性，因?yàn)檎麄€(gè)過程中并未發(fā)育成完整個(gè)體。（2）因?yàn)镋S細(xì)胞具有發(fā)育的全能性，所以在進(jìn)行基因治療時(shí)，選擇ES細(xì)胞進(jìn)行改造，即圖1中的步驟③。（3）據(jù)圖2、圖3中的酶切位點(diǎn)分析可知，SamI不能選用，因?yàn)樵撁傅淖R(shí)別位點(diǎn)位于目的基因內(nèi)部，目的基因兩端的酶切位點(diǎn)在質(zhì)粒當(dāng)中都包含，而且使用這些酶切割后依然能保留一種標(biāo)記基因的存在，所以構(gòu)建基因表達(dá)載體是可以選擇目的基因兩端的酶切位點(diǎn)進(jìn)行組合，據(jù)此可知，在對(duì)干擾素基因片段和質(zhì)粒進(jìn)行酶切時(shí)，可選用的限制酶組合為HindIII和PstI或EcoRI和PstI。（4）用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增目的基因時(shí)。由于DNA復(fù)制過程中子鏈只能由5′向3′方向延