《動物細胞與組織培養(yǎng)》導學案【目標導航】1.了解動物細胞與組織培養(yǎng)的原理、意義及應用。2.理解動物細胞與組織培養(yǎng)的方法、過程?！局R清單】一、動物細胞與組織培養(yǎng)1．概念：是指在體外模擬動物______________，將動物____________在________、________適宜和________充足的條件下培養(yǎng)，使其繼續(xù)____________并維持原有結(jié)構(gòu)和功能的技術。2．材料來源：____________或出生后不久的__________________________。3．動物細胞培養(yǎng)與動物組織培養(yǎng)過程（1）動物細胞培養(yǎng)：無菌條件下取出組織塊，用培養(yǎng)液漂洗→用____________等處理，形成分散的__________→細胞______到含有營養(yǎng)液的培養(yǎng)皿中，進行培養(yǎng)→細胞不斷分裂，鋪滿整個培養(yǎng)皿底部，形成一層細胞→將細胞______到新培養(yǎng)液中，繼續(xù)培養(yǎng)。（2）動物組織培養(yǎng)：無菌條件下取出組織塊，用培養(yǎng)液漂洗→用眼科剪______組織塊→用____________沖洗組織塊，自然沉降→將組織塊移入培養(yǎng)瓶中→使組織塊______在培養(yǎng)瓶的______上，在培養(yǎng)液中生長。二者的主要區(qū)別：動物細胞培養(yǎng)過程中需要用____________等使組織塊中的細胞______。4．環(huán)境條件：包括____________、pH、______________和____________等。5．培養(yǎng)基（1）天然培養(yǎng)基：主要取自____________、________________和________等，具有營養(yǎng)價值高、__________的特點。（2）合成培養(yǎng)基：______________的培養(yǎng)基，具有成分________、便于控制____________的特點，還需加入____________。6．培養(yǎng)類型（1）原代培養(yǎng)：指從供體獲取組織或細胞后的____________。（2）傳代培養(yǎng)：將原代培養(yǎng)的細胞____________后轉(zhuǎn)入新的培養(yǎng)瓶中的____________?！緦c訓練】知識點一動物細胞與組織培養(yǎng)1．下列關于動物細胞培養(yǎng)的敘述，正確的是（）A．培養(yǎng)保留接觸抑制的細胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細胞B．克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細胞的基因型會發(fā)生改變C．二倍體細胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的D．惡性細胞系的細胞可進行傳代培養(yǎng)2．用動、植物成體的體細胞進行離體培養(yǎng)，下列敘述正確的是（）A．都需要用CO2培養(yǎng)箱 B．都需要用液體培養(yǎng)基C．都要在無菌條件下進行 D．都可體現(xiàn)細胞的全能性【課后作業(yè)】基礎落實1．在動物細胞培養(yǎng)過程中，使用胰蛋白酶的目的是（）A．使動物組織分散為單個細胞B．去掉細胞壁，使其成為原生質(zhì)體C．去掉細胞膜，暴露出原生質(zhì)體便于細胞融合D．促進蛋白質(zhì)水解為多肽2．一般來說，動物細胞體外培養(yǎng)需要滿足以下條件（）①無毒的環(huán)境②無菌的環(huán)境③合成培養(yǎng)基需加血漿④溫度與動物的體溫相近⑤需要氧氣，也需要二氧化碳⑥適宜的pHA．①②③④⑤⑥ B．①②③④C．①③④⑤⑥ D．①②③④⑥3．下列有關植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的敘述中，錯誤的是（）A．所用的培養(yǎng)基的成分基本相同B．植物組織培養(yǎng)的結(jié)果是培育成植株，動物細胞培養(yǎng)的結(jié)果是培育成很多細胞C．植物組織培養(yǎng)的目的是為了快速繁殖和獲得無病毒的植株，動物細胞培養(yǎng)的目的是為了獲得細胞產(chǎn)物或細胞D．植物組織培養(yǎng)的原理是細胞的全能性，動物細胞培養(yǎng)的原理是細胞的增殖5．根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)劃分，植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)所常用的培養(yǎng)基分別是（）A．固體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基B．固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基C．液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基D．液體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基6．動物細胞培養(yǎng)過程的順序是（）①原代培養(yǎng)②傳代培養(yǎng)③胰蛋白酶處理組織，形成分散的細胞懸液A．①②③ B．①③②C．②①③ D．③①②能力提升7．下列與動物細胞培養(yǎng)有關的表述中，不正確的是（）A．培養(yǎng)液通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清B．原代培養(yǎng)的細胞一般傳至10代左右便會出現(xiàn)生長停止C．動物細胞培養(yǎng)一般能夠傳到40～50代，但其遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變D．動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)和獲得大量自身的健康細胞【參考答案】【知識清單】一、1.體內(nèi)環(huán)境細胞或組織無菌溫度營養(yǎng)生長、增殖2.動物胚胎幼齡動物的器官或組織3．（1）胰蛋白酶懸浮細胞接種轉(zhuǎn)移（2）剪取生理鹽水黏附瓶壁胰蛋白酶離散4．適宜溫度氣體條件營養(yǎng)物質(zhì)5.（1）動物血清動物組織提取液雞胚汁成分復雜（2）人工配制明確實驗條件動物血清6.（1）初次培養(yǎng)（2）分離稀釋繼續(xù)培養(yǎng)【對點訓練】1．D[動物細胞在培養(yǎng)過程中有接觸抑制現(xiàn)象，細胞在培養(yǎng)瓶中會貼壁生長，形成一層細胞，相互接觸后停止生長?？寺∨囵B(yǎng)法培養(yǎng)過程中，僅有極少數(shù)細胞的基因型會發(fā)生改變。二倍體細胞的傳代培養(yǎng)一般傳至10代后就不易傳下去了。惡性細胞系的細胞具有不死性，可以進行傳代培養(yǎng)。]知識鏈接（1）動物細胞與組織培養(yǎng)的過程①動物細胞培養(yǎng)的過程②動物組織培養(yǎng)：無菌條件下取出組織塊，用培養(yǎng)液漂洗→用眼科剪剪取組織塊→用生理鹽水沖洗組織塊，自然沉降→將組織塊移入培養(yǎng)瓶中→使組織塊黏附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上，在培養(yǎng)液中生長。③二者的區(qū)別：動物組織培養(yǎng)過程中不需要用胰蛋白酶等使組織塊中的細胞離散。（2）動物細胞的培養(yǎng)條件①無菌、無毒的環(huán)境——無菌處理、加抗生素殺菌、定期更換培養(yǎng)液。②營養(yǎng)——葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽和微量元素＋血清或血漿等天然成分。③溫度和pH——（±）℃和（～）。④氣體環(huán)境——95%空氣＋5%CO2。提醒①CO2作用——調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH；②空氣中O2作用——細胞有氧呼吸；③所用裝置——CO2培養(yǎng)箱。2．C[不管是動物細胞培養(yǎng)還是植物組織培養(yǎng)，最基本的一個外界條件就是都要在無菌環(huán)境條件下進行。此外，動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基，其中的碳源是葡萄糖，培養(yǎng)液中還需要加入一定的動物血清，其氣體環(huán)境是95%空氣＋5%的二氧化碳，以維持培養(yǎng)液的pH。而植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，其碳源為蔗糖，在組織培養(yǎng)的脫分化階段必須在黑暗條件下進行，再分化過程則需要一定的光照條件；動物細胞培養(yǎng)就是細胞的增殖，不能體現(xiàn)細胞的全能性，而植物組織培養(yǎng)體現(xiàn)了植物細胞的全能性。]知識鏈接培養(yǎng)基的類型（1）作用：為培養(yǎng)的組織和細胞提供所需的營養(yǎng)物質(zhì)等，提供生長條件。（2）分類①按照物理性質(zhì)可分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。②按照營養(yǎng)物質(zhì)的來源可分為合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基。（3）天然培養(yǎng)基①來源：動物血清、動物組織提取液和雞胚汁。②特點：營養(yǎng)價值高、成分復雜。（4）合成培養(yǎng)基①來源：人工配制。②特點：成分明確、便于控制實驗條件；但缺乏某些無法替代的成分。因此也需要加入動物血清。③應用：用于實驗研究?！菊n后作業(yè)】1．A[在進行動物細胞培養(yǎng)前，先用胰蛋白酶使組織塊中的細胞相互分散開，以增加與培養(yǎng)液的接觸面積，便于培養(yǎng)。]2．A[動物細胞培養(yǎng)一般需要無菌、無毒的環(huán)境；一定的營養(yǎng)；一般與動物相近的體溫和適宜的pH以及氣體環(huán)境等。]3．A[兩者培養(yǎng)基的成分差別較大，動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基需加入動物血清，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基需加入激素和瓊脂。]5．