第十單元現(xiàn)代生物科技專題第39課時基因工程與轉(zhuǎn)基因的安全性和生物武器1．2022·江蘇生物，27下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請回答下列問題：限制酶BamHⅠHindⅢEcoRⅠSmaⅠ識別序列及切割位點G↓GATCCCCTAG↑GA↓AGCTTTTCGA↑AG↓AATTCCTTAA↑GC↓CCGGGGGGCC↑C1一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割前后，分別含有________個游離的磷酸基團(tuán)。2若對圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的SmaⅠ酶切位點越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越_______。3用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是_______。4與只使用EcoRI相比較，使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點在于可以防止_______________________________________________________。5為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入______________酶。6重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了___________________________________。2．通過基因工程的方法，科學(xué)家采用花粉管通道法將毒蛋白基因轉(zhuǎn)入棉花植株并獲得成功表達(dá)。棉鈴蟲吃了這種轉(zhuǎn)基因棉花的植株后就會死亡?；ǚ酃芡ǖ婪ㄊ侵福豪弥参锘ǚ勖劝l(fā)時形成的花粉管通道將毒蛋白基因送入胚囊，進(jìn)而導(dǎo)入尚不具備細(xì)胞壁的合子或早期胚體細(xì)胞中，借助天然的種胚系統(tǒng)，形成含有目的基因的種胚。請回答下列問題：1下列所示的黏性末端是由________種限制性核酸內(nèi)切酶作用產(chǎn)生的。2利用花粉管通道法將毒蛋白基因?qū)朊藁?xì)胞，此過程是基因工程操作步驟中的第三步，即______________。獲取目的基因時，如果基因比較小，核苷酸序列又已知，則可以通過DNA合成儀用化學(xué)方法直接______________。3該目的基因在導(dǎo)入受體細(xì)胞前需要與載體結(jié)合，目前經(jīng)常使用的載體是_________。4基因工程操作的第四步是目的基因的檢測與鑒定，其中分子水平的檢測又分三步：首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因，采用的技術(shù)是________________；其次還要檢測______________，方法同樣是采用分子雜交技術(shù)；最后檢測______________，方法是________雜交。5人們對轉(zhuǎn)基因生物安全性的關(guān)注，隨著轉(zhuǎn)基因成果的不斷涌現(xiàn)而與日俱增。有人認(rèn)為轉(zhuǎn)基因生物不會影響食物安全，你的觀點呢？理由是什么？______________________________________________________________________________。3．2022年諾貝爾化學(xué)獎授予了三位在研究綠色熒光蛋白GFHⅠ識別序列和切割位點—G↓GATCC—雙酶切后插入到大腸桿菌質(zhì)粒中，篩選含重組質(zhì)粒的大腸桿菌并進(jìn)行DNA測序驗證。①大腸桿菌是理想的受體細(xì)胞，這是因為它_________________________________________________________________________________________________________________。②設(shè)計EcoRⅠ和BamHⅠ雙酶切的目的是__________________________________________________________________________________________________________________。③要進(jìn)行重組質(zhì)粒的鑒定和選擇，需要大腸桿菌質(zhì)粒中含有____________________。3經(jīng)DNA測序表明，最初獲得的多個重組質(zhì)粒，均未發(fā)現(xiàn)完全正確的基因序列，最可能的原因是________________________________。4上述制備該新型降鈣素，運用的現(xiàn)代生物工程技術(shù)是__________。5．基因工程又叫基因拼接技術(shù)。1在該技術(shù)中，用人工合成方法獲得目的基因的途徑之一是：以目的基因轉(zhuǎn)錄的______________為模板，________________成互補的單鏈DNA，然后在酶的作用下合成______________。2基因工程中常用的受體細(xì)胞有細(xì)菌、真菌、________。3假設(shè)以大腸桿菌質(zhì)粒作為運載體，并以同一種限制性內(nèi)切酶切割運載體與目的基因，將切割后的運載體與目的基因片段混合，并加入DNA連接酶。連接產(chǎn)物至少有________種環(huán)狀DNA分子，它們分別是________________________________________________________________________________________________________________。把重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌細(xì)胞時一般用________處理以增加細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性。4假如把抗蟲基因?qū)朊藁ǖ囊粋€葉肉細(xì)胞中，為了避免造成基因污染你認(rèn)為應(yīng)該把目的基因連接在________“核基因”或“質(zhì)基因”中。6．應(yīng)用生物工程技術(shù)獲得人們需要的生物新品種或新產(chǎn)品，是生物科學(xué)技術(shù)轉(zhuǎn)化為生產(chǎn)力的重要體現(xiàn)。請據(jù)圖回答下列問題：1在培育轉(zhuǎn)基因牛的過程中，①過程需要的工具酶是___________________________，②過程常用的方法是___________________________________________________________。2轉(zhuǎn)基因?？赏ㄟ^分泌乳汁來生產(chǎn)人生長激素，在基因表達(dá)載體中，人生長激素基因的首端必須含有________，它是________________識別和結(jié)合點部位。③過程培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚階段，可以采用________技術(shù)，培育出多頭相同的轉(zhuǎn)基因牛犢。3aⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因4質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化5DNA連接6鑒別和篩選含有目的基因的細(xì)胞2．142將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞人工合成3質(zhì)粒其他合理答案也可4DNA分子雜交技術(shù)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗原—抗體5會影響食物安全。理由是：①擔(dān)心出現(xiàn)滯后效應(yīng)；②擔(dān)心出現(xiàn)新的過敏原；③擔(dān)心營養(yǎng)成分改變等。不會影響食物安全。理由是：①多環(huán)節(jié)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)陌踩栽u價；②科學(xué)家的負(fù)責(zé)態(tài)度可防止過敏源出現(xiàn)；③至今未發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因食物影響健康的實例等3．1GFRNA逆轉(zhuǎn)錄反轉(zhuǎn)錄雙鏈DNA目的基因2動、植物細(xì)胞33運載體自連的、目的基因片段自連的、運載體與目的基因片段相連的環(huán)狀DNA分子氯化鈣4質(zhì)基因6．1限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶顯微注射法2啟動子RNA聚合酶胚胎分割移植3漿既能無限增殖又能產(chǎn)生特定抗體4農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化全能性高植物組織培養(yǎng)7．1同一種限制酶和DNA連接酶2標(biāo)記基因3重組質(zhì)粒的篩選與擴(kuò)增植物細(xì)胞答