免疫學(xué) E玫瑰花環(huán)形成實(shí)驗(yàn)課件_第1頁
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文檔簡介

實(shí)驗(yàn)三E玫瑰花環(huán)形成實(shí)驗(yàn)玫瑰花環(huán)試驗(yàn)是體外檢測人和動(dòng)物細(xì)胞免疫功能的一種方法。E—玫瑰花環(huán)試驗(yàn)是T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)的一種重要方法。由于人和動(dòng)物的T淋巴細(xì)胞表面有紅細(xì)胞受體,因此紅細(xì)胞可以粘附到T淋巴細(xì)胞的周圍而形成玫瑰花樣的細(xì)胞團(tuán)。在紅細(xì)胞中,以綿羊紅細(xì)胞最為常用。B淋巴細(xì)胞則沒有紅細(xì)胞受體,所以不能形成E—玫瑰花環(huán),以資鑒別實(shí)驗(yàn)?zāi)康木毩?xí)取外周血熟悉淋巴細(xì)胞和外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)的分離方法學(xué)習(xí)E花環(huán)試驗(yàn)的操作方法觀察顯微鏡下E花環(huán)的形態(tài)實(shí)驗(yàn)原理人T淋巴細(xì)胞表面的CD2分子即綿羊紅細(xì)胞受體(ER),在一定的實(shí)驗(yàn)條件下,可與綿羊紅細(xì)胞(SRBC)結(jié)合,形成玫瑰花結(jié),稱為E玫瑰花環(huán)試驗(yàn)(erythrocyte-roseetteformationtest)。應(yīng)用最廣的有總E花環(huán)試驗(yàn)(Et,t為total的縮寫)和活性E花環(huán)試驗(yàn)(Ea,a為active的縮寫)。Et代表被檢標(biāo)本中T淋巴細(xì)胞的總數(shù),Ea則反映具有高親和力綿羊紅細(xì)胞受體的T細(xì)胞數(shù),這部分T細(xì)胞的免疫學(xué)功能更能反映機(jī)體細(xì)胞免疫功能和動(dòng)態(tài)變化。實(shí)驗(yàn)原理E花環(huán)試驗(yàn)主要用于了解機(jī)體細(xì)胞免疫功能。廣泛應(yīng)用于腫瘤免疫、移植免疫及免疫性疾病的研究,為某些疾病診斷和防治提供免疫學(xué)方面的重要參考。實(shí)驗(yàn)原理T細(xì)胞SRBCE受體(CD2)SRBC受體E玫瑰花環(huán)實(shí)驗(yàn)→判斷細(xì)胞免疫功能TBTT淋巴細(xì)胞玫瑰花結(jié)電鏡照片T淋巴細(xì)胞玫瑰花結(jié)示意圖稀釋的血液分離液離心稀釋的血液分離液稀釋的血漿單個(gè)核細(xì)胞分層液粒細(xì)胞、紅細(xì)胞人靜脈取血四個(gè)同學(xué)一組;嚴(yán)格無菌操作(消毒由中心想外周,半徑2--3cm,手不能碰觸針頭金屬部分);①綁好止血帶(肘上5--6cm,兩端向上)②右手持注射器刺入靜脈(枕頭斜面向上成15--30°角,扎入后平行前進(jìn)),徐徐抽取血液,達(dá)所需量時(shí),拔出針頭,用無菌棉球壓迫止血。③靜脈血立即注入肝素管中(除去針頭后再向試管加血,防止細(xì)胞破壞)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果T淋巴細(xì)胞玫瑰花結(jié)光鏡照片分析

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