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第二節(jié)白細(xì)胞檢驗
一、白細(xì)胞計數(shù)(一)、白細(xì)胞概述白細(xì)胞為球形,直徑7-25ul,分類有粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞。是肌體的抵御病原微生物等異物入侵的主要防線。1.粒細(xì)胞起源于骨髓造血干細(xì)胞a.中性粒細(xì)胞:防御功能b.嗜酸性粒細(xì)胞:限制過敏反應(yīng),參與蠕蟲的免疫反應(yīng)。c.嗜堿性粒細(xì)胞:形態(tài)與功能與肥大細(xì)胞相似,參與超敏反應(yīng)。單核細(xì)胞:來自粒-單祖細(xì)胞,進(jìn)入組織后變?yōu)榫奘杉?xì)胞,壽命2-3月。3.淋巴細(xì)胞:起源造血干細(xì)胞,分T和B淋巴細(xì)胞。(二)、顯微鏡計數(shù)法原理:用稀乙酸將血液稀釋并破壞紅細(xì)胞,混勻后,滴入計數(shù)盤中,在顯微鏡下計數(shù)一定范圍內(nèi)的白細(xì)胞數(shù),經(jīng)換算求得每升血液中白細(xì)胞總數(shù)。器材和試劑白細(xì)胞稀釋液:冰乙酸2.0ml10g/L亞甲藍(lán)數(shù)滴蒸餾水加至100ml
器材同紅細(xì)胞計數(shù)。計算
X/4×10×20×106/L=白細(xì)胞/L式中:在法定計量單位制中用△.△△×109/L表示
X:為4個大方格內(nèi)白細(xì)胞總數(shù)?!?:為每大方格(即0.1ul)內(nèi)白細(xì)胞平均數(shù)?!?0:1個大方格的容積為0.1ul,換算成1ul?!?0:血液的稀釋倍數(shù)?!?06:將ul換算成L正常參考值成人:(4-10)×109/L新生兒:(15-20)×109/L6月-2歲:(11-12)×109/L6.注意事項⊙采血時不能擠壓過度,因此針刺深度必須適當(dāng)。⊙在大方格內(nèi)壓線細(xì)胞應(yīng)按計數(shù)原則計數(shù)?!严♂屢阂^濾,小試管、計數(shù)板須清潔,以免雜質(zhì)、微粒等被誤認(rèn)為細(xì)胞?!殉涑厍暗膿u勻要注意,氣泡不能太多?!鸭由w玻片方式:“推式”,不要“蓋式”??己嗽u價
a.
常規(guī)考核標(biāo)準(zhǔn)(RCS)RCS=×100%評價:白細(xì)胞≤4×109/L者,RCS<30%
白細(xì)胞在(4.1-14.9)×109/L者RCS<20%
白細(xì)胞≥15×109/L者RCS<15%
超過上述標(biāo)準(zhǔn)者為不合格
b.
其他方法四大格所見白細(xì)胞最大值—最小值四大格所見白細(xì)胞數(shù)平均值二、白細(xì)胞分類計數(shù)(一)、外周血正常白細(xì)胞形態(tài)1.中性粒細(xì)胞胞體圓形,直徑10-15um,為紅細(xì)胞的兩倍。胞質(zhì)豐富,粉紅色,含較多細(xì)小均勻的紫紅色中性顆粒。細(xì)胞核染色質(zhì)粗糙不勻,排列緊密,為深紫紅色。根據(jù)核形狀分類:中性桿狀核粒細(xì)胞中性分葉核粒細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn):核徑最窄處小于最寬處1/3為分葉核核徑最窄處大于最寬處1/3為桿狀核嗜酸性粒細(xì)胞細(xì)胞圓形,直徑13-15um,略大于中性粒細(xì)胞。胞漿內(nèi)充滿粗大、整齊、均勻、排列緊密、有立體感的桔紅色嗜酸性顆粒,偶見少許淡藍(lán)或無色胞漿。嗜酸性粒細(xì)胞容易破碎,顆??煞稚⒂诩?xì)胞周圍。嗜堿性粒細(xì)胞細(xì)胞圓形,直徑10-12um,略小于中性粒細(xì)胞。胞漿少,常呈淡紅或淡紫紅色,含少量粗大、不均勻、排列不規(guī)則的紫黑色嗜堿性顆粒,常蓋于核上,及細(xì)胞邊緣。單核細(xì)胞細(xì)胞圓形或不規(guī)則形,為外周血中最大的細(xì)胞,直徑15-25um,胞漿豐富,染淡藍(lán)或灰藍(lán)色,呈毛玻璃樣半透明,含有大量細(xì)小、灰塵樣嗜天青顆粒,可見空泡。細(xì)胞核大,呈不規(guī)則圓形、腎形、馬蹄形或不規(guī)則分葉,有時折疊扭曲。染色質(zhì)細(xì)致、疏松如網(wǎng)狀。淋巴細(xì)胞大淋巴細(xì)胞:體積較大,直徑10-15um,胞漿豐富,呈透明藍(lán)色,常有少量粗大、大小不均的紫紅色嗜天青顆粒。細(xì)胞核染色質(zhì)疏松。小淋巴細(xì)胞:細(xì)胞圓形,直徑6-10um,胞漿很少,有的僅在核的一側(cè)出現(xiàn)一線藍(lán)色胞漿,甚至完全沒有。細(xì)胞核圓形,偶見凹陷,染色質(zhì)粗糙致密,可有塊狀。(二)、外周血中異常白細(xì)胞形態(tài)
1.中性粒細(xì)胞毒性變化:中性粒細(xì)胞大小不均;病程長的化膿性炎癥毒性顆粒:化膿菌感染及大面積燒傷空泡變性:敗血癥杜勒體:是核和胞質(zhì)發(fā)育不平衡表現(xiàn)核變性:核固縮、核溶解、核破裂2.淋巴細(xì)胞異常:異型淋巴細(xì)胞:分三型具有衛(wèi)星核的淋巴細(xì)胞:受電離輻射,除淋巴細(xì)胞減少,還有衛(wèi)星核的淋巴細(xì)胞3.其它異常細(xì)胞
(三)、白細(xì)胞分類計數(shù)法血涂片的光學(xué)顯微鏡檢查,是血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查的基本方法,特別是對于血液病的診斷,占有極重要的地位。1.原理:將標(biāo)本制成血涂片,經(jīng)Wright染色后,在顯微鏡下根據(jù)白細(xì)胞形態(tài)學(xué)特點逐個分類計數(shù),得出各種白細(xì)胞相對比值(或百分率),并注意觀察其形態(tài)和質(zhì)量的變化。正常參考值中性桿狀核粒細(xì)胞:1%-5%中性分葉核粒細(xì)胞:50%-70%嗜酸性粒細(xì)胞(E):0.5%-5%
嗜堿性粒細(xì)胞(B):0%-1%
淋巴細(xì)胞:20%-40%單核細(xì)胞:3%-8%5.注意事項:
a.血膜要干透后才能染色,否則染色時易脫落b.染色時間與染液濃度、室溫及細(xì)胞多少有關(guān),一般染液淡、染色時間長些效果好。c.染液不能過少,以防蒸發(fā)沉淀。
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