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文檔簡介

2023學(xué)年高考生物模擬試卷注意事項1.考試結(jié)束后,請將本試卷和答題卡一并交回.2.答題前,請務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號用0.5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置.3.請認真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準(zhǔn)考證號與本人是否相符.4.作答選擇題,必須用2B鉛筆將答題卡上對應(yīng)選項的方框涂滿、涂黑;如需改動,請用橡皮擦干凈后,再選涂其他答案.作答非選擇題,必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答,在其他位置作答一律無效.5.如需作圖,須用2B鉛筆繪、寫清楚,線條、符號等須加黑、加粗.一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.將生長狀態(tài)一致的某種植物幼苗分成甲、乙兩組,分別移人同種適宜的營養(yǎng)液中在光下培養(yǎng),并給甲組的營養(yǎng)液適時通人空氣,乙組不進行通氣處理。一定時間后測得甲組的根對a離子的吸收速率遠大于乙組的。由此說明根細胞對a離子的吸收過程屬于()A.主動運輸 B.被動運輸C.自由擴散 D.協(xié)助擴散2.下列關(guān)于細胞的結(jié)構(gòu)與功能的相關(guān)敘述中,正確的是()A.人成熟紅細胞無線粒體,其有氧呼吸場所是細胞質(zhì)基質(zhì)B.植物細胞葉綠體產(chǎn)生的ATP能用于生長、物質(zhì)運輸?shù)壬磉^程C.核糖體是蛋白質(zhì)的“裝配機器”,由蛋白質(zhì)和RNA組成D.根尖分生區(qū)細胞中高爾基體與分裂后期細胞壁的形成有關(guān)3.與靜坐狀態(tài)相比,人體劇烈運動時,通常情況下會出現(xiàn)的是()A.細胞呼吸產(chǎn)生的CO2與消耗的O2比值更大B.ATP分解速率更大,合成速率更小C.糖原分解速率更大,合成速率更小D.產(chǎn)熱速率更大,散熱速率更小4.下列有關(guān)物質(zhì)運輸?shù)臄⑹?,錯誤的是()A.人成熟紅細胞吸收K+過程中所需能量由無氧呼吸提供B.胰島素從細胞內(nèi)運輸?shù)郊毎獠恍枰d體蛋白協(xié)助C.膜蛋白不參與物質(zhì)跨膜運輸?shù)谋粍舆\輸過程D.抑制神經(jīng)細胞膜上載體活性會影響興奮的傳導(dǎo)5.研究人員在水稻中發(fā)現(xiàn)了一株具有明顯早熟特性的變異植株,并欲以此為基礎(chǔ)培育早熟水稻新品種。下列相關(guān)說法錯誤的是A.要判斷該變異植株是否具有育種價值,首先應(yīng)確定它的遺傳物質(zhì)是否發(fā)生了變化B.若該變異植株具有育種價值,在選擇育種方法時,首先應(yīng)確定其變異類型C.若該變異是由某個基因突變引起的,則與晚熟品種雜交即可獲得符合要求的新品種D.若該變異是由某個基因突變引起的,則要快速獲得新品種,可選擇單倍體育種的方法6.適宜溫度和光照下,在缺少某無機鹽的“完全培養(yǎng)液”中培養(yǎng)水稻幼苗,植物葉片顯出缺綠癥狀,當(dāng)補充鎂鹽時,培養(yǎng)一段時間后,上述癥狀消失,下列有關(guān)敘述錯誤的是()A.補充鎂鹽后該幼苗葉肉細胞內(nèi)NADPH的合成速率降低B.該實驗說明鎂是構(gòu)成水稻幼苗葉綠素分子的必需元素C.該實驗說明無機鹽對于維持生物體的生命活動有重要意義D.該實驗的對照組可用含該無機鹽的完全培養(yǎng)液培養(yǎng)植株7.植物體內(nèi)可以形成通氣組織,下列敘述錯誤的是()A.通氣組織的形成與細胞凋亡有關(guān) B.通氣組織的形成與基因選擇性表達有關(guān)C.通氣組織的形成受環(huán)境因素影響 D.通氣組織的形成與溶酶體活動無關(guān)8.(10分)對下列四幅圖的敘述,錯誤的是()A.圖1中c+d階段可以表示一個細胞周期B.圖2中的溫度為b時酶分子結(jié)構(gòu)受到破壞,活性喪失C.圖3中引起bc段和de段的變化因素都是C3化合物含量下降D.圖4中造成cd段下降的原因在有絲分裂和減數(shù)分裂中相同二、非選擇題9.(10分)下圖甲是人體穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)的部分示意圖,圖乙是睪丸酮(雄性激素)的調(diào)節(jié)機制示意圖。請據(jù)圖回答下列問題:(3)由圖甲可知,在機體穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)過程中,細胞間可通過____________等信息分子進行信息交流。當(dāng)T細胞活性下降時,會引起機體生成抗體的能力降低,其主要原因是:______________。(4)有研究表明吸食阿片類毒品(嗎啡、海洛因等)會影響人體性腺功能。有研究者對某戒毒所內(nèi)的吸毒人員進行相關(guān)激素的檢測并與健康人比較,檢測結(jié)果的平均值如下表。組別(人數(shù))平均年齡(歲)吸毒(年)吸毒量(g/d)LH(mlu/ml)FSH(mlu/ml)睪丸酮(mlu/ml)健康者(30)43——3.454.34.53吸毒者(37)34平均3平均3.53.334.843.08調(diào)查發(fā)現(xiàn)吸毒者容易出現(xiàn)怕冷、寒熱交替等癥狀,說明吸毒使下丘腦的____________受損,吸毒者的后代容易出現(xiàn)畸形兒、怪胎,可能的原因是毒品容易引起生殖器官中的____________過程異常。有人對該調(diào)查的科學(xué)性提出質(zhì)疑,你認為可能是(至少兩點)____________。10.(14分)植物組織培養(yǎng)與基因工程技術(shù)在科學(xué)研究和生產(chǎn)實踐中得到了廣泛的應(yīng)用。為使水稻獲得抗除草劑性狀,科研人員將除草劑草甘膦抗性基因轉(zhuǎn)入水稻植株,獲得抗草甘膦轉(zhuǎn)基因水稻。請回答問題。注:GUS基因表達產(chǎn)物經(jīng)染色能從無色變成藍色(1)將草甘膦抗性基因作為____________,與Ti質(zhì)粒用相同的____________和DNA連接酶處理構(gòu)建基因表達載體。(2)取某品種水稻的幼胚,先進行____________處理,然后接種到培養(yǎng)基中,水稻幼胚細胞發(fā)生____________形成愈傷組織。培養(yǎng)過程中曾出現(xiàn)下圖所示的不同培養(yǎng)結(jié)果,該不同結(jié)果的出現(xiàn)主要是由于培養(yǎng)基中兩種激素用量的不同造成的,這兩種激素是____________和____________。(3)利用PCR技術(shù),可以鑒定被侵染的愈傷組織中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性基因的部分序列如下:5'—ATGGCT.........AGGAAC—3'3'—TACCGA.........TCCTTG—5'根據(jù)上述序列應(yīng)選擇引物____________(填字母)進行PCR。A.引物:5'-TACCGA-3'B.引物:5'-GTTCCT-3'C.引物:5'-AUGGCU-3'D.引物:5’-ATGGCT-3’(4)除了鑒定愈傷組織中是否含有目的基因以外,還可以利用GUS基因表達產(chǎn)物的鑒定進行圖中的篩選2,以確定目的基因是否____________。兩次篩選后得到的轉(zhuǎn)基因愈傷組織經(jīng)過細胞的____________過程,獲得轉(zhuǎn)基因水稻。(5)為獲得具有抗除草劑性狀的轉(zhuǎn)基因水稻,還需要在個體水平進行抗性測試。請你設(shè)計一個實驗方案,篩選出對草甘膦具有抗性的轉(zhuǎn)基因水稻(只寫出實驗思路即可)。_______________________。11.(14分)癌細胞表面蛋白“PDL-1”與T細胞表面蛋白“PD-1”特異性結(jié)合后,可抑制T細胞活性并啟動其凋亡,導(dǎo)致腫瘤細胞發(fā)生免疫“逃逸”。研究者對“PD-1”基因進行克隆、表達及生物學(xué)活性鑒定,為制備抗體打基礎(chǔ)。研究中所用引物α和β堿基序列見圖1、幾種常用限制酶名稱及識別序列與酶切位點見圖2:α鏈:5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β鏈:5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'圖1(1)首先提取細胞中的mRNA反轉(zhuǎn)錄生成____________________作為模板;設(shè)計含有不同的限制酶切點的α和β序列為引物,通過____________________技術(shù)擴增目的基因。(2)選用圖1中的兩種名稱分別為____________________的限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?!陛d體進行雙切,再用DNA連接酶將其與目的基因拼接,構(gòu)建表達載體。該表達載體的組成,除了目的基因、標(biāo)記基因抗卡那霉素基因外,還必須具有____________________等。(3)而后一定溫度下,與經(jīng)過處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有_____________培養(yǎng)基中,可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌,繼續(xù)培養(yǎng)該種大腸桿菌以擴增重組DNA。(4)將擴增后的“pIRES2-EGFP載體/PD-1重組DNA”轉(zhuǎn)入可高度表達外源基因的原代293T細胞。一段時間后,為確定PD-1基因是否表達,檢測細胞膜表面是否具有____________________。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能,則可裂解293T細胞,提取該物質(zhì)看能否與____________________發(fā)生結(jié)合,從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。研究中還會有一步驟,只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細胞,其目的是_________________________。12.大麥芽是傳統(tǒng)方法生產(chǎn)啤酒常用的原材料,其原理是利用大麥種子在萌芽時產(chǎn)生的α-淀粉酶。后來發(fā)現(xiàn),用GA(赤霉素)處理大麥種子時,無須發(fā)芽就可以產(chǎn)生α-淀粉酶,這樣就可簡化工藝、降低成本。為驗證這一結(jié)論,某研究小組做了如下實驗:試管號GA溶液緩沖液水半粒種子10個實驗步驟實驗結(jié)果步驟1步驟21011帶胚25℃保溫24h后去除種子,在各試管中分別加入1mL淀粉液25℃保溫10min后各試管中分別加入1mL碘液,混勻后觀察溶液顏色深淺++2011去胚++++30.210.8?++40.410.6去胚+50.410.6不加種子++++注:實驗結(jié)果中“+”越多表示顏色越深。表中液體量的單位均為mL。請分析回答:(1)綜合分析可知,試管3處理中的“?”應(yīng)為_____________。實驗中,緩沖液的作用是_____________。(2)根據(jù)試管_____________的實驗結(jié)果,可說明帶胚的種子保溫后能夠產(chǎn)生α-淀粉酶,使淀粉水解。(3)綜合分析各組的實驗結(jié)果,種子里最可能生產(chǎn)GA的部位是_____________,最可能產(chǎn)生α-淀粉酶的部位是_____________。(4)本實驗的結(jié)果還可以用_____________試劑檢測。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【解析】

小分子物質(zhì)跨膜運輸?shù)姆绞胶吞攸c:名

稱運輸方向載體能量實

例自由擴散(簡單擴散)高濃度低濃度不需不需水,CO2,O2,甘油,苯、酒精等協(xié)助擴散(易化擴散)高濃度低濃度需要不需紅細胞吸收葡萄糖主動運輸?shù)蜐舛雀邼舛刃枰枰∧c絨毛上皮細胞吸收氨基酸,葡萄糖等【詳解】分析題意可知,甲組的營養(yǎng)液適時通入空氣,乙組不進行通氣處理。一定時間后測得甲組的根對a離子的吸收速率遠大于乙組的。說明根對a離子的吸收和有氧呼吸有關(guān),是消耗能量的,應(yīng)該是主動運輸,A正確。故選A。2、C【解析】

各種細胞器的結(jié)構(gòu)、功能細胞器分布形態(tài)結(jié)構(gòu)功能線粒體動植物細胞雙層膜結(jié)構(gòu)有氧呼吸的主要場所細胞的“動力車間”葉綠體植物葉肉細胞雙層膜結(jié)構(gòu)植物細胞進行光合作用的場所;植物細胞的“養(yǎng)料制造車間”和“能量轉(zhuǎn)換站”。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)動植物細胞單層膜形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的合成和加工,以及脂質(zhì)合成的“車間”高爾基體動植物細胞單層膜構(gòu)成的囊狀結(jié)構(gòu)對來自內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的蛋白質(zhì)進行加工、分類和包裝的“車間”及“發(fā)送站”(動物細胞高爾基體與分泌有關(guān);植物則參與細胞壁形成)核糖體動植物細胞無膜結(jié)構(gòu),有的附著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上,有的游離在細胞質(zhì)中合成蛋白質(zhì)的場所“生產(chǎn)蛋白質(zhì)的機器”溶酶體動植物細胞單層膜形成的泡狀結(jié)構(gòu)“消化車間”,內(nèi)含多種水解酶,能分解衰老、損傷的細胞器,吞噬并且殺死侵入細胞的病毒和細菌。液泡成熟植物細胞單層膜形成的泡狀結(jié)構(gòu);內(nèi)含細胞液(有機酸、糖類、無機鹽、色素和蛋白質(zhì)等)調(diào)節(jié)植物細胞內(nèi)的環(huán)境,充盈的液泡使植物細胞保持堅挺中心體動物或某些低等植物細胞無膜結(jié)構(gòu);由兩個互相垂直的中心粒及其周圍物質(zhì)組成與細胞的有絲分裂有關(guān)【詳解】A、人體成熟的紅細胞無線粒體,不能進行有氧呼吸,其無氧呼吸的場所是細胞質(zhì)基質(zhì),A錯誤;B、植物細胞葉綠體產(chǎn)生的ATP只能用于暗反應(yīng),不能用于生長、物質(zhì)運輸?shù)壬磉^程,B錯誤;C、核糖體是蛋白質(zhì)的“裝配機器”,由蛋白質(zhì)和RNA組成,C正確;D、根尖分生區(qū)細胞中高爾基體與分裂末期細胞壁的形成有關(guān),D錯誤。故選C。3、C【解析】

人體細胞有氧呼吸的反應(yīng)式是:6O2+C6H12O6+6H2O6CO2+12H2O+能量,無氧呼吸的反應(yīng)式為:C6H12O62C3H6O3+能量?!驹斀狻緼、人體只能通過有氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳,故細胞呼吸產(chǎn)生的CO2與消耗的O2比值等于1,A錯誤;B、人體劇烈運動時耗能多,產(chǎn)生的能量也多,故ATP分解速率和合成速率都更大,B錯誤;C、劇烈運動時消耗的葡萄糖增加,為補充血糖,糖原分解速率增大,合成速率減小,C正確;D、為維持體溫恒定,產(chǎn)熱速率和散熱速率都增大,D錯誤。故選C。4、C【解析】

小分子物質(zhì)跨膜運輸?shù)姆绞胶吞攸c:名

稱運輸方向載體能量實

例自由擴散(簡單擴散)高濃度低濃度不需不需水,CO2,O2,甘油,苯、酒精等協(xié)助擴散(易化擴散)高濃度低濃度需要不需紅細胞吸收葡萄糖主動運輸?shù)蜐舛雀邼舛刃枰枰∧c絨毛上皮細胞吸收氨基酸,葡萄糖等【詳解】A、人成熟紅細胞沒有線粒體,只進行無氧呼吸,故吸收K+過程中所需能量由無氧呼吸提供,A正確;B、胰島素屬于大分子物質(zhì),通過胞吐運輸?shù)郊毎?,不需要載體蛋白協(xié)助,B正確;C、膜蛋白參與被動運輸過程中的協(xié)助擴散,C錯誤;D、興奮的產(chǎn)生和傳導(dǎo)與離子的跨膜運輸有關(guān),需要神經(jīng)細胞膜上的載體參與,故抵制神經(jīng)細胞膜上載體活性會影響興奮的傳導(dǎo),D正確。故選C。5、C【解析】

該題主要考察了育種方式的選擇,而對該變異植株進行育種之前應(yīng)先判定它屬于哪種變異情況,以便確定是否具有育種價值。單倍體育種具有明顯縮短育種年限的優(yōu)點,識記每種育種方法的過程和特點是本題的解題關(guān)鍵?!驹斀狻緼、變異分為可遺傳變異和不可遺傳變異,可遺傳變異才能在育種上進行操作,可遺傳變異的遺傳物質(zhì)發(fā)生了變化,所以要確定它的遺傳物質(zhì)是否發(fā)生了變化,A正確;B、不同的變異類型,育種方法不一樣,所以要先確定變異類型,如果是基因突變,可采用自交或單倍體育種的方法,如果是染色體變異,可以采用細胞工程育種,B正確;C、若該變異是由某個基因突變引起的,則該早熟變異植株為顯性,與晚熟品種雜交后,需要進行連續(xù)自交才能獲得所需要的新品種,C錯誤;D、若該變異是由某個基因突變引起的,則要快速獲得新品種,可選擇單倍體育種的方法,因為單倍體育種可以獲得含有突變基因的配子,且明顯縮短育種年限,通過單倍體育種,可以獲得含有突變基因的純合子,D正確;故選C。6、A【解析】

根據(jù)題干信息分析,適宜條件下,在缺少某無機鹽的“完全培養(yǎng)液”中培養(yǎng)水稻幼苗,植物葉片顯出缺綠癥狀,說明缺少的無機鹽使得葉綠素合成減少;而補充鎂鹽時,培養(yǎng)一段時間后,上述癥狀消失,說明鎂是構(gòu)成葉綠素的重要元素?!驹斀狻緼、補充鎂鹽后該幼苗葉肉細胞內(nèi)缺綠癥狀消失,說明葉綠素含量增加了,則葉肉細胞光反應(yīng)產(chǎn)生NADPH的速率將增加,A錯誤;B、根據(jù)以上分析可知,該實驗說明鎂是構(gòu)成水稻幼苗葉綠素分子的必需元素,B正確;C、該實驗中缺鎂導(dǎo)致植物葉片顯出缺綠癥狀,進而影響了光合作用的進行,說明無機鹽對于維持生物體的生命活動有重要意義,C正確;D、實驗組用的是缺少某無機鹽的“完全培養(yǎng)液”,因此對照組可用含該無機鹽的完全培養(yǎng)液培養(yǎng)植株,D正確。故選A。7、D【解析】

具有大量細胞間隙的薄壁組織,稱為通氣組織;通氣組織是植物薄壁組織內(nèi)一些氣室或空腔的集合;許多水生和濕生植物在根莖內(nèi)均形成通氣組織,其它一些植物(包括兩棲類和陸生植物)在缺氧環(huán)境中也分化產(chǎn)生或加速通氣組織的發(fā)育?!驹斀狻緼、植物體內(nèi)通氣組織的形成與細胞凋亡有關(guān),A正確;B、植物體內(nèi)通氣組織的形成是基因選擇性表達的結(jié)果,B正確;C、植物體內(nèi)通氣組織的形成受環(huán)境因素如氧氣等的影響,C正確;D、溶酶體能夠分解很多種物質(zhì)以及衰老、損傷的細胞器,在植物通氣組織的形成中起重要作用,D錯誤。故選D。8、C【解析】

根據(jù)題意和圖示分析可知:圖1中c表示分裂間期,b和d表示分裂期;圖2表示溫度對酶活性的影響,低溫時酶活性降低,不會失活,高溫時,酶會變性失活;圖3中bc段是由于氣溫高,蒸騰作用強,氣孔關(guān)閉,二氧化碳吸收量下降,導(dǎo)致C3化合物合成的速率下降,de段是光照強度下降導(dǎo)致光合速率下降,C3化合物的還原減少,導(dǎo)致C3化合物積累;圖4中造成cd段下降的原因1條染色體的2條姐妹染色單體分離?!驹斀狻緼、細胞周期是指從一次分裂完成時開始到下一次分裂完成時為止,圖1中c表示分裂間期,d表示分裂期,c+d階段可以表示一個細胞周期,A正確;B、高溫時酶的空間結(jié)構(gòu)被破壞,活性喪失,B正確;C、圖3中bc段是由于氣溫高,蒸騰作用強,氣孔關(guān)閉,二氧化碳吸收量下降,C3的生成速率減小,短時間內(nèi)C3的還原速率不變,所以C3化合物的含量下降,de段是光照強度下降導(dǎo)致光反應(yīng)速率下降,ATP和還原氫生成減少,C3化合物的還原速率降低,短時間內(nèi)C3的生成速率不變,所以C3化合物含量增加,C錯誤;D、圖4中cd段下降的原因是著絲點分裂導(dǎo)致1條染色體的2條姐妹染色單體分離,在有絲分裂和減數(shù)分裂中形成原因相同,D正確。故選C。【點睛】本題結(jié)合圖解,考查酶、有絲分裂、光合作用等知識,要求考生識記影響酶活性的因素,掌握相關(guān)曲線圖;識記有絲分裂不同時期的特點;識記掌握光合速率的因素,能結(jié)合曲線圖準(zhǔn)確判斷各選項。二、非選擇題9、激素、神經(jīng)遞質(zhì)、免疫活性物質(zhì)(淋巴因子)淋巴因子分泌量減少,影響了(不利于)B細胞增殖分化成漿細胞體溫調(diào)節(jié)中樞減數(shù)分裂①健康者和吸毒者年齡有較大差異②健康者和吸毒者選取的樣本數(shù)有差異③吸毒者間吸毒史有差異④吸毒者間吸食毒品的種類和數(shù)量有差異【解析】

分析圖甲:血液運輸激素作用于免疫細胞,神經(jīng)細胞分泌神經(jīng)遞質(zhì)作用于免疫細胞,免疫細胞分泌免疫活性物質(zhì)。

分析圖乙:圖乙表示下丘腦、垂體、睪丸的分級調(diào)節(jié)和負反饋調(diào)節(jié)。圖中a為下丘腦分泌的促性腺激素釋放激素,b為垂體分泌的促性腺激素,c為睪丸分泌的性激素,d為性激素的反饋調(diào)節(jié)?!驹斀狻浚?)維持機體穩(wěn)態(tài)離不開細胞間信息交流,由圖甲可知:細胞間可通過激素、神經(jīng)遞質(zhì)、免疫活性物質(zhì)(淋巴因子)等信息分子進行信息交流;當(dāng)T細胞活性下降時,淋巴因子分泌量減少,影響了(不利于)B細胞增殖分化成漿細胞,會引起機體生成抗體的能力降低。(4)體溫調(diào)節(jié)中樞位于下丘腦,吸毒者容易出現(xiàn)怕冷、寒熱交替等癥狀,說明吸毒使下丘腦的體溫調(diào)節(jié)中樞受損;吸毒者的后代容易出現(xiàn)畸形兒、怪胎,可能的原因是毒品容易引起生殖器官中的減數(shù)分裂過程異常;實驗中健康者和吸毒者年齡有較大差異,健康者和吸毒者選取的樣本數(shù)有差異,吸毒者間吸毒史可能有差異,吸毒者間吸食毒品的種類和數(shù)量可能差異,這些因素均會對實驗結(jié)果造成影響。【點睛】該題考查激素調(diào)節(jié)和免疫調(diào)節(jié)的相關(guān)知識,意在考查考生對基礎(chǔ)知識的識記能力以及學(xué)生分析圖表,解決問題的能力。10、目的基因限制酶消毒脫分化生長素細胞分裂素BD表達再分化選取長勢相同的野生型和轉(zhuǎn)基因水稻,用等量相同濃度的草甘膦農(nóng)藥噴灑,相同環(huán)境條件下培養(yǎng)一段時間后,觀測水稻的生長情況【解析】

1.基因工程的基本操作步驟主要包括四步:①目的基因的獲取,②基因表達載體的構(gòu)建,③將目的基因?qū)胧荏w細胞,④目的基因的檢測與鑒定。2.分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因:DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA:分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì):抗原-抗體雜交技術(shù)?!驹斀狻浚?)根據(jù)題干信息和圖形分析可知,草甘膦抗性基因為目的基因,將其與Ti質(zhì)粒連接成重組質(zhì)粒(基因表達載體)時需要用同一種限制酶進行切割。(2)取某品種水稻的幼胚,進行植物組織培養(yǎng)時,要注意無菌操作,先將外植體進行消毒,然后接種到培養(yǎng)基中培養(yǎng),幼胚發(fā)生脫分化形成愈傷組織;圖B和圖C形成的結(jié)果不同,是因為培養(yǎng)基中細胞分裂素和生長素的用量不同導(dǎo)致的。(3)根據(jù)題意分析,已知草甘膦抗性基因的部分序列,由于PCR技術(shù)中,子鏈合成的方向是從5'到3',因此應(yīng)選擇引物BD進行PCR技術(shù)。(4)據(jù)圖分析可知,目的基因插入的位置在GUS基因旁邊,而GUS基因表達產(chǎn)物經(jīng)染色能從無色變成藍色,因此可以利用GUS基因表達產(chǎn)物的鑒定進行圖中的篩選2,以確定目的基因是否表達;兩次篩選后得到的轉(zhuǎn)基因愈傷組織經(jīng)過再分化形成胚狀體,進而獲得完整的轉(zhuǎn)基因水稻植株。(5)根據(jù)題意分析,現(xiàn)要從個體水平進行抗性測試,篩選出對草甘膦具有抗性的轉(zhuǎn)基因水稻,則應(yīng)該對其噴灑草甘膦農(nóng)藥,具體操作如下:首先選取長勢相同的野生型和轉(zhuǎn)基因水稻,然后用等量的相同濃度的草甘膦農(nóng)藥噴灑,并在相同環(huán)境條件下培養(yǎng)一段時間后,通過觀測水稻的生長情況進行篩選?!军c睛】本題主要考查基因工程及其應(yīng)用、植物組織培養(yǎng)等相關(guān)知識,識記和理解目的基因的獲取、表達載體的構(gòu)建以及目的基因的檢測等知識是解答本題的關(guān)鍵。11、cDNAPCRXhoIEoRI啟動子、終止子、復(fù)制原點卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗體作為對照【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。(2)基因表達載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因采用DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA采用分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)采用抗原—抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!驹斀狻浚?)基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫(cDNA)。其中基因組文庫包含某種生物所有的基因,而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因,可以mRNA為模板反轉(zhuǎn)錄形成cDNA;由于PCR技術(shù)利用的是DNA分子復(fù)制的原理,所以用該cDNA進行PCR技術(shù)擴增短時間內(nèi)可以獲得大量的目的基因。(2)分析圖1中堿基序列,α鏈上有“—CTCGAC—”識別序列,β鏈上有“—GAATTC—”堿基識別序列,與圖2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的識別序列相同。故選用XhoI限制酶和EoRI限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)粒”載體進行雙切,再用DNA連接酶將其與目的基因拼接,構(gòu)建基因表達載體?;虮磉_載體的組成包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動子、終止子、復(fù)制原點等。(3)根據(jù)第(2)題可知

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