【農(nóng)業(yè)養(yǎng)殖技術(shù)】提高山羊胚胎移植成功率的因素

但胚胎移植技術(shù)科技含量高，投資成本大，使該技術(shù)在國內(nèi)畜牧良種繁育方面應(yīng)用力度不大，移植妊娠率相對不高，制約了畜牧良種繁育推廣和畜牧業(yè)快速發(fā)展。陜西省布爾羊良種繁育中心從1998年開始，連續(xù)引進(jìn)泰國、澳大利亞、南非等國外胚胎生物工程專家，與西農(nóng)大專家合作開展山羊胚胎移植上千例，取得了很好的成果。從供體和受體的選擇，供體的超排，受體同期化發(fā)情處理，胚胎回收、沖洗、鑒定，受體移植，受體羊的飼養(yǎng)等方面做了深入研究，總結(jié)出提高山羊胚胎移植成功率的主要因素。選擇優(yōu)秀的供體和受體供體選擇表現(xiàn)型好、生產(chǎn)水平高、遺傳性穩(wěn)定、體質(zhì)健康、發(fā)情周期正常、無生殖道疾病、有1胎~2胎正常繁殖史的2歲~5歲青壯年羊做供體。受體要求體形大、無生殖道疾病、產(chǎn)奶量高、哺乳力強的空懷母羊為受體，受體羊年齡2歲~5歲且有1胎~2胎正常繁殖史。供體和受體羊的比例一般為1∶10~1∶12為宜。加強供體和受體羊的飼養(yǎng)管理供體和受體羊在手術(shù)前3個月~4個月必須全部選留到位，并做好疫病的預(yù)防接種及必要的疫病監(jiān)測及驅(qū)蟲等工作。從術(shù)前2個月加強飼養(yǎng)，將日糧中的蛋白質(zhì)逐漸提高到20%~30%，要求羊身體健康，中上等膘情，防止過肥或過瘦。供體羊特別在處理期間及受體羊胚移后不能突然改變飼養(yǎng)環(huán)境、飼養(yǎng)方式及飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，避免長途運輸、意外驚嚇等應(yīng)激影響導(dǎo)致羊不排卵、胚胎退化及死亡，影響移植受胎率。選擇適宜的胚胎移植季節(jié)山羊胚胎移植最佳適宜的季節(jié)為8月~10月。7月羊處于發(fā)情初期，出現(xiàn)發(fā)情不排卵的比率較高，11月移植所產(chǎn)生的羔羊在次年4月其成活率及生長速度較低。應(yīng)避開最熱和最冷的季節(jié)，氣溫高于32℃，移植成功率較低。另外，陰雨天對移植成功率也有一定影響，應(yīng)盡量避開。使用最佳藥品，準(zhǔn)確把握劑量胚胎移植技術(shù)在國內(nèi)運用規(guī)模尚小，沒有專門生產(chǎn)胚胎移植藥品的廠家，目前國內(nèi)使用的胚胎移植藥品大部分都是科研單位自己研制，沒有大量應(yīng)用臨床實踐。選擇進(jìn)口藥物釋放性能好，效價穩(wěn)定，筆者在胚胎移植過程中，多年使用進(jìn)口硅膠陰道栓，其操作方法簡單，處理效果好，受到國內(nèi)專家好評。筆者總結(jié)出胚胎移植采用21天藥物處理程序，在第9天換栓1次，注射加拿大生產(chǎn)的FSH（Foltropin-r），劑量為200毫克~300毫克為宜，臂部肌肉分4天8次遞減注射，PMSG劑量以200IU為宜，受體同期發(fā)情利用率可達(dá)87.7%，撤栓時間受體應(yīng)比供體早撤栓12小時。供體羊注射PMSG劑量大則產(chǎn)生的未受精卵多，發(fā)情持續(xù)時間長。做好供體羊配種及受體羊試情記錄發(fā)情測定以供受體羊開始接受爬跨時間到拒絕接受爬跨時間為準(zhǔn)，以6小時~8小時進(jìn)行1次測情，一般用結(jié)扎輸精管后3個月的試情公羊測情，供體配種采用人工授精與公羊本交相結(jié)合的方式進(jìn)行，間隔6小時配種1次，胚胎有效利用率為99.8%，從發(fā)情開始至發(fā)束為止，一定要做好詳細(xì)的登記。抓好胚胎移植術(shù)前的消毒工作手術(shù)前對手術(shù)器械進(jìn)行高壓（15磅壓力30分鐘）、干熱（每小時220℃）滅菌，場地用紫外線照射30分鐘，噴灑消毒劑進(jìn)行手術(shù)場地及環(huán)境消毒，手術(shù)過程做到無菌操作。手術(shù)前受體禁食24小時，限量飲水，以防止手術(shù)前腹壓過大，造成手術(shù)困難和羊生殖道的損傷。選擇正確的沖胚方法供體采胚多采用手術(shù)沖胚法進(jìn)行，子宮角采集胚胎應(yīng)于配種后6天~6天半進(jìn)行，輸卵管沖胚法在配種后2天~3天進(jìn)行；麻醉以國產(chǎn)藥品846合劑肌肉注射進(jìn)行全身麻醉，同時準(zhǔn)備國產(chǎn)速醒靈解麻藥品進(jìn)行解救以防意外；手術(shù)部位利用電動剪進(jìn)行剪毛，5%的碘酊消毒，切口應(yīng)在乳房前腹中線兩側(cè)2厘米~3厘米處手術(shù)切口，以提高羊可手術(shù)次數(shù)，創(chuàng)口以3厘米~4厘米為宜；當(dāng)摸到子宮角或卵巢后不要強抓，用食指和中指輕輕夾住子宮角或輸卵管，緩慢牽引出切口外，不可用力過大或觸壓卵巢；進(jìn)行子宮角沖胚，沖胚液以20毫升~30毫升為宜，沖胚管（進(jìn)口）氣囊注入空氣為3毫升~4毫升；沖洗干凈手術(shù)部位的血凝塊，向腹腔內(nèi)注入含青鏈霉素的溫?zé)嵘睇}水250毫升~500毫升，將子宮角或輸卵管完全還納腹腔后，檢查腹腔有無異物，然后進(jìn)行腹膜縫合，依次為肌肉、皮膚縫合，皮膚涂紅霉素軟膏。胚胎質(zhì)量鑒定將沖出的胚胎倒入檢卵皿內(nèi)，在顯微鏡下進(jìn)行檢查，評定等級，按其質(zhì)量分為A、B、C三級，將C級胚胎及未受精卵、死胚、變性胚胎等不可用胚胎棄掉。一般根據(jù)受體羊黃體發(fā)育程度進(jìn)行1枚~3枚移植。盡量將兩枚胚胎同時移植入有黃體的同側(cè)子宮角內(nèi)。據(jù)測定，其胚胎成活率為70.5%，明顯高于移植1枚的成活率（62%）。胚胎質(zhì)量與移植方法將胚齡為6天~6天半胚胎移入同步發(fā)情±12小時(9.74±2.85)的受體子宮角內(nèi)，此時大多為早期囊胚或囊胚，其受胎率及產(chǎn)羔率也較高，桑椹胚受胎率52.6%(81/51)，產(chǎn)羔率85.6%(101/118)；早期囊胚受胎率59.4%(19/32)；產(chǎn)羔率88.5%(23/26)；擴張囊胚的受胎率66.2%（43/65)，產(chǎn)羔率78.3%(65/83)；囊胚受胎率57.7%(45/78)，產(chǎn)羔率98.5%(58/59)；孵化胚受胎率52.2%(24/26)，產(chǎn)羔率81.8%(27/33)。由此可見，胚胎質(zhì)量的好壞，對受胎率影響很大。采用腹腔鏡進(jìn)行移植，其特點是創(chuàng)口小，移植速度快，術(shù)后感染率低，一般手術(shù)熟練者移植1只需1分半鐘~3分鐘，每天可移植120只~150只，鮮胚妊娠率為60%~80%，術(shù)后感染率為5%以下，可以有效地節(jié)約時間，提高受胎率。飼養(yǎng)管理與妊娠診斷由于移植后的受體羊身價倍增，應(yīng)加強飼養(yǎng)管理，給予營養(yǎng)豐富的飼草飼料，避免因驚嚇、急趕、突然改變飼養(yǎng)環(huán)境、喂冰凍飼料及飲水等引起的應(yīng)激反應(yīng)造成胚胎早期死亡和胚移羊中后期流產(chǎn)，應(yīng)加強飼養(yǎng)管理；利用B超儀器進(jìn)行早期診斷，對懷孕胚胎移植羊按移植時間、批次以35只為單位組群，安排責(zé)任心強的人員管護(hù)飼養(yǎng)，每天檢查1次~2次傷口，發(fā)現(xiàn)傷口感染盡早處理。移植后兩個情期再進(jìn)行妊娠診斷：一般以2個情期未返情或用試情羊放入測情進(jìn)行鑒定，借助超聲波掃描儀進(jìn)行確診，及時處理空懷羊，給懷孕羊補充胡蘿卜等富含