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文檔簡介
DNA重組技術(recombinationDNA)人類基因組計劃(humangenomeproject,HGP)2003年4月美、英、法、德、日、中六個國家共同宣布已完成人類生命的分子指南—由30億個堿基對組成的人類基因組DNA的關鍵序列。(一)結構與構型
蛋白質所含氨基酸(α-氨基酸)都是L-構型(二)分類:①氨基酸可按分子中氨基和羧基的相對數(shù)目②也可按烴基的結構③根據(jù)氨基與羧基的相對位置不同第二節(jié)氨基酸的物理性質與光譜性質α-氨基酸都是無色晶體。因是在等電點成兩性離子時結晶出來的,分子內有極強的靜電引力,其熔點較相應的胺或羧酸高,通常在熔融時分解。
α-氨基酸都溶于水,在等電點時溶解度最小。由于具有兩性離子的結構,一般難溶于非極性溶劑。
α-氨基酸光譜性質:IR:1720cm-1處不出現(xiàn)羧基的典型譜峰,在近1600cm-1處有一羧酸負離子的吸收峰。在3100-2600cm-1間有一強而寬的N-H伸縮吸收峰。
只有芳香族的苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸有紫外吸收峰
STRUCTUREANALYSIS內鹽與強酸強堿反應等電狀態(tài),凈電荷為零pH<pIpH=pIpH>pI
(氨基)和二硝基氟苯(DNFB)反應
黃色用來鑒定多肽或蛋白質的末端氨基,用于測定氨基酸在蛋白質中的排列次序。不同的氨基酸其等電點也不相同:中性-氨基酸的等電點在5~6.3之間;酸性在2.8~3.2之間;堿性的在9.7~10.7之間。在等電點時,偶極離子的濃度最大,氨基酸的溶解度最小,因此可以通過調節(jié)等電點來分離、提純氨基酸。
定量計算氨基酸中氨基的含量,稱為VanSlyke氨基測定法5.(氨基)和甲醛反應6.氨基酸受熱反應
8.與茚三酮的反應α-氨基酸在堿性溶液中,與茚三酮反應,生成藍紫色物質,這是鑒定氨基酸的靈敏方法,此法還可以用于氨基酸的比色測定和紙上層析的顯色和刑偵中的指紋顯示。三、氨基酸的制備用醛或酮和HCN加成得氰醇,再和氨作用得氨基腈,水解后得氨基酸。1由醛或酮制備α-鹵代酸與過量的濃氨水作用,發(fā)生親核取代反應,生成α-氨基酸。
2鹵代酸氨解3.蓋布瑞爾合成法先將丙二酸酯轉化成N-鄰苯二甲酰亞胺基丙二酸酯,然后再烷基化,水解,脫羧,即可得α-氨基酸。
蛋氨酸4丙二酸酯法肽鍵肽鏈氮端(N端)碳端(C端)二、多肽結構的測定②這些氨基酸是按什么次序結合的。
①它是由哪些氨基酸組成的;1.定量分析1.N端分析:2.端基分析異硫氰酸苯酯法(Edman降解法):
2.C端分析3.部分水解法三、多肽的合成1.溶液法氨基的保護1.常用芐氧羰基,它與氨基相連時,在堿性溶液中穩(wěn)定,在酸性溶液中易水解。2.用叔丁氧羰基和對甲苯磺酰基
羧基的保護與活化羧基的保護:常用芐酯基
羧基的活化:1.疊氮法2.混酐法其它方法1.固相法2.酶促法3.基因工程法重要的多肽1谷胱甘肽為動植物細胞中都含有的一種三肽,即δ-谷氨酰半胱氨酰甘氨酸。它在生物體內的氧化還原中起重要的作用。2.催產素為腦垂體分泌的激素,具有促進子宮收縮和排乳作用,臨床上用于減少產后出血。其中的二硫鍵是由半胱氨酸的—SH基氧化得到,如通過還原作用破壞二硫鍵,則失去生理活性。3胰島素
是動物胰臓中分泌的一種激素,能調節(jié)碳水化合物的代謝,用于治療糖尿病,為51肽,含有兩條肽鏈,A鏈有21個氨基酸單位,B鏈有30個氨基酸單位,A鏈和B鏈之間通過二條二硫鍵連結起來。蛋白質的分類按蛋白質的結構,可分為單純蛋白質和結合蛋白質;按蛋白質的功能,可分為活性蛋白質和非活性蛋白質
蛋白質中的化學鍵:氫鍵、疏水鍵、范德華力、鹽鍵(離子鍵)、配位鍵、二硫鍵蛋白質的性質1.兩性和等電點2.膠體性質3.蛋白質的變性4.蛋白質的水解5.蛋白質的顯色反應(縮二脲反應、黃色反應、米倫反應、茚三酮反應)PH<pIpH=pIpH>pI
酶一、酶的組成分為單純酶和結合酶兩類:單純酶的催化活性僅由蛋白質的結構決定。結合酶的催化活性,除蛋白質部分外,還需要非蛋白質物質,稱為輔酶,如Cu2+、Zn2+、Mn2+等金屬離子和低分子量的有機化合物如葉綠素、血紅素、維生素等。二、酶催化反應的特點
①催化效率高,為一般催化劑的108~1010倍。②具有高度的選擇性,能識別對映體。③可在溫和條件下起催化反應,即在pH≈7,和37℃左右進行,但在高溫、強酸、強堿條件下易失活。三、酶的分類和命名
1分類在國際系統(tǒng)分類法中,酶的分類是按酶催化反應的性質,將其分為六大類:氧化還原酶轉移酶水解酶裂解酶異構酶合成酶。2命名按國際系統(tǒng)命名原則,每一種酶都有一個系統(tǒng)名稱和一個習慣名稱。習慣命名法:一般根據(jù)兩個原則:①根據(jù)作用物,如水解淀粉的叫淀粉酶,水解蛋白質的叫蛋白酶等。②根據(jù)催化反應的性質,如水解酶、氧化酶、脫氫酶等。常結合上述兩個原則來命名,如乳酸脫氫酶,是催化乳酸脫氫反應的。系統(tǒng)命名法:是以酶的催化反應為基礎命名,名稱要寫出作用物及催化反應的性質。如谷丙轉氨酶的系統(tǒng)名稱為丙氨酸:酮戊二酸氨基轉移酶,兩種作用物之間用“:”隔開。核酸
β-D-呋喃核糖
β-D-2-脫氧呋喃核糖
1戊糖核糖核酸(RNA)水解得到的戊糖是核糖,脫氧核糖核酸(DNA)水解得到的戊糖是2-脫氧核糖。
2堿基存在于核苷酸中的堿基,都是嘧啶或嘌呤的衍生物,常見的只有五種:脲嘧啶(U)、胞嘧啶(C)、胸腺嘧啶(T)、腺嘌呤(A)、鳥嘌呤(G)。從RNA水解得到的堿基有C、U、A、G。從DNA水解得到的堿基有C、T、A、G。3核苷
核苷是由環(huán)狀結構的核糖或脫氧核糖上的半縮醛羥基,與有機堿上的含氮基團失水形成的糖苷。
2′-脫氧胞苷
腺苷
1-β-D
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