第九章

種子健康檢驗張園莉鄭軍麗張瑞珍姚天蘢莊澤龍主講：張麗第九章種子健康檢驗第九章種子健康檢驗第九章種子健康檢驗第九章種子健康檢驗由于種子帶病的類型和病原物的不同，其病害檢驗的方法也不相同主要有以下幾種：

第三節(jié)種子病原物的檢驗方法

一、肉眼檢驗

1.適用范圍

1）混雜在種子間的較大病原體

2）污染大量病菌孢子的種子

3）種子帶明顯病癥的病粒

2.檢驗方法

將檢驗樣品分出一半放在白紙或白色搪瓷盤中，檢出線蟲癭,麥角菌,黑粉菌球,菌核及病粒,稱其重量,計算病害感染率。3.注意

1)無病癥的種子不一定是無病的種子;2)不同的病害可以表現(xiàn)類似的癥狀;3)同一病害也可表現(xiàn)不同癥狀。

二、過篩檢驗

1.適用范圍

1)檢查混雜在種子內(nèi)較大的病原體如菟絲子,菌核,線蟲癭和雜草種子等。2)利用病原體與種子的小的不同,通過一定的篩孔將病原體篩出來,然后進行分類稱重。

2.檢驗方法將送驗樣品分出一半作為試樣,用規(guī)定孔徑的篩子過篩；各層樣品倒入白瓷盤內(nèi)檢查,最下層的雜志倒入黑玻璃盤中用肉眼或放大鏡檢查。

三、洗滌檢驗

1.適用范圍

種子表面帶病而肉眼看不見的種子病害。（附著在種子表面的病菌孢子）

2.檢驗方法樣品制備：取樣（5g）2份于100ml三角瓶內(nèi)，加蒸餾水10ml,振蕩５～10min。顯微計數(shù)：懸浮液1000～1500r/min離心3～5min,吸去上清液，留1ML沉淀部分，滴于5個載玻片，加蓋玻片鏡檢，每片檢查十個視野，并計算每個視野平均孢子數(shù)。

四、漏斗分離檢驗

1.適用范圍

檢驗種子外部所攜帶的線蟲。

檢驗原理:種傳線蟲在水中和有空氣的條件下會活化，具有趨水性和向地性，鉆出種子游進水中，用顯微鏡檢查水中的線蟲。

2.檢驗方法將種子用2層紗布包好，放入備好的漏斗內(nèi)，漏斗需10～15cm口徑，下口接約10cm長的橡皮管一根，用彈簧夾夾住；加水使種子浸沒，放在20～25℃的環(huán)境中浸10～24h；用離心管接取浸出液，再放在2000r/min的離心機中離心5min,取下部沉淀液置于載玻片上檢查線蟲。

五、萌芽實驗

1.適用范圍

種子攜帶的病菌，無論是在種子表面，還是潛伏在種子內(nèi)部，只要在種子萌發(fā)階段開始為害或長出病菌的，都可用此種方法進行檢驗。

2.檢驗方法

1）吸水紙法

2）砂床法

六、分離培養(yǎng)檢驗1.適用范圍

主要用于發(fā)育較慢的致病真菌、潛伏在種子內(nèi)部的、表面的病原菌，也可用來確定病菌潛伏的部位。2.檢驗方法1）數(shù)取試樣400粒；2）預(yù)處理:

檢驗種子內(nèi)部的病原菌時，可用乙醇、0.1%的升汞，或0.1%的次氯酸鈉作表面消毒后，用無菌水洗滌；3）培養(yǎng):

每個培養(yǎng)皿播10粒種子于培養(yǎng)皿表面，20～22℃黑暗條件下培養(yǎng)5～7d檢查；

馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基常用于培養(yǎng)真菌，牛肉汁培養(yǎng)基常用于培養(yǎng)細菌。

七、噬菌體檢驗

1.適用范圍

細菌性病害。噬菌體能造成寄主細菌的破裂和溶解，所以在固體培養(yǎng)基上造成許多透亮的無菌空斑（噬菌斑）。

2.檢驗方法樣品的制備：稱一定重量的種子，根據(jù)其傳播方式，取其帶病的部位進行，加入一定量的滅菌水，浸泡0.5～1h，并不斷攪拌，濾紙過濾，取濾液1ml3個重復(fù)，分別放入3個培養(yǎng)皿中；測定：加入1ml指示菌液（大于9億個菌/ml)混勻，3～5min后加入10ml溶化并冷卻至45～50℃的固體平板培養(yǎng)基，放入25～28℃的恒溫箱中培養(yǎng)10～12h,觀察噬菌斑數(shù)。

八、接種指示植物法

利用噴霧接種、針刺接種，汁液摩擦接種等適宜的方法接種到指示植物（寄主）。觀察指示植物接種后的病斑或幼葉的系統(tǒng)癥狀，判讀是否有病毒病。九、血清學(xué)檢驗

采用特制的抗血清，利用血清學(xué)反應(yīng)檢查細菌、病毒、類菌原體的一類方法。