標準解讀
GB/T 14926.56-2001 是一項中國國家標準,全稱為《實驗動物 狂犬病病毒檢測方法》。這項標準規(guī)定了對實驗動物進行狂犬病病毒檢測的具體操作規(guī)程、技術要求及判定標準,旨在確保實驗動物的質量控制和生物安全,預防狂犬病在實驗動物群體中的傳播,同時也為相關科研活動和疾病監(jiān)測提供科學依據(jù)。
標準內容概覽:
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范圍:明確了該標準適用于各種實驗動物(如鼠、兔、猴等)體內狂犬病病毒的檢測。
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規(guī)范性引用文件:列出了實施該標準時需要參考的其他相關國家標準或國際標準文獻。
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術語和定義:對標準中使用的專業(yè)術語進行了明確界定,包括狂犬病病毒、抗原、抗體等關鍵概念。
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檢測方法概述:介紹了標準推薦的幾種檢測技術,主要包括直接檢測病毒抗原的方法(如免疫熒光試驗IFT)、檢測病毒核酸的分子生物學方法(如PCR)以及血清學方法檢測特異性抗體等。
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樣本采集與處理:詳細說明了不同種類實驗動物樣本(如腦組織、血液)的采集部位、采集方法、保存條件及預處理步驟,以確保樣本質量滿足檢測要求。
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檢測步驟:
- 免疫熒光試驗(IFT):詳細步驟包括樣本固定、抗體標記、熒光顯微鏡觀察等,用于直接檢測樣本中的病毒抗原。
- PCR檢測:涵蓋核酸提取、引物設計、擴增條件設定及結果分析,用以檢測病毒核酸的存在。
- 血清學檢測:如酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)或快速免疫層析試驗,用于檢測動物血清中的狂犬病病毒抗體。
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結果判定:提供了每種檢測方法的具體陽性、陰性判定標準,確保檢測結果的準確性和可比性。
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質量控制:強調了實驗室應執(zhí)行的質量控制措施,包括使用陽性和陰性對照、定期校準儀器設備、操作人員培訓等,以保證檢測結果的可靠性。
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安全防護:提醒執(zhí)行檢測的操作人員應采取適當?shù)陌踩胧?,防止樣本處理過程中狂犬病病毒的感染風險。
實施意義:
該標準的實施有助于統(tǒng)一實驗動物狂犬病病毒檢測的技術流程和判定標準,提升檢測效率與準確性,為實驗動物管理和公共衛(wèi)生安全提供重要技術支撐。通過規(guī)范化的檢測手段,能有效監(jiān)控實驗動物群中狂犬病的流行情況,保障科學研究的順利進行及人類健康安全。
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文檔簡介
ICS65.020.30B44中華人民共和國國家標準GB/Tr14926.56—2001實驗動物狂犬病病毒檢測方法Laboratoryanimal-Methodforexaminationofrabiesvirus(RV)2001-08-29發(fā)布2002-05-01實施中華人民共和國發(fā)布國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局
GB/T14926.56-2001前本標準規(guī)定了狂犬病病毒的檢測方法。狂犬病病毒屬人獸共患病原。是普通級犬和SPF犬的必檢項目,因此增加該病毒的檢測方法。本標準由中華人民共和國科學技術部提出并歸口。本標準起草單位:中國實驗動物學會。本標準主要起草人:田克恭。
中華人民共和國國家標準實驗GB/T14926.56-2001狂犬病病毒檢測方法Laboratoryanimal-Methodforexaminationofrabicsvirus(RV)1范圍本標準規(guī)定了狂犬病病毒(RV)的檢測方法、試劑等本標準適用于犬RV的檢測。)引用標準下列標準所包含的條文.通過在本標準中引用而構成為本標準的條文。本標準出版時.所示版本均為有效。所有標準都會被修訂,使用本標準的各方應探討使用下列標準最新版本的可能性。GB/T14926.50—2001實驗動物酶聯(lián)免疫吸附試驗GB/T14926.54—2001實驗動物血凝抑制試驗原理根據(jù)免疫學原理.采用RV抗原檢測犬血清中RV抗體:或根據(jù)RV在一定的條件下,能凝集鵝紅細胞·這種凝集紅細胞的能力可被特異性抗體所抑制的原理,檢測犬血清中RV抗體、4主要試劑和器材4.1試劑4.1.1ELISA抗原4.1.1.1特異性抗原在生物安全柜內,用RV感染BHK21細胞,接種6d后,當病變達十十十~一十十十十時收獲。凍融三次或超聲波處理后,低速離心去除細胞碎片,上清液再經(jīng)超速離心濃縮后制成ELISA抗原。4.1.1.2正??乖瑽HK21細胞凍融破碎后·經(jīng)低速離心去除細胞碎片而獲得的上清液4.1.2血凝素RV接種BHK21細胞,培養(yǎng)4~5d.當病變達土十~+十土時收獲。。凍融三次或超聲波處理后,低速離心去除細胞碎片,上清液分裝后低溫保存。4.1.3陽性血清RRV弱毒株抗原免疫的犬血清。4.1.4陰性血清無RV感染、未經(jīng)免
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