ICS11.220B41中華人民共和國國家標準GB/T：19438.4--2004H9亞型禽流感病毒熒光RT-PCR檢測方法Methodofthereal-timeRT-PCRforthedetectionofavianinfluenzavirussubtypeH92004-02-14發(fā)布2004-02-15實施中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布中國國家標準化管理委員會

GB/T19438.4-2004前GB/T19438-2004《禽流感病毒熒光RT-PCR檢測方法》分為以下四個部分：GB/T19438.1-2004《禽流感病毒通用熒光RT-PCR檢測方法》：-GB/T19438.2—2004《H5亞型禽流感病毒熒光RT-PCR檢測方法》B/T19438.3—2004《H7亞型禽流感病毒熒光RT-PCR檢測方法》：-GB/T19438.4—2004《H9亞型禽流感病毒熒光RT-PCR檢測方法》本部分的附錄A是資料性附錄。本部分由中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局提出。本部分起草單位：中華人民共和國北京出入境檢驗檢疫局、深圳市匹基生物工程股份有限公司本部分主要起草人：張利峰、張鶴曉、劉繼紅、郭晉優(yōu)、劉艷華、楊偉。

GB/T19438.4—2004H9亞型禽流感病毒熒光RT-PCR檢測方法范圍本部分規(guī)定了熒光RT-PCR檢測H9亞型禽流感病毒的操作方法本部分適用于活禽及其產(chǎn)品中H9亞型禽流感病毒的檢測。規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本部分的引用而成為本部分的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單(不包括勒誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本部分然而，鼓勵根據(jù)本部分達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件.其最新版本適用于本部分。GB/T19438.1—2004禽流感病毒通用熒光RT-PCR檢測方法縮略語下列縮略語適用于本部分3.1熒光RT-PCR熒光反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)3.2Ct值每個反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號達到設(shè)定的閩值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)3.3RNA核糖核酸3.4DEPC焦碳酸乙二酯3.5PBS磷酸鹽緩沖鹽水3.6TaqDNA聚合酶。原理H9亞型禽流感病毒熒光RT-PCR檢測方法是采用TaqMan技術(shù)。設(shè)計一對僅在H9亞型禽流感病毒血凝素基因間保守的特異性引物和一條特異性的熒光雙標記探針。探針的5°端和3°端分別標記不同的熒光素，如5"端標記FAM熒光素，它發(fā)出的熒光能夠被檢測儀器接收，稱為報告熒光基團(用R表示),3'端一般標記TAMRA熒光素，它在近距離內(nèi)能吸收5°端報告熒光基團發(fā)出的熒光信號，稱