ICS07.100.30C53中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T：19915.5—2005豬鏈球菌2型多重PCR檢測(cè)方法ProtocolofmultiplexPCRidentificationofSirepiococcussuistype22005-09-27發(fā)布2005-11-01實(shí)施中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)豬鏈球菌2型多重PCR檢測(cè)方法GB/T19915.5—2005中中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行北京西城區(qū)復(fù)興門外三里河北街16號(hào)郵政編碼：100045電話：63787337、637874472005年12月第一版2005年12月電子版制作書(shū)號(hào)：155066·1-26804版權(quán)專有侵權(quán)必究舉報(bào)電話：（010)68533533

GB/T19915.5-2005前本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A為規(guī)范性附錄本標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)提出。本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)動(dòng)物防疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口本標(biāo)準(zhǔn)由中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院負(fù)責(zé)起草。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：韓雪清、林祥梅、吳紹強(qiáng)、劉建、賈廣樂(lè)、梅琳、陳國(guó)強(qiáng)、張敬友、姜淼、唐泰山。本標(biāo)準(zhǔn)為首次發(fā)和

GB/T19915.5—2005豬鏈球菌2型多重PCR檢測(cè)方法范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了豬鏈球菌2型多重PCR檢測(cè)的操作方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于檢測(cè)生豬執(zhí)子、增菌培養(yǎng)物、疑似病料及豬組織樣品(豬淋巴結(jié)、扁桃體、肉品等)中的褚源鏈球菌及豬鏈球菌2型。規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件,其隨后所有的修改單(不包括勒誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn),然而,鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB/T6682-1992分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法。3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)豬鏈球菌2型Srrepiococcussuistype2豬鏈球菌是屬于鏈球菌屬的一種細(xì)菌,根據(jù)其英膜多糖抗原的差異,可分為1～34及1/2共35個(gè)血清型。豬鏈球菌2型是豬鏈球菌的一個(gè)血清型,不僅對(duì)豬致病性很強(qiáng)，而且可以感染特定的人群,是一種重要的人畜共患病病原菌。3.2多重聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（多重PCR）multiplexpolymerasechainreaction多重PCR又稱多重引物PCR或復(fù)合PCR.它是在同一PCR反應(yīng)體系中加上兩對(duì)以上引物,同時(shí)擴(kuò)增出多個(gè)核酸片斷的PCR反應(yīng)。4縮略語(yǔ)本標(biāo)準(zhǔn)采用下列縮略語(yǔ)：PCR聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)DNA脫氧核糖核酸dTP脫氧核酸三磷酸bp堿培對(duì)試劑和材料除另有規(guī)定外.所用生化試劑均為分析純.水為符合GB/T6682—1992的滅菌雙蒸水或超純水.5.1豬鏈球菌2型多重PCR反應(yīng)混合物PCR緩沖液（含Mgt），2PL:dNTP.1.6L:引物1.0.6PL:引物2,0.6L；引物3.0.6L引物4.0.6L;菌液1.5L:酶0.2L;水12.3L；總體積20L。5.2TaqDNA聚合酶5.310×P