標(biāo)準(zhǔn)解讀
《GB/T 21768-2008 化學(xué)品 體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞DNA損傷與修復(fù)/非程序性DNA合成試驗(yàn)方法》是一項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),旨在提供一種評(píng)估化學(xué)品是否能夠引起哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)DNA損傷及隨后的修復(fù)過(guò)程的方法。該標(biāo)準(zhǔn)具體描述了通過(guò)檢測(cè)非程序性DNA合成(unscheduled DNA synthesis, UDS)來(lái)評(píng)價(jià)化學(xué)物質(zhì)潛在遺傳毒性作用的技術(shù)流程。
根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn),實(shí)驗(yàn)采用的是體外培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞作為測(cè)試系統(tǒng)。首先需要準(zhǔn)備適當(dāng)?shù)募?xì)胞株,并確保其處于良好的生長(zhǎng)狀態(tài)。接著,在受試物存在的情況下培養(yǎng)這些細(xì)胞一定時(shí)間后,加入放射性標(biāo)記的胸腺嘧啶核苷類似物如3H-thymidine或者BrdU等,讓它們被正在修復(fù)損傷DNA的細(xì)胞所吸收并整合入新合成的DNA鏈中。如果某種化學(xué)品導(dǎo)致了DNA損傷,則受損細(xì)胞會(huì)試圖通過(guò)增加UDS來(lái)進(jìn)行修復(fù)工作;此時(shí),通過(guò)測(cè)量細(xì)胞內(nèi)摻入的放射性標(biāo)記物量即可間接反映出UDS水平的變化情況。
此外,《GB/T 21768-2008》還詳細(xì)規(guī)定了實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所需的各種試劑、設(shè)備以及操作步驟,包括但不限于細(xì)胞接種密度、受試物濃度設(shè)置原則、孵育條件控制、樣品處理方式等關(guān)鍵參數(shù)。同時(shí)強(qiáng)調(diào)了質(zhì)量控制的重要性,要求設(shè)立陰性對(duì)照組和陽(yáng)性對(duì)照組以保證結(jié)果的有效性和可靠性。
對(duì)于數(shù)據(jù)解讀部分,標(biāo)準(zhǔn)建議使用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對(duì)不同組別間UDS活性差異進(jìn)行分析比較,從而判斷待測(cè)化學(xué)品是否具有誘導(dǎo)DNA損傷的能力及其程度如何。最后,基于所有獲得的信息綜合考量,可以對(duì)該化學(xué)品的安全性做出初步評(píng)價(jià)。
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- 廢止
- 已被廢除、停止使用,并不再更新
- 2008-05-12 頒布
- 2008-09-01 實(shí)施
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GB/T 21768-2008化學(xué)品體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞DNA損傷與修復(fù)/非程序性DNA合成試驗(yàn)方法-免費(fèi)下載試讀頁(yè)文檔簡(jiǎn)介
犐犆犛13.300;11.100
犃80
中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)
犌犅/犜21768—2008
化學(xué)品體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞犇犖犃損傷與
修復(fù)/非程序性犇犖犃合成試驗(yàn)方法
犆犺犲犿犻犮犪犾—犜犲狊狋犿犲狋犺狅犱狅犳犇犖犃犱犪犿犪犵犲犪狀犱狉犲狆犪犻狉/狌狀狊犮犺犲犱狌犾犲犱犇犖犃
狊狔狀狋犺犲狊犻狊狑犻狋犺犿犪犿犿犪犾犻犪狀犮犲犾犾狊犻狀狏犻狋狉狅
20080512發(fā)布20080901實(shí)施
中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局
發(fā)布
中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)
書(shū)
中華人民共和國(guó)
國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)
化學(xué)品體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞犇犖犃損傷與
修復(fù)/非程序性犇犖犃合成試驗(yàn)方法
GB/T21768—2008
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2008年7月第一版2008年7月第一次印刷
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書(shū)
犌犅/犜21768—2008
前言
本標(biāo)準(zhǔn)等同采用經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織(OECD)化學(xué)品測(cè)試指南No.482(1986年)《體外哺乳動(dòng)物細(xì)
胞DNA損傷與修復(fù)/非程序性DNA合成試驗(yàn)》(英文版)。
本標(biāo)準(zhǔn)作了下列編輯性修改:
———增加了范圍部分;
———計(jì)量單位改成我國(guó)法定計(jì)量單位;
———?jiǎng)h除OECD的參考文獻(xiàn)部分。
本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)危險(xiǎn)化學(xué)品管理標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)(SAC/TC251)提出并歸口。
本標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位:中國(guó)疾病預(yù)防控制中心職業(yè)衛(wèi)生與中毒控制所。
本標(biāo)準(zhǔn)參加起草單位:廣東出入境檢驗(yàn)檢疫局、天津市檢驗(yàn)檢疫科學(xué)技術(shù)研究院。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:劉清君、程樹(shù)軍、許崇輝、任軍、張園。
Ⅰ
書(shū)
犌犅/犜21768—2008
化學(xué)品體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞犇犖犃損傷與
修復(fù)/非程序性犇犖犃合成試驗(yàn)方法
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了化學(xué)品體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞DNA損傷與修復(fù)非程序性DNA合成試驗(yàn)的范圍、術(shù)語(yǔ)和
定義、試驗(yàn)基本原則、試驗(yàn)方法、試驗(yàn)數(shù)據(jù)和報(bào)告。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于檢測(cè)能誘發(fā)哺乳動(dòng)物細(xì)胞DNA損傷與修復(fù)的化學(xué)物質(zhì)。
2術(shù)語(yǔ)和定義
下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。
2.1
程序性犇犖犃合成狊犮犺犲犱狌犾犲犱犇犖犃狊狔狀狋犺犲狊犻狊
正常情況下,DNA合成僅在細(xì)胞有絲分裂周期的S期進(jìn)行,稱為程序性DNA合成。
2.2
非程序性犇犖犃合成狌狀狊犮犺犲犱狌犾犲犱犇犖犃狊狔狀狋犺犲狊犻狊(犝犇犛)
化學(xué)物質(zhì)或物理因素引起DNA損傷,切除和移除受損片段后進(jìn)行的DNA修復(fù)合成。
3試驗(yàn)基本原則
體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞非程序性DNA合成試驗(yàn)(UDS)描述了使用原代哺乳動(dòng)物細(xì)胞或連續(xù)細(xì)胞系檢
測(cè)DNA修復(fù)合成的操作方法。非程序性DNA合成的終點(diǎn)可以通過(guò)放射自顯影技術(shù)測(cè)定放射性標(biāo)記
的核苷,如氚標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷(3HTdR)的吸收量來(lái)進(jìn)行,也可或通過(guò)液體閃爍計(jì)數(shù)(LSC)法
進(jìn)行測(cè)定。UDS也可以采用體
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