標(biāo)準(zhǔn)解讀
《GB/T 28066-2011 丁香假單胞桿菌豌豆致病型檢疫鑒定方法》是一項國家標(biāo)準(zhǔn),規(guī)定了用于檢測和鑒定丁香假單胞桿菌(Pseudomonas syringae pv. pisi)的方法。該標(biāo)準(zhǔn)適用于植物檢疫實驗室對疑似感染該病原體的植物樣本進(jìn)行檢測與確認(rèn)。內(nèi)容涵蓋了從樣品采集、保存到具體實驗操作步驟以及結(jié)果分析等多個方面。
首先,在樣品處理上,標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)描述了如何正確采集受檢植物材料,并強調(diào)了采樣過程中需要注意避免交叉污染的重要性。此外,還提供了關(guān)于樣品運輸及保存條件的具體指導(dǎo),確保在到達(dá)實驗室前樣品的質(zhì)量不受影響。
其次,對于實驗室內(nèi)的檢測流程,標(biāo)準(zhǔn)介紹了多種可用于鑒定丁香假單胞桿菌豌豆致病型的技術(shù)手段,包括但不限于細(xì)菌培養(yǎng)特性觀察、生化測試、血清學(xué)反應(yīng)等傳統(tǒng)微生物學(xué)方法,同時也提到了基于PCR技術(shù)的分子生物學(xué)鑒定方法。每種方法都有其特定的操作規(guī)程和技術(shù)參數(shù)設(shè)定,旨在提高檢測準(zhǔn)確性的同時降低誤判率。
最后,標(biāo)準(zhǔn)還特別指出,在完成所有必要的實驗步驟后,應(yīng)根據(jù)所獲得的數(shù)據(jù)綜合判斷是否可以確診為丁香假單胞桿菌豌豆致病型感染。同時提醒使用者注意實驗環(huán)境的安全管理措施,防止病原體擴散造成不必要的風(fēng)險。
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....
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2011-12-30 頒布
- 2012-06-01 實施
文檔簡介
ICS6502001
B16..
中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)
GB/T28066—2011
丁香假單胞桿菌豌豆致病型
檢疫鑒定方法
DetectionandidentificationofPseudomonassyringae
v.pisiSackettYounetal.
p()g
2011-12-30發(fā)布2012-06-01實施
中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布
中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會
GB/T28066—2011
前言
本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草
GB/T1.1—2009。
本標(biāo)準(zhǔn)由全國植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出并歸口
(SAC/TC271)。
本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中華人民共和國廈門出入境檢驗檢疫局中華人民共和國上海出入境檢驗檢
:、
疫局
。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人林石明黃蓬英易建平陳青廖富榮吳媛陳紅運王宏毅
:、、、、、、、。
Ⅰ
GB/T28066—2011
丁香假單胞桿菌豌豆致病型
檢疫鑒定方法
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了丁香假單胞桿菌豌豆致病型生物學(xué)血清學(xué)及分子生物學(xué)的檢測鑒定方法
、。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于植物種子苗木等植物及其產(chǎn)品中丁香假單胞桿菌豌豆致病型的檢測和鑒定
、。
2丁香假單胞桿菌豌豆致病型基本信息
中文名丁香假單胞桿菌豌豆致病型
:。
中文別名豌豆細(xì)菌性枯萎病菌或豌豆細(xì)菌性葉斑病菌豌豆假單胞蔓枯病菌或莖枯病菌等
:()、。
學(xué)名Pseudomonassyringaepisi
:VanHall,1902pv.(Sackett,1916)Young,DyeandWilkie,1978。
病害英文名
:bactrialblightofpea。
異名BacteiumpisiChlorobacterpisi
:(Sackett)Smith,1920;(Sackett)Patel&Kulkarni,1951;
PseudomonaspisiPseudomonassyringaePytomonas
Sackett,1916;VanHall,1902;(Sackett)
Bergey,etal.,1923。
屬原核生物界變形細(xì)菌門變形細(xì)菌綱假單
Procaryotes,Proteobacteria,γ-Gammaproteobacteria,
胞桿菌目假單胞桿菌科假單胞桿菌屬Pseudomonas
Pseudomonadales,Pseudomonadaceae,。
丁香假單胞桿菌豌豆致病型的其他信息參見附錄
A。
3方法原理
依據(jù)病菌在培養(yǎng)基上生長的菌落形態(tài)碳源的利用情況基于抗原抗體反應(yīng)的雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸
、、
附測定基于體外擴增技術(shù)的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)以及病菌接種后的致病特征
(DAS-ELISA)、DNA(PCR),
等進(jìn)行檢測鑒定
。
4主要試劑
本標(biāo)準(zhǔn)的檢測鑒定方法主要使用以下試劑
:
硫酸鎂磷酸氫二鉀蔗糖甘油硼酸氯化鎂蛋白胨生理鹽水三氯甲烷異戊醇異丙醇
、、、、、、、、、、、Tris-
鹽酸十二烷基硫酸鈉十六烷基三甲基溴化胺溴化乙錠頭孢氨芐萬古霉素
、EDTA、SDS()、CTAB()、、、、
頭孢呋辛酸溴酚藍(lán)放線菌酮或制霉菌素和相關(guān)試劑
、、()PCR。
5主要儀器
本標(biāo)準(zhǔn)的檢測鑒定方法主要使用以下儀器
:
超凈工作臺高壓滅菌鍋顯微鏡培養(yǎng)箱電子天平離心機儀電泳儀凝膠成像系統(tǒng)
、
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