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文檔簡介

實驗三組織分離法組織分離法（離析法）組織分離法：是利用物理（機械）的方法或化學(xué)的方法（如藥品或者酶的作用）把生物細(xì)胞間的胞間層溶解，使生物組織間的細(xì)胞分離開來，從而得到單個完整細(xì)胞，以便在顯微鏡下觀察細(xì)胞的立體形態(tài)結(jié)構(gòu)。缺點：由于組織的細(xì)胞間彼此分離，細(xì)胞間的關(guān)系無法顯示，也就不可能了解整個組織的結(jié)構(gòu)。一、實驗?zāi)康膶W(xué)習(xí)物理（機械）分離制片方法；學(xué)習(xí)化學(xué)分離制片方法。二、實驗材料及用品實驗材料：葉片（新鮮和固定）、南瓜莖。實驗用具：載、蓋玻片；顯微鏡；鑷子；離心機等。實驗藥品：蒸餾水、梯度酒精、?二甲苯+?純酒精，Naocl，?10%鉻酸+?10%硝酸離析液，二甲苯，I-KI染液，1%番紅水溶液，1%番紅酒精溶液、加拿大樹膠。三、實驗步驟（一）——表皮制片步驟臨時裝片法選材

撕取下表皮

染色

封固

鏡檢

新鮮材料，靠近中脈部分1（I-KI染色2min）加蓋玻片置載玻片，加一滴水，充分展開三、實驗步驟（一）——表皮制片步驟永久制片法選材固定（FAA固定液，24h）清洗Naocl撕取下表皮染色（1%番紅水溶液30min-1.5h）水洗（洗去浮色，一次即可）

（I-KI染色）分色（用鹽酸水）水洗（洗去酸液）粘片、烘片脫水（50%，70%，80%，95%，100%，?二甲苯+?100%酒精，各2min）透明（二甲苯）封固鏡檢

靠近中脈部分染色期間觀察如染色液干涸，再滴加載玻片上滴一滴蛋白黏貼劑，期間加入一滴水，移入葉表皮，水分吸干后放入烘箱烘干2345放入30-40度溫箱，周邊泛白三、實驗步驟（二）——離析制片步驟取材加熱離析（10%鉻酸：10%硝酸=1:1離析液）水洗染色（1%番紅的50%酒精溶液4-24h或更長）水洗（7%AL，1-2次）脫水（50%，70%，85%，95%AL各5min，100%AL，兩次，每次5min）透明（?二甲苯+?100%酒精，二甲苯各5min）封藏將莖切成1cm長，撕成細(xì)絲狀離析液為材料的20倍，30-40℃的溫箱中24-48h水洗數(shù)次，在離心管中進(jìn)行四、實驗結(jié)果表皮制片：表皮細(xì)胞的形態(tài)？氣孔器的類型？離析制片：南瓜莖的導(dǎo)管及木纖維形態(tài)？氣孔器

氣孔器類型無規(guī)則型不等型平列型橫列型離析法楊莖的木纖維和導(dǎo)管分子五、作業(yè)實驗完畢

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