標準解讀
《GB/T 4789.39-2008 食品衛(wèi)生微生物學檢驗 糞大腸菌群計數(shù)》是一項國家標準,規(guī)定了食品中糞大腸菌群的檢測方法。該標準適用于各類食品中糞大腸菌群數(shù)量的測定。
根據(jù)此標準,首先需要制備待測樣品溶液,通常通過稱取一定量的樣品并加入無菌生理鹽水或其他適宜稀釋液來完成。接著對樣品進行適當比例的系列稀釋,以便后續(xù)操作能夠在合適的濃度范圍內(nèi)進行。
培養(yǎng)基的選擇對于實驗的成功至關(guān)重要,《GB/T 4789.39-2008》推薦使用EC肉湯作為增菌培養(yǎng)基,并指定了具體的成分與配比。將不同稀釋度的樣品接種到EC肉湯中后,在特定條件下(如溫度、時間)下孵育。
經(jīng)過初步培養(yǎng)后,需從每個試管中取出部分液體轉(zhuǎn)接到確認試驗所用的培養(yǎng)基上,這里使用的是乳糖發(fā)酵管。如果觀察到產(chǎn)氣現(xiàn)象,則表明存在能夠發(fā)酵乳糖產(chǎn)生氣體的大腸桿菌或類似細菌,這一步驟有助于進一步篩選出疑似陽性樣本。
最后,通過對陽性結(jié)果的數(shù)量以及對應(yīng)的稀釋倍數(shù)進行統(tǒng)計分析,可以計算出每克或毫升原始樣品中的糞大腸菌群最可能數(shù)(MPN)。這種方法基于概率論原理,提供了一個估計值而非確切數(shù)值,但足以反映樣品受污染程度。
整個過程中需要注意實驗室安全和個人防護措施,確保所有操作符合生物安全要求。此外,為了保證檢測結(jié)果準確可靠,還需定期校準儀器設(shè)備、嚴格控制環(huán)境條件并對實驗人員進行專業(yè)培訓。
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- 被代替
- 已被新標準代替
- 2008-11-21 頒布
- 2009-03-01 實施
文檔簡介
犐犆犛07.100.30
犆53
中華人民共和國國家標準
犌犅/犜4789.39—2008
食品衛(wèi)生微生物學檢驗
糞大腸菌群計數(shù)
犕犻犮狉狅犫犻狅犾狅犵犻犮犪犾犲狓犪犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犳狅狅犱犺狔犵犻犲狀犲—
犈狀狌犿犲狉犪狋犻狅狀狅犳犳犪犲犮犪犾犮狅犾犻犳狅狉犿狊
20081121發(fā)布20090301實施
中華人民共和國衛(wèi)生部
發(fā)布
中國國家標準化管理委員會
書
犌犅/犜4789.39—2008
前言
本標準修改采用了美國食品藥品管理局(FDA)《細菌學分析手冊》第4章大腸桿菌和大腸菌群計
數(shù)(2002年)(BacteriologicalAnalyticalManual,Chapter4:Enumerationof犈狊犮犺犲狉犻犮犺犻犪犮狅犾犻andtheco
liformbacteria,2002)。
本標準與FDA方法的主要差別是:
———將樣品制備時取樣量50g(或50mL)修改為25g(或25mL);
———將LST培養(yǎng)溫度35℃±1℃修改為36℃±1℃;
———將EC培養(yǎng)溫度45.5℃±0.2℃(一般食品)和44.5℃±0.2℃(貝類)統(tǒng)一為44.5℃±0.2℃。
本標準的附錄A和附錄B為規(guī)范性附錄。
本標準由中華人民共和國衛(wèi)生部提出并歸口。
本標準由中華人民共和國衛(wèi)生部負責解釋。
本標準負責起草單位:中國疾病預防控制中心營養(yǎng)與食品安全所。
本標準參與起草單位:江蘇省疾病預防控制中心、中華人民共和國內(nèi)蒙古出入境檢驗檢疫局、中華
人民共和國遼寧出入境檢驗檢疫局、上海市疾病預防控制中心。
本標準主要起草人:劉秀梅、袁寶君、劉中學、盧行安、劉弘、陳敏、田靜。
Ⅰ
書
犌犅/犜4789.39—2008
食品衛(wèi)生微生物學檢驗
糞大腸菌群計數(shù)
1范圍
本標準規(guī)定了食品中糞大腸菌群計數(shù)的方法。
本標準適用于各類食品中糞大腸菌群的計數(shù)。
2術(shù)語和定義
下列術(shù)語和定義適用于本標準。
2.1
糞大腸菌群犳犪犲犮犪犾犮狅犾犻犳狅狉犿
一群在44.5℃培養(yǎng)24h~48h能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無芽胞桿菌。
該菌群來自人和溫血動物糞便,作為糞便污染指標評價食品的衛(wèi)生狀況,推斷食品中腸道致病菌污染的
可能性。
3設(shè)備和材料
除微生物實驗室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設(shè)備外,其他設(shè)備和材料如下:
3.1恒溫培養(yǎng)箱:36℃±1℃。
3.2冰箱:2℃~5℃。
3.3恒溫水浴箱:44.5℃±0.2℃。
3.4天平:感量0.1g。
3.5均質(zhì)器。
3.6振蕩器。
3.7無菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸頭。
3.8無菌錐形瓶:容量500mL。
3.9無菌培養(yǎng)皿:直徑90mm。
3.10pH計或pH比色管或精密pH試紙。
4培養(yǎng)基及試劑
4.1月桂基硫酸鹽胰蛋白胨(laurylsulfatetryptose,LST)肉湯:見第A.1章。
4.2EC肉湯(犈.犮狅犾犻broth):見第A.2章。
4.3無菌生理鹽水:稱?。福担缏然c溶于1000mL蒸餾水中,121℃高壓滅菌15min。
4.41mol/L氫氧化
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