標(biāo)準(zhǔn)解讀
《GB/T 4789.39-2008 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 糞大腸菌群計(jì)數(shù)》是一項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),規(guī)定了食品中糞大腸菌群的檢測(cè)方法。該標(biāo)準(zhǔn)適用于各類(lèi)食品中糞大腸菌群數(shù)量的測(cè)定。
根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn),首先需要制備待測(cè)樣品溶液,通常通過(guò)稱(chēng)取一定量的樣品并加入無(wú)菌生理鹽水或其他適宜稀釋液來(lái)完成。接著對(duì)樣品進(jìn)行適當(dāng)比例的系列稀釋?zhuān)员愫罄m(xù)操作能夠在合適的濃度范圍內(nèi)進(jìn)行。
培養(yǎng)基的選擇對(duì)于實(shí)驗(yàn)的成功至關(guān)重要,《GB/T 4789.39-2008》推薦使用EC肉湯作為增菌培養(yǎng)基,并指定了具體的成分與配比。將不同稀釋度的樣品接種到EC肉湯中后,在特定條件下(如溫度、時(shí)間)下孵育。
經(jīng)過(guò)初步培養(yǎng)后,需從每個(gè)試管中取出部分液體轉(zhuǎn)接到確認(rèn)試驗(yàn)所用的培養(yǎng)基上,這里使用的是乳糖發(fā)酵管。如果觀(guān)察到產(chǎn)氣現(xiàn)象,則表明存在能夠發(fā)酵乳糖產(chǎn)生氣體的大腸桿菌或類(lèi)似細(xì)菌,這一步驟有助于進(jìn)一步篩選出疑似陽(yáng)性樣本。
最后,通過(guò)對(duì)陽(yáng)性結(jié)果的數(shù)量以及對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,可以計(jì)算出每克或毫升原始樣品中的糞大腸菌群最可能數(shù)(MPN)。這種方法基于概率論原理,提供了一個(gè)估計(jì)值而非確切數(shù)值,但足以反映樣品受污染程度。
整個(gè)過(guò)程中需要注意實(shí)驗(yàn)室安全和個(gè)人防護(hù)措施,確保所有操作符合生物安全要求。此外,為了保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠,還需定期校準(zhǔn)儀器設(shè)備、嚴(yán)格控制環(huán)境條件并對(duì)實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行專(zhuān)業(yè)培訓(xùn)。
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- 被代替
- 已被新標(biāo)準(zhǔn)代替
- 2008-11-21 頒布
- 2009-03-01 實(shí)施
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GB/T 4789.39-2008食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)糞大腸菌群計(jì)數(shù)-免費(fèi)下載試讀頁(yè)文檔簡(jiǎn)介
犐犆犛07.100.30
犆53
中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)
犌犅/犜4789.39—2008
食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)
糞大腸菌群計(jì)數(shù)
犕犻犮狉狅犫犻狅犾狅犵犻犮犪犾犲狓犪犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犳狅狅犱犺狔犵犻犲狀犲—
犈狀狌犿犲狉犪狋犻狅狀狅犳犳犪犲犮犪犾犮狅犾犻犳狅狉犿狊
20081121發(fā)布20090301實(shí)施
中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部
發(fā)布
中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)
書(shū)
犌犅/犜4789.39—2008
前言
本標(biāo)準(zhǔn)修改采用了美國(guó)食品藥品管理局(FDA)《細(xì)菌學(xué)分析手冊(cè)》第4章大腸桿菌和大腸菌群計(jì)
數(shù)(2002年)(BacteriologicalAnalyticalManual,Chapter4:Enumerationof犈狊犮犺犲狉犻犮犺犻犪犮狅犾犻andtheco
liformbacteria,2002)。
本標(biāo)準(zhǔn)與FDA方法的主要差別是:
———將樣品制備時(shí)取樣量50g(或50mL)修改為25g(或25mL);
———將LST培養(yǎng)溫度35℃±1℃修改為36℃±1℃;
———將EC培養(yǎng)溫度45.5℃±0.2℃(一般食品)和44.5℃±0.2℃(貝類(lèi))統(tǒng)一為44.5℃±0.2℃。
本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A和附錄B為規(guī)范性附錄。
本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部提出并歸口。
本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部負(fù)責(zé)解釋。
本標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位:中國(guó)疾病預(yù)防控制中心營(yíng)養(yǎng)與食品安全所。
本標(biāo)準(zhǔn)參與起草單位:江蘇省疾病預(yù)防控制中心、中華人民共和國(guó)內(nèi)蒙古出入境檢驗(yàn)檢疫局、中華
人民共和國(guó)遼寧出入境檢驗(yàn)檢疫局、上海市疾病預(yù)防控制中心。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:劉秀梅、袁寶君、劉中學(xué)、盧行安、劉弘、陳敏、田靜。
Ⅰ
書(shū)
犌犅/犜4789.39—2008
食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)
糞大腸菌群計(jì)數(shù)
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中糞大腸菌群計(jì)數(shù)的方法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于各類(lèi)食品中糞大腸菌群的計(jì)數(shù)。
2術(shù)語(yǔ)和定義
下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。
2.1
糞大腸菌群犳犪犲犮犪犾犮狅犾犻犳狅狉犿
一群在44.5℃培養(yǎng)24h~48h能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無(wú)芽胞桿菌。
該菌群來(lái)自人和溫血?jiǎng)游锛S便,作為糞便污染指標(biāo)評(píng)價(jià)食品的衛(wèi)生狀況,推斷食品中腸道致病菌污染的
可能性。
3設(shè)備和材料
除微生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設(shè)備外,其他設(shè)備和材料如下:
3.1恒溫培養(yǎng)箱:36℃±1℃。
3.2冰箱:2℃~5℃。
3.3恒溫水浴箱:44.5℃±0.2℃。
3.4天平:感量0.1g。
3.5均質(zhì)器。
3.6振蕩器。
3.7無(wú)菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸頭。
3.8無(wú)菌錐形瓶:容量500mL。
3.9無(wú)菌培養(yǎng)皿:直徑90mm。
3.10pH計(jì)或pH比色管或精密pH試紙。
4培養(yǎng)基及試劑
4.1月桂基硫酸鹽胰蛋白胨(laurylsulfatetryptose,LST)肉湯:見(jiàn)第A.1章。
4.2EC肉湯(犈.犮狅犾犻broth):見(jiàn)第A.2章。
4.3無(wú)菌生理鹽水:稱(chēng)?。福担缏然c溶于1000mL蒸餾水中,121℃高壓滅菌15min。
4.41mol/L氫氧化
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