病原體核酸質(zhì)控物的使用

及注意事項張瑞衛(wèi)生部臨床檢驗中心病原體核酸質(zhì)控物HBVDNA液體質(zhì)控物（單位：IU/ml)

編號靶值（對數(shù)值）范圍HBVDNAS15.42×106(6.73)1.70×106～1.70×107(6.23～7.23)HBVDNAS23.19×106(6.50)1.00×106～1.00×107(6.00～7.00)HBVDNAS39.42×105(5.97)2.95×105～2.95×106(5.47～6.47)HBVDNAS42.60×105(5.41)8.13×104～8.13×105(4.19～5.91)HBVDNAS57.66×104(4.88)2.40×104～2.40×105(4.38～5.38)該質(zhì)控品為液體血清，每支500l，使用時室溫放置15分鐘使其充分復融，顛倒或漩渦振蕩并瞬時離心后使用。HCVRNA凍干質(zhì)控物（單位：IU/ml)

病原體核酸質(zhì)控物編號靶值（對數(shù)值）范圍07111.32×106(6.12)4.17×105～1.70×106(5.62～6.62)07121.05×106(6.02)3.31×105～3.31×106(5.52～6.52)07135.76×105(5.76)1.82×105～1.82×106(5.26～6.26)07156.61×103(3.82)2.09×103～2.09×104(3.32～4.32)07168.72×104(4.94)2.75×104～2.75×105(4.44～5.44)該質(zhì)控品為凍干血清，每支300l，使用時用DEPC水復溶，室溫放置5分鐘，漩渦振蕩使之充分溶解并混勻，瞬時離心后使用。病原體核酸質(zhì)控物關于定量單位IU/ml和拷貝數(shù)/ml的換算請根據(jù)不同試劑的檢測結(jié)果與該質(zhì)控品的定值進行比對得出，不同試劑的換算系數(shù)會有所不同。IU/ml拷貝數(shù)/mlWHO各不同試劑廠家病毒個數(shù)“檢出單位”（detectableunit）假設：PCR反應體系內(nèi)含有1拷貝的待測分子即可檢出拷貝數(shù)/ml的確定：DNA/RNA參考品（質(zhì)粒等）測量OD260的值得到mg/ml通過與分子量的計算，得到拷貝數(shù)/ml不同實驗室得到的結(jié)果差別很大。HCV國際單位與拷貝數(shù)換算NGISuperQuant:

1IU/mL=3.4copies/ml(NGIProductLicenseApplicationtoFDA)RocheAmplicorMonitorv2.0

1IU/mL=0.9copies/ml

(RocheMolecularSystems)Cobas

AmplicorMonitorHCVv2.0

1IU/mL=2.7copies/ml(RocheMolecularSystems)LCxHCVRNAQuantitativeAssay

1IU/mL=3.8copies/ml

(AbbottDiagnostics)BayerbDNA3.0:

1IU/mL=5.2copies/ml

(BayerDevelopmentGroup)

未知HCVRNA樣本甲實驗室5000拷貝/ml乙實驗室10000拷貝/ml丙實驗室50000拷貝/ml丁實驗室20000拷貝/ml實驗室結(jié)果的互通性20000IU/mlHCVRNA樣本甲實驗室40000拷貝/ml1IU/ml＝2拷貝/ml

乙實驗室10000拷貝/ml1IU/ml＝0.5拷貝/ml丙實驗室50000拷貝/ml1IU/ml＝2.5拷貝/ml丁實驗室20000拷貝/ml1IU/ml＝1拷貝/ml實驗室結(jié)果的互通性國家標準物質(zhì)在國際上，發(fā)達國家的試劑廠家均采用可溯源到國際標準的標準系列來進行定量檢測，而我國的試劑生產(chǎn)廠家標準來源、定量單位均不統(tǒng)一，造成檢測結(jié)果存在10倍乃至100倍的差異。衛(wèi)生部臨床檢驗中心參考世界衛(wèi)生組織（WHO）相關項目標準物質(zhì)的研制方法，研制了HBVDNA和HCVRNA標準物質(zhì)。

(1）將該標準物質(zhì)用于各試劑廠家定標；（2）依據(jù)該標準品制備標準系列血清用作廠家試劑的工作標準；（3）向全國提供可溯源到該標準物質(zhì)的室內(nèi)質(zhì)控品。

IU（internationalunits)的確定：22家實驗室實驗1實驗2實驗3實驗4間隔1周7次10倍稀釋8次101/2倍稀釋(終點濃度附近）“終點”ReportontheevaluationofacandidatestandardforNATassaysforHCVRNA。WHOBS/97.18611:3.161:101:31.61:1001:3161:10001:3160HCVRNA

終點稀釋:1:100001＋＋＋＋＋＋－－2＋＋－＋＋＋－－3＋＋＋＋＋＋－－4＋＋＋＋＋＋－－5＋＋＋＋＋－－－6＋＋＋＋＋－－－7＋＋＋＋－－－－8＋＋＋＋＋＋－－9＋＋＋＋＋＋－－10＋＋＋＋＋＋－－11＋＋＋＋＋＋－－Poisson分布：63％的實驗室檢測結(jié)果為陽性的稀釋倍數(shù)定為“終點”，即1IU/ml。IU（internationalunits)的確定：核酸質(zhì)控物的定值實驗室數(shù)方法均值3AmplicorMonitor3bDNA2In-house1NASBA6改良的Amplicor（定性）9單一PCR（定性）6巢式PCR（定性）統(tǒng)計學計算得出均值定值的標準品核酸質(zhì)控物該質(zhì)控品是具有生物活性的樣品并具有傳染性，請使用務必按傳