ICS65020

B65.

中華人民共和國林業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

LY/T2350—2014

松褐天牛攜帶松材線蟲的PCR檢測

技術(shù)規(guī)范

TechnicalregulationfordetectingBursaphelenchusxylophilusfrom

PinesawerMonochamusalternatusHoebPCRamlification

y(p)yp

2014-08-21發(fā)布2014-12-01實(shí)施

國家林業(yè)局發(fā)布

LY/T2350—2014

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國林業(yè)有害生物防治標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口

(SAC/TC522)。

本標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位華南農(nóng)業(yè)大學(xué)

:。

本標(biāo)準(zhǔn)參加起草單位國家林業(yè)局森林病蟲害防治總站江西省贛州市林業(yè)有害生物防治檢疫局

:、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人王新榮孫思朱孝偉王永孔祥超宋玉雙黃敬怡任路路馬偉杰陳晨賴福勝

:、、、、、、、、、、。

Ⅰ

LY/T2350—2014

松褐天牛攜帶松材線蟲的PCR檢測

技術(shù)規(guī)范

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了松褐天牛Monochamusalternatus成蟲攜帶松材線蟲Bursaphelenchus

(Hope)[

xylophilus檢測技術(shù)的一般原則和技術(shù)要求

(SteineretBuhrer)Nickle]PCR。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于利用技術(shù)定性檢測攜帶松材線蟲的松褐天牛

PCR。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682—2008

動(dòng)物源性飼料中馬驢源性成分定性檢測方法方法

GB/T21107—2007、PCR

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

。

31

.

松褐天牛MonochamusalternatusHope

又名松墨天牛屬昆蟲綱鞘翅目天?？颇炫?/p>

,(Insecta),(Coleoptera),(Cerambycidae),

Monochamus是松樹的一種重要蛀干害蟲又是松材線蟲的主要傳播媒介松褐天牛成蟲中后胸?cái)y

(),,。

帶較多松材線蟲松褐天牛成蟲形態(tài)圖和脫翅松褐天牛成蟲中后胸示意圖參見附錄

。A。

32

.

松材線蟲Bursaphelenchusxylophilus

松材線蟲隸屬于線蟲綱滑刃目滑刃亞目滑刃總科

(Nematoda),(Aphelenchida),(Aphelenchina),

滑刃科傘滑刃亞科傘滑刃屬

(Aphelenchoidoidea),(Parasitaphelenchidae),(Bursaphelenchinae),

Bursahelenchus是引起松樹枯萎死亡的直接原因也是本標(biāo)準(zhǔn)所要檢測的目標(biāo)

(p),,。

33

.

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)polymerasechainreactionPCR

;

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)是體外酶促合成特異片段的一種方法由高溫變性低溫退火及適溫延伸

,DNA,、

等幾步反應(yīng)組成一個(gè)周期循環(huán)進(jìn)行使目的得以迅速擴(kuò)增具有特異性強(qiáng)靈敏度高操作簡便

,,DNA,、、

和省時(shí)等特點(diǎn)參見中的規(guī)定

。GB/T21107—20073.1。

34

.

引物primer

一段短核苷酸序列其功能是作為核苷酸聚合作用的起始點(diǎn)在聚合反應(yīng)時(shí)刺激合成一條與模板

。,,

互補(bǔ)的的序列

DNA。

35

.

內(nèi)部轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)internaltranscribedspacer