第2課時(shí)分離以尿素為氮源的微生物(時(shí)間：30分鐘滿分：50分)一、選擇題(共8小題，每小題2分，共16分)1．土壤中分解尿素的微生物所需氮源為()A．硝酸B．氨C．尿素D．蛋白胨解析只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素為氮源，缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源使其生長(zhǎng)、發(fā)育及繁殖受到抑制，所以，能夠選擇出分解尿素的微生物。答案C2．土壤中的細(xì)菌能分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡芎铣梢环N()A．尿素酶B．脲酶C．蛋白酶D．肽酶解析能夠分解利用尿素的細(xì)菌，其細(xì)胞內(nèi)含有脲酶，可以把尿素分解成氨，然后進(jìn)一步利用。答案B3．產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)菌落的細(xì)菌的最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是()A．一個(gè)細(xì)菌、液體培養(yǎng)基 B．許多細(xì)菌、液體培養(yǎng)基C．一個(gè)細(xì)菌、固體培養(yǎng)基 D．許多細(xì)菌、固體培養(yǎng)基解析在液體培養(yǎng)基中生活的細(xì)菌，無(wú)論是一個(gè)還是許多，肉眼都是看不見的。在固體培養(yǎng)基上的細(xì)菌，當(dāng)數(shù)目較少時(shí)也是看不見的。當(dāng)固體培養(yǎng)基上有許多細(xì)菌并且集中在較小范圍內(nèi)時(shí)，肉眼可見。而菌落是一個(gè)細(xì)菌或幾個(gè)細(xì)菌的子細(xì)胞群體，形成于固體培養(yǎng)基上，有一定的形態(tài)結(jié)構(gòu)，所以肉眼可見。同種細(xì)菌形成的菌落，形態(tài)結(jié)構(gòu)是相同的。如果有許多細(xì)菌形成的菌落，就不可能有比較標(biāo)準(zhǔn)的形態(tài)，因?yàn)檫@許多細(xì)菌第一不可能是同一種細(xì)菌，第二不可能在培養(yǎng)基的同一個(gè)點(diǎn)上。答案C4．在分離土壤中的分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)中，關(guān)于土壤取樣的敘述錯(cuò)誤的是()A．土壤取樣，應(yīng)選取肥沃、濕潤(rùn)的土壤B．先鏟去表層土3cm左右，再取樣C．取樣用的小鐵鏟和信封在使用前不用滅菌D．應(yīng)在火焰旁稱取土壤解析在土壤中的分解尿素的細(xì)菌分離、計(jì)數(shù)中，必須在含微生物豐富的濕潤(rùn)、肥沃土壤中取樣，所用小鏟和信封必須滅菌，應(yīng)取表層土3cm以下的樣土，在裝信封和稀釋以及稱量時(shí)必須在酒精燈火焰旁進(jìn)行。答案C5．平板冷凝后，要將平板倒置，其原因是()A．接種時(shí)再拿起來(lái)方便B．在皿底上標(biāo)記日期等方便C．正著放置容易破碎D．防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染解析平板倒置主要是防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。答案D6．在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑的目的是()A．篩選出能分解尿素的細(xì)菌B．對(duì)分離的菌種作進(jìn)一步鑒定C．作細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)成分D．如指示劑變藍(lán)就能準(zhǔn)確地認(rèn)定該菌能分解尿素解析篩選出能分解尿素的細(xì)菌用選擇培養(yǎng)基即可，不需要加指示劑。加入指示劑的培養(yǎng)基，目的都是對(duì)要分離的菌種作進(jìn)一步的鑒定。答案B7．想要把土壤中分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行分離與計(jì)數(shù)，下列操作需要在火焰旁進(jìn)行的是()①土壤取樣②稱取土壤③稀釋土壤溶液④涂布平板⑤微生物的培養(yǎng)A．①②③④⑤ B．②③④⑤C．③④⑤ D．②③④解析對(duì)分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行分離與計(jì)數(shù)時(shí)，注意在火焰旁稱取土壤，稀釋土壤溶液和接種也都在火焰旁進(jìn)行。答案D8．在培養(yǎng)基中加入尿素(唯一氮源)，以分離出能分解尿素的細(xì)菌，這種加入尿素的培養(yǎng)基在功能上屬于()A．選擇培養(yǎng)基 B．固體培養(yǎng)基C．液體培養(yǎng)基 D．半固體培養(yǎng)基答案A二、非選擇題(共4小題，共34分)9．(6分)下表為本實(shí)驗(yàn)中尿素固體培養(yǎng)基的配方，請(qǐng)分析回答下面的問(wèn)題。成分含量葡萄糖0.025gNaCl0.12gK2HPO40.12g酚紅mg尿素2g水25mL瓊脂糖0.5g(1)在該培養(yǎng)基的配方中，為微生物提供碳源和氮源的分別是________________________________________________________________。(2)按物理性質(zhì)劃分，該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基，理由是培養(yǎng)基中含有________；按功能劃分，該培養(yǎng)基為________培養(yǎng)基和________培養(yǎng)基。(3)該培養(yǎng)基上分離出的細(xì)菌一定都是以尿素為氮源的細(xì)菌嗎？若不是，如何從中確定以尿素為氮源的細(xì)菌？______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。答案(1)葡萄糖、尿素(2)固體瓊脂糖選擇鑒別(3)不一定都是以尿素為氮源的細(xì)菌，也有可能含有固氮細(xì)菌。因?yàn)槟蛩胤纸饩軌驅(qū)⑴囵B(yǎng)基中的尿素分解為氨，造成周圍的培養(yǎng)基呈堿性而使酚紅指示劑變紅，所以菌落周圍有紅色環(huán)帶的為尿素分解菌10．(9分)幽門螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后，進(jìn)行分離培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)基本步驟如下：eq\x(配制培養(yǎng)基)→eq\x(滅菌、倒平板)→eq\x(X)→eq\x(培養(yǎng))→eq\x(觀察)請(qǐng)回答：(1)在配制培養(yǎng)基時(shí)，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因?yàn)镠p含有________，它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落周圍會(huì)出現(xiàn)________色環(huán)帶。(2)下列對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌的最適方法是________滅菌。A．高壓蒸汽 B．紫外燈照射C．70%酒精浸泡 D．過(guò)濾(3)步驟X表示________。在無(wú)菌條件下操作時(shí)，先將菌液稀釋，然后將菌液________到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得________菌落。(4)在培養(yǎng)時(shí)，需將培養(yǎng)皿倒置并放在________中。若不倒置培養(yǎng)，將導(dǎo)致________。(5)臨床上用14C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)人體是否感染Hp，其基本原理是Hp能將14C標(biāo)記的________分解為NH3和14CO解析(1)脲酶能特異性地催化尿素水解釋放出NH3和CO2。所以加入尿素作為氮源，加入酚紅指示劑(高pH時(shí)呈現(xiàn)紅色)能指示以尿素為氮源的細(xì)菌的存在。(2)由于尿素在高溫下會(huì)分解，因此對(duì)尿素溶液的滅菌要采用玻璃漏斗過(guò)濾的方法。(3)本題運(yùn)用的是涂布分離法，該方法能更容易獲得單菌落，但操作較復(fù)雜。(4)在倒平板和培養(yǎng)過(guò)程中，會(huì)產(chǎn)生水蒸氣，如果正置，那么水蒸氣在皿蓋上凝結(jié)成水珠后滴在培養(yǎng)基上，會(huì)污染細(xì)菌，導(dǎo)致不能分離出單菌落。(5)該題中Hp含有脲酶，能把尿素分解成NH3和CO2?；颊咄ㄟ^(guò)服用被14C標(biāo)記的尿素并檢測(cè)呼氣中的被14C標(biāo)記的CO答案(1)脲酶紅(2)D(3)接種涂布單(4)恒溫培養(yǎng)箱無(wú)法形成單菌落(5)尿素11．(10分)富集培養(yǎng)是微生物學(xué)中最強(qiáng)有力的技術(shù)手段之一，主要是指利用不同微生物間生命活動(dòng)的特點(diǎn)不同，僅適應(yīng)該條件的微生物生長(zhǎng)旺盛，從而使其在群落中的數(shù)量大大增加，人們能夠更容易地從自然界中分離得到所需的特定微生物。富集條件可根據(jù)所需分離的微生物的特點(diǎn)，從物理、化學(xué)、生物等綜合多個(gè)方面進(jìn)行選擇，如溫度、pH、紫外線、高壓、光照、氧氣、營(yíng)養(yǎng)等許多方面。如圖描述了采用富集方法從土壤中分離能降解酚類化合物對(duì)羥基苯甲酸的微生物的實(shí)驗(yàn)過(guò)程。請(qǐng)分析回答下面的問(wèn)題。(1)本實(shí)驗(yàn)所需要的培養(yǎng)基為________，碳源為________________________________________________________________。(2)實(shí)驗(yàn)原理是____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)①→③重復(fù)培養(yǎng)的目的是________________________________________________________________。(4)⑤的菌落中大部分是降解____________________的微生物。(5)⑥為________組，⑦為________組，設(shè)置⑥的目的是_________________________________________________________________。(6)⑤→⑥采用________________________法，接種到⑥的培養(yǎng)基中，在操作過(guò)程中為防止污染應(yīng)注意的事項(xiàng)是____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析本題考查了微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。先用含有對(duì)羥基苯甲酸為唯一碳源的液體培養(yǎng)基，經(jīng)過(guò)富集培養(yǎng)之后，將其涂布到固體平板培養(yǎng)基中分離培養(yǎng)，然后將單菌落接種到液體培養(yǎng)基中，才能得到純度較高的微生物。答案(1)選擇培養(yǎng)基對(duì)羥基苯甲酸(2)利用以對(duì)羥基苯甲酸為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，經(jīng)富集培養(yǎng)，選擇出能降解酚類化合物對(duì)羥基苯甲酸的微生物(3)增大分解對(duì)羥基苯甲酸微生物的比例(4)對(duì)羥基苯甲酸(5)對(duì)照實(shí)驗(yàn)說(shuō)明通過(guò)富集培養(yǎng)的確得到了欲分離的目標(biāo)微生物(6)單菌落挑取接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌，燒紅的接種環(huán)應(yīng)在空氣中冷卻，同時(shí)，打開皿蓋挑取菌落接種到試管中，并塞好棉塞，接種環(huán)在火焰上灼燒，殺滅殘留物12．(9分)高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性。研究者從熱泉中篩選了能高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過(guò)程如圖所示。(1)從用途上來(lái)說(shuō)，Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基，僅以淀粉作為________源；從物理狀態(tài)上來(lái)說(shuō)，Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，配制時(shí)一般加入________作為凝固劑。(2)進(jìn)行①過(guò)程的目的是________；②過(guò)程所使用的接種方法是________法。(3)Ⅰ、Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基配制和滅菌時(shí)，滅菌與調(diào)pH的先后順序是______________________；一般對(duì)配制的培養(yǎng)基采用________法滅菌。(4)部分嗜熱菌在Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)可釋放淀粉酶分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈，應(yīng)挑出透明圈________(填“大”或“小”)的菌落，接種到Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基上。解析(1)篩選特定微生物的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)