ICS11020

C50.

中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準

WS/T360—2011

流式細胞術檢測外周血淋巴細胞亞群指南

Guidelinesforperipherallymphocytesubsetsbyflowcytometry

2011-12-14發(fā)布2012-06-01實施

中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布

WS/T360—2011

目次

前言…………………………

Ⅰ

范圍………………………

11

術語和定義………………

21

試劑………………………

32

標本采集和處理…………………………

43

細胞絕對計數(shù)方法………………………

55

免疫熒光染色……………

66

對照標本…………………

77

流式細胞儀的質量控制…………………

88

標本和數(shù)據(jù)分析…………………………

910

臨床意義………………

1013

結果報告和審核………………………

1114

數(shù)據(jù)儲存………………

1214

室內質量控制…………………………

1315

室間質量評價…………………………

1415

人員培訓要求…………………………

1515

附錄資料性附錄四色抗體組合方案進行淋巴細胞亞群分析的示意散點圖……

A()16

參考文獻……………………

17

WS/T360—2011

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由衛(wèi)生部臨床檢驗標準專業(yè)委員會提出

。

本標準主要起草單位中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)院

:。

本標準主要起草人崔巍黃春梅王斐楊卓陳倩

:、、、、。

Ⅰ

WS/T360—2011

流式細胞術檢測外周血淋巴細胞亞群指南

1范圍

本標準規(guī)定了流式細胞術檢測外周血淋巴細胞亞群細胞細胞細胞+細胞和

(T、B、NK、CD4T

+細胞的技術要點包括標本采集和運輸免疫熒光染色技術流式細胞儀檢測和分析結果報

CD8T),、、、

告和審核等方面

。

2術語和定義

下列術語和定義適用于本文件

。

21

.

分化抗原clusterofdifferentiationCD

,

不同譜系細胞在分化成熟活化過程中出現(xiàn)或消失的細胞表面標志細胞表面標志通常用單克

、、,。

隆抗體來識別每個抗體都有指定的編號能被特定抗體識別的特定抗原通常具有相同的編號例

。CD,,

如被抗體識別的抗原稱為抗原

,“CD1”“CD1”。

22

.

前向散射光forwardanglelightscatterFALSFSCFS

、、

光學檢測器在入射光的正前方所收集的低角度光信號與細胞或顆粒的大小和體積有關

,。

23

.

側向散射光sidescatterSSC

,

光學檢測器在入射光的直角處所收集的細胞散射的光信號與細胞或顆粒的內部和表面結構復雜

,

程度有關如細胞質顆粒性膜不規(guī)則性及核形等

,、。

24

.

熒光強度fluorescenceintensity

結合到細胞或顆粒上的熒光素的量熒光信號的通道數(shù)越大提示熒光強度越強在恰當?shù)臈l件

。。

下熒光強度與一個細胞和特定熒光素相結合的位點數(shù)相關

,。

25

.

自發(fā)熒光autofluorescence

未染色細胞自身發(fā)出的熒光通常由嘧啶和黃素核苷酸所產(chǎn)生自發(fā)熒光的強度取決于激發(fā)光的

。,

波長且隨所分析細胞的類型和或細胞活化狀態(tài)而改變通過特殊的標本處理方法可以降低自發(fā)熒

,()。

光的強度如用結晶紫孵育

()。

26

.

顏色補償colorcompensation

由于一種熒光素發(fā)射的熒光疊加到其他熒光素發(fā)射的波長范圍內而造成熒光信號重疊