ICS1104040

C45..

中華人民共和國(guó)醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

YY/T1561—2017

組織工程醫(yī)療器械產(chǎn)品

動(dòng)物源性支架材料殘留α-Gal抗原檢測(cè)

Tissueengineeringmedicaldeviceproducts—

Remnantα-Galantigendeterminationinscaffoldmaterialsutilizing

animaltissuesandtheirderivatives

2017-03-28發(fā)布2018-04-01實(shí)施

國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局發(fā)布

YY/T1561—2017

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些專利的責(zé)任

。。

本標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)外科植入物和矯形器械標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)組織工程醫(yī)療器械產(chǎn)品分技術(shù)委員會(huì)

歸口

(SAC/TC110/SC3)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國(guó)食品藥品檢定研究院中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)冠昊生物科技股份有

:、、

限公司

。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人徐麗明邵安良陸艷趙紅妮金巖張勇杰湯銀喜張偉柴媛

:、、、、、、、、。

Ⅰ

YY/T1561—2017

引言

動(dòng)物源性生物材料及含動(dòng)物源性生物材料的醫(yī)療器械或異種器官中殘留的抗原是該類生物材料及

器官移植中超急性免疫排斥反應(yīng)及慢性免疫毒性的主要因素盡管動(dòng)物源性生物材料在制備過程中經(jīng)

。

過了脫細(xì)胞和去除抗原的處理但殘留的異種抗原仍存在著導(dǎo)致慢性免疫毒性反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)

,。

已有研究顯示半乳糖基抗原或是引起動(dòng)物源性生物材料

α-(α1,3galactosyle,Alpha1,3Galα-Gal)

或異種器官移植時(shí)超急性免疫排斥反應(yīng)的主要靶抗原的結(jié)構(gòu)為

。α-GalGalα1-3Galβ1-4GlcNAc-R,

該抗原是半乳糖基與細(xì)胞膜上的蛋白或脂結(jié)合構(gòu)成的一組完全性抗原主要受半乳糖基

。α-Galα-1,3

轉(zhuǎn)移酶及異紅細(xì)胞糖苷酯合成酶

(α1,3-galactosyltransferase,α-GT)(isoglobotriosylceramidesynthase

或調(diào)控由于人體及類人猿古世紀(jì)猴的半乳糖苷轉(zhuǎn)移酶基因有個(gè)

isogloboside3synthase,iGb3S)。、2

堿基錯(cuò)位變異而不表達(dá)抗原但人腸道菌群持續(xù)表達(dá)抗原這種刺激致使人體免疫系統(tǒng)持

α-Gal,α-Gal,

續(xù)產(chǎn)生抗抗體達(dá)到循環(huán)免疫球蛋白的因此當(dāng)人體接受含有抗原的生物材料

α-Gal,1%~3%。,α-Gal

或異種器官移植時(shí)會(huì)引起超急性免疫排斥反應(yīng)及慢性的免疫毒性反應(yīng)動(dòng)物源性生物材料或異種器官

。

移植中抗原的去除成為降低免疫排斥反應(yīng)和慢性免疫毒性反應(yīng)的關(guān)鍵之一目前尚無動(dòng)物源

α-Gal。,

性生物材料中殘留抗原的定量檢測(cè)方法本標(biāo)準(zhǔn)通過使用抗原特異性單克隆抗體

α-Gal。α-GalM86,

以人工合成的抗原與抗原陰性基質(zhì)混合作為參照品建立標(biāo)準(zhǔn)曲線通過競(jìng)爭(zhēng)性

Gal-BSAGal,ELISA

抑制方法定量檢測(cè)動(dòng)物源性生物材料中殘留的抗原同時(shí)試驗(yàn)體系中加入了抗原陽(yáng)性和

α-Gal。,Gal

陰性參考品使試驗(yàn)的靈敏性和特異性得以監(jiān)控

,。

競(jìng)爭(zhēng)性抑制方法是一種常用的方法其原理是首先將標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品及試驗(yàn)樣品的

ELISA,:α-Gal

抗原與抗體反應(yīng)消耗部分抗體然后用作為固相抗原通過方法檢測(cè)第

M86(M86);Gal-BSA,ELISA

一次反應(yīng)后上清液中的剩余抗體進(jìn)而可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待測(cè)物中的抗原含量由于第

M86;α-Gal。

一次待測(cè)物中的抗原與抗體的反應(yīng)對(duì)后續(xù)的剩余抗體與固相抗原的反應(yīng)構(gòu)

α-GalM86M86Gal-BSA

成了抑制效應(yīng)故稱為抑制法

,ELISA。

Ⅱ

YY/T1561—2017

組織工程醫(yī)療器械產(chǎn)品

動(dòng)物源性支架材料殘留α-Gal抗原檢測(cè)

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)給出了組織工程醫(yī)療器械產(chǎn)品支架材料制備時(shí)使用的動(dòng)物源性生物材料中殘留抗原

α-Gal

的定量檢測(cè)方法

。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于制備組織工程醫(yī)療器械產(chǎn)品支架材料的各種動(dòng)物來源的生物材料或其衍生物的

抗原檢測(cè)

α-Gal。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)第部分醫(yī)療器械免疫毒理學(xué)試驗(yàn)原則與方法

GB/T16886.2020:

(GB/T16886.20—2015,ISO/TS10993-20:2006,IDT)

組織工程醫(yī)療產(chǎn)品第部分動(dòng)物源性生物材料殘留量測(cè)定法熒光染

YY/T0606.2525:DNA:

色法

3術(shù)語(yǔ)和定義

和界定的術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件

GB/T16886.20YY/T0606.25。

4試劑和儀器

41試劑

.

試劑包括

:

磷酸鹽緩沖液

a)(PBS,phosphatebufferedsaline,pH7.4);

碳酸鹽緩沖液

b)(pH9.5);

市售分裝后保存

c)α-GalEpitope(Galα1-3Galβ1-4GlcNAc-R),mAb(M86),-20℃;

市售簡(jiǎn)稱溶于去離子水中分裝后保存

d)Galα1-3gal-BSA(3atomspacer,Gal-BSA),,-20℃

備用

;

辣根酶標(biāo)記的山羊抗小鼠二抗

e)(IgM-HRP);

顯色液

f)TMB(3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine);

血清白蛋白

g);

裂解液市售品其主要組