新藥臨床前毒理學(xué)評(píng)價(jià)

臨床前毒理學(xué)評(píng)價(jià)目的意義急性毒性試驗(yàn)長期毒性試驗(yàn)特殊毒性試驗(yàn)其它毒性試驗(yàn)藥品非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范（GLP）臨床前毒理學(xué)評(píng)價(jià)目的意義

新藥評(píng)價(jià)的核心內(nèi)容之一

目的:確保臨床用藥安全超過限量、改變應(yīng)用范圍或用藥途徑變成毒物

1985--1994,收審新藥近四千種,已批準(zhǔn)上市

約占50%,而另外50%未被批準(zhǔn)上市新藥中,有相當(dāng)一部分就是因毒理學(xué)評(píng)價(jià)沒有通過毒—無處不在

1274宋慈指出萬物皆毒

美國“化學(xué)文摘”登記化學(xué)品約有一千萬種,美國每年投放市場新化學(xué)品約一千五百種左右

1992年聯(lián)合國環(huán)境與發(fā)展大會(huì)將有毒化學(xué)品列為二十一世紀(jì)全球七大環(huán)境問題之一

臨床前毒理學(xué)評(píng)價(jià)成功例子

化學(xué)物質(zhì)致癌、致畸、己烯雌酚防流產(chǎn)而使子代女性出現(xiàn)陰道癌致癌、致畸、生殖及三代生殖試驗(yàn)青霉素嚴(yán)重過敏反應(yīng)動(dòng)物模型—豚鼠

臨床前毒理學(xué)評(píng)價(jià)的局限性

新藥本身

新藥不斷地改變著化學(xué)結(jié)構(gòu)和藥理毒理學(xué)特征,不同于已有的老藥,因而也往往超出人們?cè)械闹R(shí)、經(jīng)驗(yàn)和評(píng)價(jià)手段所達(dá)到的預(yù)測能力

臨床前毒理學(xué)評(píng)價(jià)的局限性現(xiàn)有評(píng)價(jià)手段不能完全適應(yīng)“新藥”評(píng)價(jià)需要

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)缺點(diǎn)

種屬差異

數(shù)量有限

品種單一

健康模型劑量太大急性毒性試驗(yàn)?zāi)康囊饬x基本內(nèi)容和要求急性毒性LD50常用計(jì)算方法有關(guān)問題急性毒性試驗(yàn)

目的意義

了解新藥急性毒性強(qiáng)度

計(jì)算新藥相對(duì)毒性參數(shù)

為臨床毒副反應(yīng)監(jiān)護(hù)提供參考依據(jù)

為長期毒性、蓄積性毒性和特殊毒性試驗(yàn)選擇劑量提供依據(jù)

其它方面

新藥急性毒性的強(qiáng)度

表.化學(xué)物質(zhì)的急性毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)(WHO,1977)━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━毒性分級(jí)ig大、小鼠LD50

吸入大、小鼠LC50

涂皮兔LD50人口服可能的(mg/kg)(ppm)(mg/kg)致死量(g)━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━極毒<1<10<50.06劇毒1-5010-1005-444中等毒51-500101-100045-35030低毒501-50001001-10000351-2180250實(shí)際無毒>5000>10000>2180>1200━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━*吸入毒性LC50指中毒欄中的濃度,一次中毒2-4小時(shí),觀察24天

相對(duì)毒性參數(shù)

治療指數(shù)TI=LD50/ED50安全系數(shù)SF=LD5/ED95可靠或確實(shí)安全系數(shù)CSF=LD1/ED99安全范圍SM=(LD1/ED99-1)X100%SED50/ED50,越大越安全LD5基本無害量ED95基本有效量LD1肯定無害量

ED99肯定有效量為臨床毒副反應(yīng)監(jiān)護(hù)提供參考

中毒癥狀起始時(shí)間持續(xù)時(shí)間恢復(fù)時(shí)間對(duì)抗試驗(yàn)為臨床急救提供依據(jù)

急性毒性試驗(yàn)觀察動(dòng)物反應(yīng)指標(biāo)

中毒部位毒性癥狀表現(xiàn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)

呆滯:對(duì)刺激反應(yīng)遲緩、減弱、消失；不安：對(duì)刺激反應(yīng)過敏、興奮；強(qiáng)直：行動(dòng)姿勢(shì)改變、叫聲異常、震顫、共濟(jì)失調(diào)

植物神經(jīng)系統(tǒng)瞳孔縮小、放大;分泌增多，如流涎、流淚

呼吸系統(tǒng)鼻孔流鼻涕、呼吸緩慢、困難、潮式呼吸、速率加快等心血管系統(tǒng)心動(dòng)過速、緩慢、心律不齊、心跳過強(qiáng)、微弱胃腸系統(tǒng)氣脹、腹瀉、便秘、糞便不成形、糞便黑色生殖系統(tǒng)乳腺膨脹、會(huì)陰部污濁、陰囊下垂等皮膚、毛皮膚發(fā)紅、松弛、皮疹、毛豎起粘膜口腔流粘液、充血、潰瘍、出血性紫紺眼睛上瞼下垂、眼球突出混濁其他直腸溫度升高、降低；消瘦；拒食等

為特殊毒性試驗(yàn)選擇劑量提供依據(jù)

生殖毒性試驗(yàn)高劑量為母鼠MTD致突變?cè)囼?yàn)嚙齒類動(dòng)物微核試驗(yàn)高劑量為1/2LD50果蠅伴性隱性致死試驗(yàn)的高、低劑量分別為1/2LD50和1/4LD50精原細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)高劑量應(yīng)為1/2LD50

動(dòng)物短期致癌試驗(yàn)高劑量應(yīng)是MTD主要藥效學(xué)劑量限度、一般藥理學(xué)和藥動(dòng)學(xué)劑量設(shè)計(jì)也要參考急性毒性的LD50

其它方面

系列化合物的合格率分析(除理化性質(zhì)為主外)也參考LD50復(fù)方中藥物的相互作用,有時(shí)也通過拆方及合用的LD50來判別相互作用的性質(zhì)基本內(nèi)容和要求---動(dòng)物嚙齒類----小鼠或大鼠非嚙齒類----犬或其它一類藥至少必須用二種動(dòng)物(嚙齒類及非嚙齒類各一種,其中非嚙齒類宜用Beagle犬);其它類酌情用二種動(dòng)物小鼠18-22g,同次體重相差不超過4g;大鼠120-150g,同次體重不超過20g;犬用成年犬♀♂各半

基本內(nèi)容和要求---劑量和分組

小動(dòng)物一般分4-6個(gè)劑量組,組距0.65-0.85,求出LD50大動(dòng)物可用50%等量遞升法,一般用6條犬,求出ALD和MTD

基本內(nèi)容和要求---給藥容積

不等濃度等容量給藥常規(guī)給藥容量為:小鼠ig0.2-0.4ml/10g,ip、sc和iv0.1-0.2ml/10g大鼠ig1-1.5ml/100g,ip、sc和iv為0.5-1ml/100g

基本內(nèi)容和要求---觀察記錄

給藥當(dāng)天,尤其是藥后4h內(nèi)應(yīng)嚴(yán)密觀察并記錄,然后每天上下午各一次,連續(xù)觀察7-14天詳細(xì)記錄動(dòng)物毒性反應(yīng)情況和死亡情況,中毒癥狀,中毒發(fā)生時(shí)間、持續(xù)時(shí)間、恢復(fù)期及動(dòng)物最短死亡時(shí)間、最長死亡時(shí)間和平均死亡時(shí)間

死亡動(dòng)物應(yīng)及時(shí)進(jìn)行尸檢,記錄病變情況;若肉眼可見變化時(shí)則需進(jìn)行病理檢查基本內(nèi)容和要求---MTD測定

最大允許濃度和最大允許容積仍未測出LD50,可只求MTD值。方法：一次給20只動(dòng)物,連續(xù)觀察7-14天,未見任何動(dòng)物死亡,則MTD＞XXg/kg。若僅有個(gè)別死亡,則宜寫成LD50>XXg/kg。iv要求pH5-8，速度：大、小鼠10-20s。ig時(shí)空腹,即禁食12-16h左右表.急性毒性試驗(yàn)常用容量和最大容量(ml)

━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━給藥途徑小鼠大鼠豚鼠家兔狗

ig0.2-1.01-41-55-1050-100ip0.2-1.01-32-55-105-15im0.1-0.20.2-0.50.2-0.50.5-12-5iv0.2-0.51-21-53-1035-50sc0.1-0.50.5-10.5-21-33-10━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━*小鼠指20g,大鼠200g,豚鼠200g,兔2.5kg,狗10kg,前者為常用量,后者為最大容量急性毒性研究中應(yīng)注意的問題（一）

動(dòng)物品系寫清楚、

♀♂各半、體重和