＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿第3頁(yè)共3頁(yè)文件名稱車間潔凈區(qū)沉降菌檢驗(yàn)操作規(guī)程文件編號(hào)JB-QA-015-A編制人編制日期年月日復(fù)制份數(shù)審核人審核日期年月日頒發(fā)部門質(zhì)量管理部批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期年月日生效日期分發(fā)部門質(zhì)檢科、質(zhì)保科、生產(chǎn)科、固體制劑車間、前處理提取車間編訂依據(jù)《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》1998年版目的：建立固體制劑車間前處理提取車間潔凈區(qū)沉降菌測(cè)試規(guī)程。范圍：固體制劑車間潔凈區(qū)及前處理提取車間收膏潔凈間。責(zé)任：檢驗(yàn)員、QA監(jiān)控員、質(zhì)檢科長(zhǎng)、質(zhì)保科長(zhǎng)、車間主任、車間工藝員。內(nèi)容：l測(cè)試方法：1.1方法概述：本測(cè)試方法采用沉降法，即通過(guò)自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時(shí)間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見(jiàn)的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來(lái)評(píng)定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并以此來(lái)評(píng)定潔凈室(區(qū))的潔凈度。1.2所用的儀器和設(shè)備：1.2.1高壓滅菌鍋：使用時(shí)應(yīng)嚴(yán)格按照儀器說(shuō)明書(shū)操作。1.2.2恒溫培養(yǎng)箱：必須定期對(duì)培養(yǎng)箱的溫度計(jì)進(jìn)行檢定。1.2.3培養(yǎng)皿：一般采用由90mm×15mm的玻璃培養(yǎng)皿。1.2.4培養(yǎng)基：藥典認(rèn)可的培養(yǎng)基。1.3測(cè)試步驟：1.3.1采樣方法：將已制備好的培養(yǎng)皿放置于采樣點(diǎn)，打開(kāi)培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露0.5h，再將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置。1.3.2培養(yǎng)1.3.2.1全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。1.3.2.2在30℃一35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時(shí)間不少于48h1.3.2.3培養(yǎng)應(yīng)作對(duì)照培養(yǎng)。1.3.3菌落計(jì)數(shù)1.3.3.1用肉眼直接計(jì)數(shù)，標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì)，然后用5—10倍放大鏡檢查，有否遺漏。1.3.3.2若培養(yǎng)皿上有2個(gè)或2個(gè)以上的菌落重疊，可分辨時(shí)仍以2個(gè)或2個(gè)以上菌落計(jì)數(shù)。1.4注意事項(xiàng)：

文件名稱車間潔凈區(qū)沉降菌檢驗(yàn)操作規(guī)程文件編號(hào)JB-QA-015-A1.4.1測(cè)試用具要作滅菌處理，以確保測(cè)試的可靠性、正確性。1.4.2采取一切措施防止人為對(duì)樣本的污染。1.4.3由于細(xì)菌種類繁多，差別甚大，計(jì)數(shù)時(shí)一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì)觀察，不要漏計(jì)培養(yǎng)皿邊緣生長(zhǎng)的菌落，并須注意細(xì)菌菌落與培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必要時(shí)用顯微鏡鑒別。1.4.4采樣前應(yīng)仔細(xì)檢查每個(gè)培養(yǎng)皿的質(zhì)量，如發(fā)現(xiàn)變質(zhì)、破損或污染的應(yīng)剔除。2測(cè)試規(guī)則：2.1測(cè)試狀態(tài)：2.1.1沉降菌測(cè)試前，被測(cè)試潔凈室(區(qū))的溫濕度須達(dá)到規(guī)定的要求，靜壓差、換氣次數(shù)、空氣流速必須控制在規(guī)定值內(nèi)。2.1.2沉降菌測(cè)試前，被測(cè)試潔凈室(區(qū))已經(jīng)過(guò)消毒。2.1.3測(cè)試狀態(tài)有靜態(tài)和動(dòng)態(tài)兩種，測(cè)試狀態(tài)的選擇必須符合生產(chǎn)的要求，并在報(bào)告中注明測(cè)試狀態(tài)。2.2測(cè)試人員2.2.1測(cè)試人員必須穿戴符合環(huán)境潔凈度級(jí)別的工作服。2.2.2靜態(tài)測(cè)試時(shí)，室內(nèi)測(cè)試人員不得多于二人。2.3測(cè)試時(shí)間

在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于30min后開(kāi)始。

2.4沉降菌計(jì)數(shù)

2.4.1采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置

2.4.1.1最少采樣點(diǎn)數(shù)目

1)房間面積≥100m2，采樣點(diǎn)不少于5個(gè)。

2)房間面積<100m2，采樣點(diǎn)不少于2個(gè)。2.4.1.2采樣點(diǎn)的位置1)工作區(qū)采樣點(diǎn)的位置離地0.8m—1.5m左右(略高于工作面)。2)在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動(dòng)范圍處進(jìn)行采樣。3結(jié)果計(jì)算3.1用計(jì)數(shù)方法得出各個(gè)培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。3.2平均菌落數(shù)的計(jì)算，見(jiàn)下式：M1+M2+……………Mn平均菌落數(shù)M＝————————

n式中M——平均菌落數(shù)：

Ml——1號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)；文件名稱車間潔凈區(qū)沉降菌檢驗(yàn)操作規(guī)程文件編號(hào)JB-QA-015-AM2——2號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)：

Mn——n號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)；n——培養(yǎng)皿總數(shù)。4結(jié)果評(píng)價(jià)