乳與乳制非常規(guī)理化標(biāo)檢驗(yàn)維生素C檢測(cè)YLNB5.41．依GB/T5413.18—2．范本方法規(guī)定了用熒光測(cè)定維生素C的法。本方法適用于嬰幼兒方食品和乳粉中維生素C的測(cè)定。3．法提要抗壞血酸（維生素C）在活性炭存在下可氧化成脫氫抗壞血酸，它與鄰苯二反應(yīng)生成一熒光團(tuán)，該熒光團(tuán)在約350nm處有最大激發(fā)長(zhǎng)，而在約30nm熒光最強(qiáng)，熒光強(qiáng)度與濃度成正比。加鄰苯二胺以前，使抗壞血酸形成HBO3-脫氫抗壞血酸合物，可阻止其形成熒光產(chǎn)物，任何殘留的熒光均由外來(lái)引起，可將它們作為“空白”。比較經(jīng)相同氧化處理的品和標(biāo)樣的熒光強(qiáng)度可計(jì)算出抗壞血酸的含量。4．劑、菌種和培養(yǎng)所有試劑如未注明格指分析純所有實(shí)驗(yàn)用水，如未注明其他要求，指三級(jí)水。4．1高峰氏淀粉酶Taka-Disatase）4．偏磷酸-乙酸溶：稱取5g磷酸及40mL乙酸于2

水中，溶解后稀釋至00mL用。4．3酸性活性炭：取200g性炭（化學(xué)純），加入L積1：的鹽酸，加至沸騰，真空過(guò)濾，取下結(jié)塊于一個(gè)大燒杯中入1L水拌過(guò)濾后用水清洗一次10～120℃烘箱中干燥過(guò)后使用。4．4乙酸鈉溶液：水溶解00g三乙酸鈉，并稀釋至1L4．5硼酸乙酸鈉：取g酸，用乙酸鈉溶液（3.4）溶解并稀釋至00mL，用前現(xiàn)配。46鄰苯二胺溶液量濃度00mg/L稱20mg鄰苯二胺，用水稀釋至00mL，用現(xiàn)配。4．7維生素C準(zhǔn)溶：濃100g/mL稱0.0500g抗壞血酸用偏磷酸-乙酸溶3.2解并稀釋至50mL10mL該溶液用偏磷酸乙溶液3.2）稀至100mL，制成標(biāo)準(zhǔn)溶液?，F(xiàn)用現(xiàn)配。5.器：熒光分光光度計(jì)。6.法6．1樣品處理6．．1含淀粉的樣確稱取g品于150mL三角瓶中，加0.5g高峰氏淀粉（3.1），再加入15mL45～℃的蒸餾水混合均勻后氮排除瓶中空氣蓋上瓶塞至45℃烘箱內(nèi)0min，取出卻至室溫，用偏磷酸乙酸溶液（3.2）轉(zhuǎn)100mL容量瓶?jī)?nèi)定容。

bb61．2不含淀粉的品準(zhǔn)確稱取.5g品，用偏磷酸-乙酸溶液（）溶，定容至0mL。6．2測(cè)定6將上述樣液至放有約1酸性活性（3.3250mL三角瓶中，劇烈振動(dòng)過(guò)濾，棄去頭幾毫升濾液，然后分別吸5mL樣品及標(biāo)準(zhǔn)液的濾液分置于25mL100mL放有5mL硼-乙酸鈉溶液（的容量瓶中，靜止15min，用蒸餾水定容。以此作為準(zhǔn)溶液及樣品的空白溶液。62．2在此15min，吸取另mL品及標(biāo)樣于其他兩個(gè)25ml及100mL放有mL酸鈉溶液（3.4和約15mL水的容量瓶中，用水稀釋至刻。6．2．3分別吸取mL樣品、標(biāo)樣及樣品和標(biāo)樣的空白溶液4支試管中。62．4向每支試管加入mL鄰苯二胺（3.6），搖勻，在避光條件下放置35min后立刻于激發(fā)波350nm發(fā)射波長(zhǎng)30nm條件下測(cè)定熒光值。7.結(jié)果計(jì)算樣品中維生素量mg/100g）=

Sb式中：I——樣品熒光值；Ib——樣品空白溶熒光值；Is—標(biāo)樣熒光值；Isb——標(biāo)