實(shí)驗(yàn)高溫對(duì)植物細(xì)胞膜的傷害第一頁，共十二頁，2022年，8月28日1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹鰧W(xué)習(xí)電導(dǎo)儀法測(cè)定膜相對(duì)透性的方法■理解逆境對(duì)植物膜透性的影響

第二頁，共十二頁，2022年，8月28日植物細(xì)胞膜起調(diào)節(jié)控制細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)交換的作用，它的選擇透性是其最重要的功能之一。當(dāng)植物受到逆境影響時(shí)，如高溫或低溫，干旱、鹽漬、病原菌侵染后，細(xì)胞膜遭到破壞，膜的透性增加，選擇透性喪失，細(xì)胞內(nèi)部分電解質(zhì)外滲，將植物組織浸入去離子水中，水的電導(dǎo)將因電解質(zhì)的外滲而加大，傷害愈重，外滲愈多，電導(dǎo)率愈大。膜結(jié)構(gòu)破壞的程度與逆境的強(qiáng)度、持續(xù)的時(shí)間、作物品種的抗性等因素有關(guān)。因此，質(zhì)膜透性的測(cè)定常可作為逆境傷害的一個(gè)生理指標(biāo)，廣泛應(yīng)用在植物抗性生理研究中。本實(shí)驗(yàn)采用電導(dǎo)率法測(cè)定電解質(zhì)的相對(duì)外滲率，來了解脅迫情況下植物受害的程度。2.實(shí)驗(yàn)原理第三頁，共十二頁，2022年，8月28日當(dāng)質(zhì)膜的選擇透性被破壞時(shí)細(xì)胞內(nèi)電解質(zhì)外滲，其中包括鹽類、有機(jī)酸等，這些物質(zhì)進(jìn)入環(huán)境介質(zhì)中，如果環(huán)境介質(zhì)是蒸餾水，那么這些物質(zhì)的外滲會(huì)使蒸餾水的導(dǎo)電性增加，表現(xiàn)在電導(dǎo)率的增加上。植物受傷害愈嚴(yán)重，外滲的物質(zhì)越多，介質(zhì)導(dǎo)電性也就越強(qiáng)，測(cè)得的電導(dǎo)率就越高（不同抗性品種就會(huì)顯示出抗性上的差異。）本實(shí)驗(yàn)采用電導(dǎo)率法測(cè)定電解質(zhì)的相對(duì)外滲率，來了解脅迫情況下植物受害的程度。第四頁，共十二頁，2022年，8月28日傷害率本次實(shí)驗(yàn)測(cè)定高溫對(duì)植物細(xì)胞膜的傷害電導(dǎo)率K=GQQ:電極常數(shù)（電導(dǎo)儀本身決定）G:實(shí)測(cè)電導(dǎo)值傷害率（％）＝處理電導(dǎo)率煮沸電導(dǎo)率×100％第五頁，共十二頁，2022年，8月28日3材料、儀器設(shè)備及試劑（一）材料：梧桐葉片；（二）儀器設(shè)備：1.電導(dǎo)儀；2.打孔器；3.真空干燥器；4.恒溫水浴鍋；第六頁，共十二頁，2022年，8月28日4實(shí)驗(yàn)步驟1)打取葉圓片：自選葉片，洗凈吸干，避開葉脈打取30個(gè)葉圓片,放入1支試管,再打取30個(gè)葉圓片,放入另1支試管,依此類推,每支試管皆放入30個(gè)葉圓片；2)試管分別編號(hào)為：1A,1B,2A,2B……5A,5B，每管加入15ml純水,抽真空20min；3)水浴處理：5組(1A1B,2A2B……5A5B)分別在60℃水浴0，10，20，30，40min，取出后用自來水冷卻10分鐘；高溫處理時(shí)間（min）CK（0）10203040重復(fù)11A2A3A4A5A重復(fù)21B2B3B4B5B第七頁，共十二頁，2022年，8月28日4)測(cè)量電導(dǎo)率：用電導(dǎo)儀測(cè)定浸泡溶液的電導(dǎo)率（分組單獨(dú)領(lǐng)取電導(dǎo)儀，詳細(xì)使用方法分組指導(dǎo)）；5)煮沸電導(dǎo)率：測(cè)過電導(dǎo)率的10支試管再放入100℃沸水浴中15min，以殺死植物細(xì)胞，使細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)全部滲漏出來，取出試管后用自來水冷卻10min，測(cè)其煮沸電導(dǎo)率。第八頁，共十二頁，2022年，8月28日電導(dǎo)儀的使用方法電源開關(guān)“開”，預(yù)熱；打開（測(cè)量/校正）撥至“測(cè)量”；（補(bǔ)償/一般）撥至“一般”；（×1/×10-2）撥至“×1”；量程范圍選“×103”，使待測(cè)值介于0.1～0.999之間。每次往待測(cè)液中插入電極時(shí)，都要首先用純水沖洗電極，并用吸水紙輕輕拭干。第九頁，共十二頁，2022年，8月28日處理電導(dǎo)率CtAB煮沸電導(dǎo)率C100AB傷害率（Ct／C100）×100AB傷害率平均值CK（0）

10min20min30min40min

5數(shù)據(jù)記錄與處理表1高溫對(duì)葉片傷害率的影響第十頁，共十二頁，2022年，8月28日6實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析計(jì)算電導(dǎo)率時(shí)，取2支試管的平均值計(jì)算傷害率比較不同時(shí)間處理的葉片細(xì)胞透性的變化情況，記錄結(jié)果，并加以解釋以傷害率同處理時(shí)間的關(guān)系作圖第十一頁，共十二頁，2022年，8月28日7注意事項(xiàng)整個(gè)過程中，葉片接觸的用具必須絕對(duì)潔凈（全部器皿要洗凈），也不要用手直接接觸葉片，以免污染；

水