實(shí)驗(yàn)十九 根瘤或土壤中固氮酶活性的測定_第1頁
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實(shí)驗(yàn)十九根瘤或土壤中固氮酶活性的測定第一頁,共九頁,2022年,8月28日實(shí)驗(yàn)十九根瘤或土壤固氮酶活性的測定2023/2/24第二頁,共九頁,2022年,8月28日根瘤或土壤固氮酶活性的測定目的要求實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)程序思考題第三頁,共九頁,2022年,8月28日目的要求

初步掌握根瘤或土壤樣品中固氮酶活性測定的方法第四頁,共九頁,2022年,8月28日實(shí)驗(yàn)材料豆科植物根瘤或土壤樣品。102G型氣相色譜儀/標(biāo)準(zhǔn)乙烯靈敏度為103,衰減為1/128。待測樣品中乙烯測定:靈敏度為104,衰減為1/1。(但可根據(jù)固氮酶活性,改變靈敏度和衰減)。乙炔氣體。100mL帶有異丁基膠塞的血清瓶。1mL、10mL(密封性能好的)注射器,100mL微量注射器第五頁,共九頁,2022年,8月28日實(shí)驗(yàn)程序根瘤固氮活性的測定土壤固氮酶活性的測定乙烯含量的計算第六頁,共九頁,2022年,8月28日實(shí)驗(yàn)程序Ⅰ(根瘤固氮活性的測定)從田間挖取豆科植物植株,剪掉地上部分,根部洗凈,稍干,將結(jié)瘤的根系部分分別剪開,主根上的瘤可直接剝下,側(cè)根上的瘤要帶少量根剪斷,將鮮根瘤稱重,收集到100mL血清瓶中,立即用異丁基膠塞密封,然后按瓶子中氣相體積用注射器從瓶中抽出5—10%的空氣,再用注射器注入等體積的C2H2,280C保溫2h。取出瓶子,用注射器吸出100uL的混合氣體,用氣相色譜儀以外標(biāo)法測定其固氮酶活性。第七頁,共九頁,2022年,8月28日實(shí)驗(yàn)程序Ⅱ(土壤固氮酶活性的測定)取田間土樣15g于100mL血清瓶中,加入0.1mole/L葡萄糖液2mL,搖勻,塞上異丁基膠塞,加鋁蓋密封。用注射器從瓶中抽出5mL乙炔氣體,280C培養(yǎng)2d。培養(yǎng)結(jié)束后,用1mL注射器從瓶中吸出0.5mL氣樣,用氣相色譜儀測定其固氮酶活性。第八頁,共九頁,2022年,8

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