千里之行，始于足下。第2頁/共2頁精品文檔推薦(完整word版)生物藥物分析練習(xí)題考試題及詳細(xì)答案生物藥物分析練習(xí)題

一、名詞解釋：

生物藥物分析：應(yīng)用微生物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、有機(jī)化學(xué)、數(shù)學(xué)、分析化學(xué)、生化工程等學(xué)科的理論及其技術(shù)成就，檢測和研究各種生物藥物質(zhì)量的一門綜合性學(xué)科。生物藥物：指的是生物體生命活動(dòng)過程中產(chǎn)生的，或者經(jīng)過生物技術(shù)加工的，用作疾病的診斷、預(yù)防、治療的初級(jí)和次級(jí)代謝產(chǎn)物，包括微生物藥物、基因工程藥物、動(dòng)植物細(xì)胞組織制備的生化藥物。

藥品標(biāo)準(zhǔn)：是指國家對(duì)藥品的質(zhì)量規(guī)格及其檢驗(yàn)辦法所做的技術(shù)規(guī)定，是藥品的生產(chǎn)、流通、使用及檢驗(yàn)、監(jiān)督治理部門共同遵守的法定依據(jù)。

藥典：一具國家記載藥品標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)格的法典，普通由國家藥品監(jiān)督治理局主持編撰頒布實(shí)施，具有法定約束力。

基因工程藥物：是先確定對(duì)某種疾病有預(yù)防和治療作用的蛋白質(zhì)，然后將操縱該蛋白質(zhì)合成過程的基因取出來，通過一系列基因操作，最終將該基因放入能夠大量產(chǎn)生的受體細(xì)胞中去，在受體細(xì)胞別斷生殖的過程中，大規(guī)模生產(chǎn)預(yù)防和治療這些疾病的蛋白質(zhì)。

藥物雜質(zhì)：藥物中存在的無治療作用或妨礙藥物的穩(wěn)定性和療效，甚至對(duì)人體健康有害的物質(zhì)。

面積歸一法：計(jì)算各雜質(zhì)峰面積及其總和，并求出占總峰面積的百分率以測定雜質(zhì)含量。

內(nèi)消法：是指將一定分量的純物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物加到一定量的被分析樣品混合物中，然后對(duì)含有內(nèi)標(biāo)物的樣品舉行群譜分析，分不測定內(nèi)標(biāo)物和待測組分的峰面積及相對(duì)校正因子，按相應(yīng)公式和辦法即可求得被測組分在樣品中的百分含量。

外消法：用已知?jiǎng)e同含量的標(biāo)樣系列等量舉行分析，然后做出響應(yīng)信號(hào)與含量之間的關(guān)系曲線。定量分析樣品時(shí)，在測校正曲線相同條件下進(jìn)同等樣量的等測樣品，從XXX譜圖上測出峰高或峰面積，在從校正曲線查出樣品的含量。

微生物限度檢查法：系指非規(guī)定滅菌制劑及其原、輔料受到微生物污染程度的一種檢查辦法。放射性免疫測定法：利用免疫學(xué)上的抗原-抗體高度特異性反應(yīng)與放射性同位素測量技術(shù)的高度靈敏性相結(jié)合的超微量分析辦法。

酶免疫測定法：利用抗原和抗體的免疫學(xué)反應(yīng)和酶的高效催化作用來測定抗原或抗體含量的技術(shù)。

抗血清的滴度酶免競爭法：

非競爭法

均相法：是指別需要將結(jié)合的與游離的酶標(biāo)志物分離便可測定的辦法。

非均相法：是指抗原抗體反應(yīng)后，需要將結(jié)合的與游離的酶標(biāo)志物分離才干測定的辦法。

酶的交聯(lián)

液相酶免疫測定法

酶分析：指利用酶作為分析工具來測定特定物質(zhì)量的辦法。（P97）

終點(diǎn)法：指借助酶反應(yīng)使被測物質(zhì)定量地舉行轉(zhuǎn)變，在轉(zhuǎn)化完成后，測定底物、產(chǎn)物或輔酶物質(zhì)等的變化量的辦法。

反應(yīng)速度法：是指經(jīng)過測定酶促反應(yīng)速度對(duì)被測物質(zhì)舉行定量的辦法。（P104）

酶循環(huán)放大法:指利用底物的專一性，使微量的底物“增幅放大”以達(dá)到定量目的的辦法。（P107）

電泳：指帶電粒子或離子在電場作用下的定向挪移，依據(jù)帶電粒子在電場的作用下遷移行為別同舉行分離的技術(shù)。（P111）

電滲:液體的涌動(dòng)現(xiàn)象。（P113）

電泳遷移率：帶電粒子在單位電場強(qiáng)度下挪移的泳動(dòng)速度。

SDS—PAGE：向樣品加入還原劑和過量SDS，SDS是陰離子去垢劑，是蛋白質(zhì)變性解聚，并與蛋白質(zhì)結(jié)合成帶強(qiáng)負(fù)電荷的復(fù)合物，掩蓋了蛋白質(zhì)之間原有電荷的差異，是各種蛋白質(zhì)的電荷/質(zhì)量比值都相同，因而在聚丙酰胺凝膠中電泳時(shí)遷移速率要緊取決于蛋白質(zhì)分子大小。是分析蛋白質(zhì)和多肽、測定其分子量等常用的辦法。

梯度聚丙稀酰胺凝膠電泳

比移值：群譜法中原點(diǎn)到斑點(diǎn)中心的距離與原點(diǎn)到溶劑前沿的距離的比值。

等電聚焦：利用蛋白質(zhì)分子或其他兩性分子等電點(diǎn)的別同，在一具穩(wěn)定的、延續(xù)的、線性的pH梯度中舉行蛋白質(zhì)的分離的一種電泳辦法。（P126）

兩性載體

群譜法：指借助物質(zhì)在兩相間分配原理的別同，而使混合物中各組分分離的技術(shù)。（P131）

邊緣效應(yīng)：指板層中部斑點(diǎn)的Rf值小于兩側(cè)斑點(diǎn)的Rf值的現(xiàn)象。（P137）

放射性比度：單位質(zhì)量或單位體積的放射性物質(zhì)的放射性活度。

分離度：用以推斷分離物質(zhì)在群譜柱中的分離事情，常用為柱的總分離效能指標(biāo)。

托尾因子：是經(jīng)過計(jì)算5%峰高處峰寬與峰頂點(diǎn)至前沿的距離比來評(píng)價(jià)峰形的參數(shù)，目的是為了保證群譜分離效果和測量精度，常用T來表示。

牛津單位：在標(biāo)準(zhǔn)事情下，能徹底抑制50mL肉湯培養(yǎng)液中的金黃群葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株生長的青霉素最低含量為一具牛津單位。（P159）

稀釋單位：指能徹底抑制1mL肉湯培養(yǎng)液中大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株生長的最低含量。

分量單位：指以抗生素的生物活性部分的分量作為效價(jià)單位。（P160）

旋光性：當(dāng)光經(jīng)過含有某種物質(zhì)的溶液時(shí)，使通過此物質(zhì)的偏振光平面發(fā)生旋轉(zhuǎn)的現(xiàn)象。

比旋度：指偏振光經(jīng)過長1dm且每1ml含旋光物質(zhì)1g的溶液，在一定額波長和溫度下的旋光度。

稀釋法

比濁法

瓊脂擴(kuò)散法（管碟法）

生物檢定：指利用藥物對(duì)生物體所引起的藥理作用來測定藥物的生物活性或效價(jià)的一種辦法。（P210）

容量分析法：依據(jù)已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)試劑溶液與被測定的一定量供試品藥物徹底作用所消耗的標(biāo)準(zhǔn)試劑的體積，來計(jì)算被測定藥物中有效物質(zhì)含量的辦法。（224）

直截了當(dāng)?shù)味ǚǎ菏怯脴?biāo)準(zhǔn)溶液直截了當(dāng)?shù)味ū粶y物質(zhì)的一種辦法。（P224）

逆滴定法：指加入定量且過量的滴定劑使之與待測物質(zhì)反應(yīng)，然后用另外的試劑滴定過量的滴定劑，進(jìn)而對(duì)待測物質(zhì)舉行定量的辦法。

維生素：指一類維持人體正常生理代謝功能所必需的低分子有機(jī)化合物。（p237

電位滴定法：指在滴定過程中經(jīng)過測量電位變化以確定滴定終點(diǎn)的辦法。

化學(xué)聚合117

光聚合：利用光照加速化合物單位體之間共價(jià)鏈接的現(xiàn)象。

微分比容：當(dāng)加入1g干物質(zhì)于無限大體積的溶劑中時(shí)，溶液的體積增量。

茚三酮反應(yīng)：

雙縮脲反應(yīng):雙縮脲在堿性溶液中與銅離子結(jié)合生成復(fù)雜的紫紅XXX化合物。（p277）

等電點(diǎn)：在某一pH的溶液中，氨基酸解離成陽離子和陰離子的趨勢及程度相等，所帶凈電荷為零，呈電中性，此刻溶液的pH稱為該氨基酸的等電點(diǎn)。

福林酚法：利用蛋白質(zhì)與福林酚試劑反應(yīng)后形成的化合物可在750XXX波長處測定其吸光度，以測定蛋白質(zhì)含量的分析辦法。

蛋白質(zhì)換算系數(shù)：指含有1g氮的蛋白質(zhì)分量，普通為6.25.

甲醛滴定法：依據(jù)一分子氨基酸與兩分子甲醛反應(yīng)生成一具氫離子，在用已知濃度氫氧化鈉滴定氫離子以確定氨基酸含量的辦法。

非水滴定法：在冰醋酸中用高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定測定氨基酸含量的辦法。

酶：是一種生物來源的特別化學(xué)催化劑，即生物催化劑。是由生物細(xì)胞產(chǎn)生的具有催化能力的蛋白質(zhì)。

酶的高效性：酶催化較普通催化反應(yīng)速度高105~1013.

酶的絕對(duì)專一性:即一種酶僅能催化一種底物的生化反應(yīng)。如脲酶只能催化尿素落解成氨和碳酸鹽，即使是尿素衍生物也別能被脲酶水解。

酶的相對(duì)專一性:即一種酶僅能催化相應(yīng)的某一類化合物或具有某種化學(xué)鍵的物質(zhì)的變化，如脂肪水解酶能分解脂肪，蛋白質(zhì)水解酶分解蛋白質(zhì)，a-淀粉酶可水解淀粉，這些酶別能相互調(diào)換。

酶的立體結(jié)構(gòu)專一性：及底物有立體異構(gòu)體時(shí)，酶只能以其中之一作為底物。

酶的活力：酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力。

酶的活力單位：酶的活性單位（U）是酶活性高低的一種度量，用U/g或U/ml表示。

酶的比活力：酶的比活力是指每毫克酶蛋白所含有的酶活力。用U/mg表示。

恒比活力：

多肽生長因子：（1976年）定義：細(xì)胞生長因子是指在體內(nèi)和體外對(duì)動(dòng)物細(xì)胞或機(jī)體的生長有促進(jìn)作用的物質(zhì)，它們別是營養(yǎng)成分，要緊由多肽構(gòu)成，故稱多肽生長因子。按如今細(xì)胞因子的作用性質(zhì)舉行定義：多肽調(diào)節(jié)因子實(shí)際上是一系列存在于機(jī)體內(nèi)的，對(duì)機(jī)體有非常強(qiáng)效應(yīng)的細(xì)胞調(diào)節(jié)因子。

肽圖分析：肽圖分析可作為與天然產(chǎn)品或參考品作周密比較的手段。與氨基酸成分和序列分析合并研究，可作為蛋白質(zhì)的精確鑒不。同種產(chǎn)品別同批次的肽圖的一致性是工藝穩(wěn)定性的驗(yàn)證指標(biāo)。

蛋白質(zhì)免疫印記法：將等電聚焦電泳后的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素紙上。免疫印跡的基本原理是借助聚丙酰胺凝膠技術(shù)，將生物活性物質(zhì)高效分離，再與固相免疫學(xué)辦法相結(jié)合。

細(xì)胞病變抑制法：該法要緊用于干擾素的效價(jià)測定，采納CPE抑制為基礎(chǔ)的抑制微量測定法。H3—TdR摻入法：經(jīng)過比較待測樣品與標(biāo)準(zhǔn)品之間對(duì)檢測細(xì)胞促增殖能力的強(qiáng)弱來確定待測樣品的活性。

微量酶檢測法（MTT）：經(jīng)過比較待測樣品刺激檢測細(xì)胞增殖能力的強(qiáng)弱來確定樣品的活性。生物制品：生物制品系指以天然或人工改造的微生物、寄生蟲、生物毒素或生物組織及其代謝產(chǎn)物等為起始原料，采納生物學(xué)、分子生物學(xué)或生物化學(xué)、生物工程等相應(yīng)技術(shù)制成，并以相應(yīng)分析技術(shù)操縱其中間產(chǎn)物和成品質(zhì)量的生物活性制品，可用于某些疾病的預(yù)防、治療和診斷。

異煙肼法：甾體激素C3上酮基及其某些其他位置上的酮基都能與常用的羰基試驗(yàn)如異煙肼、2，4-二硝基苯肼及氨基脲等縮合反應(yīng)產(chǎn)生有群物質(zhì)，在一定波長下可比群，作為含量測定的依據(jù)，異煙肼是目前使用較廣泛的一種。

激素：由內(nèi)分泌細(xì)胞所產(chǎn)生的微量化學(xué)信息分子，這些物質(zhì)經(jīng)過擴(kuò)散或被血液轉(zhuǎn)運(yùn)到作用細(xì)胞或器官，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞或器官的代謝，并有反饋性地調(diào)節(jié)機(jī)制以習(xí)慣機(jī)體內(nèi)環(huán)境的變化，也有協(xié)調(diào)體內(nèi)各部分之間相互聯(lián)系的作用。

愛護(hù)指數(shù)：動(dòng)物經(jīng)抗原免疫后，其耐受活菌或活毒攻擊相當(dāng)于未免疫動(dòng)物所耐受量的倍數(shù)。抗毒素單位：一具抗毒素單位定義為將抗毒素與一具L+量（致死限量，指與一具國際單位抗毒素混合后在一定時(shí)刻殺死一只規(guī)定體重動(dòng)物的最小毒素量）的毒素作用后，注射小鼠仍能使該小鼠在96h左右才死亡的最小抗毒素量。

絮狀單位：一具絮狀單位定義為能與一具單位抗毒素首先發(fā)生絮狀沉淀反應(yīng)的類毒素或毒素的量。

二、咨詢答題

1、生物藥物分析的基本任務(wù)有哪四個(gè)方面？

答：（1）藥檢，包括原料藥和制劑的檢驗(yàn)。

（2）舉行生產(chǎn)過程質(zhì)量操縱。

（3）舉行運(yùn)輸儲(chǔ)存質(zhì)量操縱。

（4）舉行臨床分析。

2、中國藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分為哪幾種？

答：藥典、部頒標(biāo)準(zhǔn)、地點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)。

3、2000年版《中國藥典》的內(nèi)容分為幾部分？

答：兩部。一部收載中藥材，中藥成方制劑。第二部收載化學(xué)藥品、抗生素、生化藥品等。

4、生物藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的特征是啥？

答：權(quán)威性、科學(xué)性、發(fā)展性。

5、試述生物藥物檢驗(yàn)工作的基本內(nèi)容？

答：1、學(xué)習(xí)分析生物藥物的若干辦法及新技術(shù)。2、生物藥物測定及藥品檢驗(yàn)。3、體內(nèi)藥物分析4、生物藥品制品的標(biāo)準(zhǔn)制定。

6、普通雜質(zhì)檢查遵循的原則是啥？費(fèi)休法測水分的基本原理是啥？在平板菌降計(jì)

數(shù)法中向培養(yǎng)基中加入TTC的原理是啥？怎么鑒不大腸桿菌、沙門菌、綠膿桿菌？

答：1、平行操作原則，包括儀器的配對(duì)性及供試管與對(duì)比管的同步操作。

2、原理：利用碘氧化二氧化硫時(shí)需要一定量的水分參加反應(yīng)，總反應(yīng)式

H2O+I2+SO2+3C5H5N+CH3OH→2C5H5N·HI+C5H5N·HSO4CH3

3、細(xì)菌體內(nèi)含有多種脫氫酶，舉行氧化作用時(shí)釋放出電子和氫離子，遇TTC指示劑菌降呈紅XXX。在培養(yǎng)基中加入適量TTC，既可限制細(xì)菌蔓延生長又便于計(jì)數(shù)。

7、放射性免疫測定法中競爭法與非競爭法的原理分不是啥？抗血清的質(zhì)量檢定分為

哪三個(gè)方面？妨礙抗體產(chǎn)生的因素是啥？

答：競爭法：標(biāo)記抗原Ag++Ab→Ag+Ab/AgAb++Ag→F↑(多)則待測抗原↑/B↑則待測抗原↓。

非競爭法：Ag++Ab（過量）→AgAb++Ab+→F（Ab+）↑則Ag↓/B(AgAb+)cpm↑,則Ag↑。

抗血清的質(zhì)量檢定分為親和力、特異性、滴度。

妨礙抗體產(chǎn)生的因素：佐劑、劑量、免疫競爭。

8、在酶免疫測定法中競爭法與非競爭法的原理分不是啥？它們分不有哪些類型？在

酶免測定法中胰島素測定實(shí)例。

答：競爭法：將待檢抗原和酶標(biāo)抗原與相應(yīng)固相抗體競爭結(jié)合，標(biāo)本中抗原越多，與固相抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗原越少，與底物反應(yīng)生成的顏群越淺，所以依照顏群深淺可定量測定。1、固相法2、雙抗體法3、均相醇免疫測定4、酶免疫制劑免疫測定。

非競爭法：

1、雙抗體夾心法

2、免疫酶測定法

9、酶免疫測定法中實(shí)驗(yàn)條件的建立包括哪五個(gè)過程？

答：包被、洗滌、加待測物、溫育、檢測。

10、在酶免疫分析中終點(diǎn)法的條件和應(yīng)注意的咨詢題分不是啥？

答：條件：1、要有專一地作用該被測物質(zhì)的酶。2、可以確定使這種酶反應(yīng)接近舉行徹底的條件。3、反應(yīng)中底物的減少，產(chǎn)物的增加、輔酶物質(zhì)的改變等能夠借助某種簡便的辦法舉行測定。

注意咨詢題：1、酶的底物特異性2、反應(yīng)的平衡3、反應(yīng)液4、反應(yīng)產(chǎn)物的抑制。

11、酶法分析有哪三種辦法？

答：終點(diǎn)法，反應(yīng)速度法、循環(huán)放大法。

12、怎么在一具比XXX杯中并且定量丙酮酸、磷酸烯醇式丙酮酸和D—2—磷酸甘油酸？

答：關(guān)于丙酮酸、磷酸烯醇式丙酮酸和D-2-磷酸甘油酸共存的混合液來講，用乳酸脫氫酶作用時(shí)，由于乳酸脫氫酶反應(yīng)定量地向右方舉行，所以依照340XXX汲取度的減少便能夠容易地算出丙酮酸含量。如像這種反應(yīng)液中再加入丙酮酸激酶，使丙酮激酶反應(yīng)與乳酸脫氫酶反應(yīng)成偶聯(lián)反應(yīng)，則NADH的減少和磷酸烯醇式丙酮酸量成正比。假如進(jìn)一步向該反應(yīng)系統(tǒng)中加烯醇化酶，使烯醇化酶反應(yīng)與丙酮激酶及乳酸脫氫酶偶聯(lián)，這么此刻N(yùn)ADH減少與D-2磷酸甘油酸的量成正比例。如此在一具比群杯內(nèi)就能依次舉行丙酮酸、磷酸烯醇式丙酮酸和D-2-磷酸甘油酸的定量。

13、怎么在樣品中并且測定葡萄糖和果糖？怎么舉行G-1-P的定量測定？

14、酶循環(huán)放大法的基本原理和注意事項(xiàng)分不是啥？酶循環(huán)放大法特點(diǎn)是啥？

答：基本原理：酶循環(huán)放大法是一種超微量分析辦法，本分析法分為三步，第一步，轉(zhuǎn)換反應(yīng)：以試樣中的待測組分為底物，經(jīng)特異性反應(yīng)生成與待測組分相當(dāng)?shù)亩垦h(huán)底物。第二步，循環(huán)反應(yīng)：生成的循環(huán)底物反復(fù)參加由兩個(gè)酶反應(yīng)組成的耦連反應(yīng)，所得產(chǎn)物量為循環(huán)底物的若干倍。第三步，指示反應(yīng)：采納酶法測定反應(yīng)產(chǎn)物。由反應(yīng)產(chǎn)物量及循環(huán)次數(shù)，計(jì)算出循環(huán)底物量，再推算試樣中待測組分的量。

注意事項(xiàng)：1、NAD酸性穩(wěn)定，堿性條件下2~3分鐘被破壞，NADH與之相反。2、在循環(huán)反應(yīng)中除循環(huán)底物外，其他物質(zhì)是過量的。3、用對(duì)比實(shí)驗(yàn)，用已知NADH求循環(huán)次數(shù)n。

特點(diǎn)：1、靈敏度高，能測定出10的負(fù)18次方摩爾物質(zhì)。2、特異性高3、循環(huán)效率高，2萬次每小時(shí)。4、測定物質(zhì)靈便。

15、電泳法的基本原理是啥？妨礙電泳遷移率的因素有哪些？

答：原理：依據(jù)帶帶電粒子在電場作用下遷移行為的別同舉行分離的辦法。

因素：顆粒性質(zhì)、電場強(qiáng)度，溶液性質(zhì)、電滲、焦耳熱、篩孔

16、聚丙烯酰胺凝膠的制備辦法有拿兩種？它們的催化劑、加速劑是啥？

答：化學(xué)聚合：催化劑，過硫酸銨或過硫酸鉀。加速劑：脂肪族叔胺

光聚合：催化劑：核黃素。加速劑：TEMED

17、聚丙烯酰胺凝膠電泳的基本原理是啥？

聚丙烯酰胺凝膠系統(tǒng)分為別延續(xù)電泳和延續(xù)電泳。別延續(xù)聚丙烯酰胺凝膠電泳建立在區(qū)帶電泳院里的基礎(chǔ)上中意孔徑大小別同的聚丙烯酰胺凝膠作為支持物，采納電泳基質(zhì)的別延續(xù)體系（即凝膠層、緩沖液離子成分、ph及電位梯度均別延續(xù)），使樣品在別延續(xù)的兩相間集聚濃縮成非常薄的起始區(qū)帶，然后舉行電泳。

18、SDS—PAGE的基本原理是啥？

答：在聚丙烯酰胺凝膠系統(tǒng)中引進(jìn)SDS（十二烷基硫酸鈉），SDS會(huì)與變性的多肽，并使蛋白帶負(fù)電荷，由于多肽結(jié)合SDS的量幾乎總是與多肽的分子量成正比而與其序列無關(guān)，所以SDS多肽復(fù)合物在丙稀酰胺凝膠電泳中的遷移率只與多肽的大小有關(guān)，在達(dá)到

飽和的狀態(tài)下，每克多肽可與1.4g去污劑結(jié)合。當(dāng)分子量在15KD到200KD之間時(shí)，蛋白質(zhì)的遷移率和分子量的對(duì)數(shù)呈線性關(guān)系，符合下式：logMW=K-bX，式中：MW為分子量，X為遷移率，k、b均為常數(shù)，若將已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的遷移率對(duì)分子量對(duì)數(shù)作圖，可獲得一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，未知蛋白質(zhì)在相同條件下舉行電泳，依照它的電泳遷移率即可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得分子量。

19、妨礙SDS與蛋白質(zhì)結(jié)合的因素有哪些？

（1）溶液中SDS單體的濃度（2）樣品緩沖液的離子強(qiáng)度（3）二硫鍵是否徹底被還原

20、梯度聚丙烯酰胺凝膠的基本原理是啥？蛋白質(zhì)染XXX的辦法有哪五種？

原理：凝膠濃度由小變大，膠的孔徑由大變小，在電泳開始時(shí)，由于凝膠孔徑大，沒有分子篩效應(yīng)，此刻電泳的遷移率與被分離的物質(zhì)所帶電荷、形狀、分子量大小相關(guān)，隨著電泳的舉行，孔徑越來越小，由分子篩效應(yīng)產(chǎn)生的阻力越來越大，當(dāng)阻力腳以阻擋被分離物質(zhì)向前挪移時(shí)，被分離物質(zhì)停留在相應(yīng)孔徑的凝膠中，此刻惟獨(dú)分子篩效應(yīng)，無電荷效應(yīng)。因此物質(zhì)分子的最終分離是依據(jù)分子篩效應(yīng)分開，蛋白質(zhì)的相對(duì)遷移率在一定范圍內(nèi)與蛋白質(zhì)分子量的對(duì)數(shù)成線性關(guān)系。

辦法:1、氨基黑10B法2、考馬斯亮藍(lán)R250法3、考馬斯亮藍(lán)G250法4、1-苯胺基-8-萘磺酸5、銀染XXX法

21、群譜法的基本原理是啥？紙群譜的妨礙因素有哪些？

原理：混合物中各組分在兩相間舉行分配，其中一組是別動(dòng)的，稱為固定相；另一相是攜帶混合物流過固定相的，稱為流淌相。當(dāng)流淌相中所含的混合物通過固定相時(shí)，就會(huì)與固定相發(fā)生作用，由于混合物中各組分在結(jié)構(gòu)和性質(zhì)上存在差異，他們與固定相發(fā)生作用的大小、強(qiáng)弱就有差異，所以，在同一條件下，別同組分在固定相中滯留時(shí)刻別同，從而按先后別用次序從固定相中流出而得到分離。

妨礙因素：（1）物質(zhì)極性的妨礙（2）溶劑的妨礙（3）ph的妨礙（4）濾紙的妨礙（5）溫度和時(shí)刻的妨礙

22、HPLC的基本原理是啥？HPLC的XXX譜類型有哪幾種？

原理：HPLC的流淌相和固定相基本上液體。流淌相與固定相之間應(yīng)互別相溶，有一具明顯的分界面。當(dāng)試樣進(jìn)入群譜柱，溶質(zhì)在兩相間舉行多次分配。從而使流出時(shí)刻別同，進(jìn)而達(dá)到分離。

類型：正相群譜、反相XXX譜、離子交換群譜、凝膠群譜

23、氣相群譜的基本原理和類型分不是啥？

原理：原理：混合物的分離依據(jù)群譜柱的性質(zhì)和相關(guān)的保留或固定相的性質(zhì)。利用被測物質(zhì)各組分在別同兩相間分配系數(shù)的弱小差異，當(dāng)兩相做相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，這些物質(zhì)在兩相之間舉行反復(fù)多次的分配，使原來惟獨(dú)弱小的性質(zhì)差異產(chǎn)生非常大的效果，而使別同組分得到分離。

類型：氣-固XXX譜法、氣-液群譜法

24、抗生素的鑒不常用辦法有哪三類？

物理辦法、化學(xué)辦法、生物學(xué)辦法

25、怎么樣舉行抗生素類藥物的鑒不？

抗生素類藥物的鑒不包括抗生素及其衍生物的鑒不。前者是鑒不抗生素的種屬，后者是鑒不抗生素是屬何種鹽類、脂類、復(fù)合物等。常用的鑒不辦法有物理辦法、化學(xué)辦法、生物學(xué)辦法。物理辦法有紫外光汲取圖譜、紅外光汲取圖譜、群譜分析及溶解度等?；瘜W(xué)辦法常用的有功能基團(tuán)反應(yīng)、特異性的橙XXX反應(yīng)等。生物學(xué)辦法利用特異的酶反應(yīng)，如用青霉素在一定條件下水解青霉素，使其喪失抗菌活性，以此鑒不青霉素。

26、怎么鑒不氨基糖苷類抗生素？

（1）呈XXX反應(yīng)：茚三酮反應(yīng)、坂口反應(yīng)、糖類試劑反應(yīng)、埃爾松-摩根反應(yīng)、麥芽酚反應(yīng)（2）薄層XXX譜

27、測定青霉素中過敏原青霉噻唑衍生物的原理是啥？

氧化汞與青霉噻唑衍生物形成penamaldate衍生物，衍生物在285XXX處有汲取峰?？上冉?jīng)過凝膠過濾分離青梅噻唑衍生物，以磷酸鹽緩沖液位對(duì)比品，測定285XXX處的汲取度，再與以青霉噻唑正丙胺為標(biāo)準(zhǔn)品所做的標(biāo)準(zhǔn)曲線作為對(duì)照，即可定量。

28、抗生素的效價(jià)微生物測定辦法有哪三種？管碟法測定生抗素的效價(jià)基本原理是什

么？

辦法：稀釋法、比濁法、瓊脂擴(kuò)散法

原理：管碟法測定生抗素的效價(jià)基本原理：利用抗生素在攤布特定試驗(yàn)菌的瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)擴(kuò)散，形成含一定濃度的球型區(qū)，抑制了試驗(yàn)菌的生殖，經(jīng)過透明瓊脂培養(yǎng)基，可觀看到透明的抑菌圈；同時(shí)在一定的抗生素濃度范圍內(nèi)，對(duì)數(shù)濃度（劑量）與抑菌圈面積或直徑成正比。辦法設(shè)計(jì)是在同樣條件下將已知效價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)品溶液與未知效價(jià)的供試品溶液的劑量反應(yīng)（抑菌圈）舉行比較；當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)品和供試品是屬于同一性質(zhì)的抗生素時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)品溶液和供試品溶液，對(duì)一定試驗(yàn)菌所得的劑量反應(yīng)曲線，在一定劑量范圍內(nèi)應(yīng)相互平行。依照以上原理，可設(shè)計(jì)為一劑量法、二劑量法及三劑量法等，從而能夠較為準(zhǔn)確地測定供試品的效價(jià)。

29、試述管碟法中妨礙抗生素抑菌圈形狀的因素及操縱？

1、稀釋抗生素用的緩沖液的ph值、鹽濃度的妨礙

2、制備瓊脂培養(yǎng)基菌層，加菌時(shí)培養(yǎng)基溫度的妨礙

3、測試用的器材洗凈度的妨礙

4、雙碟培養(yǎng)溫度的妨礙

5、其他操作的妨礙

30、試述管碟法中妨礙抗生素抑菌圈清楚度的因素及操縱？

1、實(shí)驗(yàn)菌的特性與數(shù)量

2、培養(yǎng)基的原材料品種與質(zhì)量

3、調(diào)節(jié)培養(yǎng)基ph值或增加鹽濃度可使抑菌圈清楚

4、別適當(dāng)延長雙碟的培養(yǎng)時(shí)刻

31、量反應(yīng)平行法測定生抗素的效價(jià)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)類型有哪些？

隨機(jī)設(shè)計(jì)、隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)、拉平方設(shè)計(jì)、交叉設(shè)計(jì)

32、簡述量反應(yīng)平行法實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性分析？

實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性是以方差分析法測驗(yàn)，測驗(yàn)多組均數(shù)之間的差不是否顯著?？股匦r(jià)測定中，存在有S（標(biāo)準(zhǔn)差）和T的差不，直線及平行線關(guān)系，劑量間和雙碟間的關(guān)系。經(jīng)過統(tǒng)計(jì)以上各組均數(shù)間的方差，以試品間、回歸、劑間（列）、蝶間（行）等的方差與誤差項(xiàng)（S平方）的比值（稱F值），來確定各自差異的顯著性程度和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，所以F值（F值=該項(xiàng)方差/誤差項(xiàng)）可作為觀看實(shí)驗(yàn)顯著性程度的一具指標(biāo)。計(jì)算出的F值，可經(jīng)過F值表得知計(jì)算F值是處于P>0.05、P0.01，差不無顯著意義。

33、抗生素類藥物的含量測定的物理化學(xué)辦法有哪幾種類型？

1、容量法：酸堿滴定法、碘量法

2、光譜學(xué)測定法:旋光法、紫外分光光度法、比群法

3、群譜測定法：洗脫法、直截了當(dāng)測量法、生物自XXX

4、高效液相XXX譜法

34、容量分析法分為哪幾種類型？光譜分析法又分為哪幾種類型？

容量法：酸堿滴定法、碘量法

光譜學(xué)測定法:旋光法、紫外分光光度法、比XXX法

35、在抗生素的XXX譜分析中洗脫法哪三個(gè)步驟？

答：斑點(diǎn)定位、洗脫、測量。

36、維生素C的從哪三個(gè)方面舉行鑒不？

答：利用還原性、利用糖類的性質(zhì)、紫外分光光度法。

37、維生素C的含量測定辦法有哪些？其基本原理分不是啥？

答：1、容量分析法（碘量法，2,6-二氯吲哚酚法，NBS滴定法，比群法，紫外紫外分光光度法）

38、怎么舉行的維生素C中鐵和銅鹽檢查？

鐵鹽檢查：取本品5.0g兩份，分不置25ml量瓶中，一份中加入0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液（B），另一份中加入標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液（周密稱取硫酸鐵銨863mg，置1000ml量瓶中，加1mol/L硫酸溶液25ml，加水稀釋至刻度，搖勻，周密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻）1.0ml，加0.1mol/ml硝酸溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)比溶液（A）。照原子汲取分光光度法，在248.3XXX波長處分不測定，應(yīng)符合規(guī)定。

銅鹽檢查：取本品2.0g兩份，分不置25ml量瓶中，一份中加入0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液（B），另一份中加入標(biāo)準(zhǔn)銅溶液（周密稱取硫酸鐵銨393mg，置1000ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，周密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻）1.0ml，加0.1mol/ml硝酸溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)比溶液（A）。照原子汲取分光光度法，在324.8XXX波長處分不測定，應(yīng)符合規(guī)定。

39、怎么判定純DNA和RNA？

答：用紫外分光光度法測定A260/A280來判定。純DNA的比值應(yīng)為1.8，純RNA為2.0。

40、嘌呤類藥物怎么舉行鑒不？

答：1、戊糖的鑒不2、嘌呤的鑒不3、磷酸的的鑒不4、特征汲取光譜5、熔點(diǎn)鑒不41、嘌呤類藥物的含量測定辦法有哪兩種？

答：1、紫外分光光度法2、先經(jīng)前處理(如層析或電泳得到樣品的斑點(diǎn)，然后剪下)，再測定。

42、氨基酸的生產(chǎn)制備辦法有哪四種？

答：水解法，發(fā)酵法，酶轉(zhuǎn)化法，化學(xué)合成法。

43、氨基酸的α-氨基和α-羧基分不有哪些要緊反應(yīng)？

答：α-氨基：氨基酸與亞硝酸反應(yīng)、氨基酸的氨基與?；噭?、烴基化反應(yīng)、與甲醛反應(yīng)

α-羧基：成鹽、成酯、成酰氯、成酰胺

44、氨基酸的α-氨基和α-羧基并且參與的反應(yīng)有哪些？

答：與茚三酮反應(yīng)、成肽反應(yīng)

45、氨基酸的R基團(tuán)特別反應(yīng)有哪些？

答：1、絡(luò)氨酸的酚基反應(yīng)2、組氨酸的側(cè)鏈咪唑基于重氮苯磺酸反應(yīng)形成紅棕XXX化合物3、精氨酸的側(cè)鏈胍基在硼酸鈉緩沖液中與1,2-環(huán)己二酮反應(yīng)，生成縮合物4、XXX氨酸的側(cè)鏈吲哚基在溫柔條件下被N-溴代琥珀酰亞胺氧化5、半胱氨酸的巰基能打開乙撐亞胺的環(huán)，生成的側(cè)鏈帶正電荷。

46、怎么樣舉行AA的鑒不？

答：旋光性、紅外光譜、紫外汲取、紙層析、茚三酮反應(yīng)

47、從哪幾個(gè)方面鑒不蛋白質(zhì)？

答：顏群反應(yīng)、福林酚反應(yīng)或雙縮脲反應(yīng)、紫外汲取。

48、茚三酮反應(yīng)測AA有哪三種辦法？

答：Yemm法、Rosen法、Hydrindantin法。

49、AA的含量測定有哪五種辦法？其中非水滴定法的原理和種類分不是啥？

答：茚三酮反應(yīng)法、甲醛滴定法、非水滴定法、電泳法、群譜法、

原理：即溶劑的區(qū)分效應(yīng)，本來在水溶液中別能滴定的弱酸或弱堿，假如挑選適當(dāng)?shù)娜軇┦蛊鋸?qiáng)度增加，則能夠順利滴定氨基酸有氨基和羧基，在水中呈中性，在冰醋酸中就顯出堿性，所以可用高氯酸等強(qiáng)酸舉行滴定。

種類：直截了當(dāng)?shù)味ǚā⒒氐畏ā?/p>

50、胰島素的效價(jià)測定有哪三種辦法？

答：兔血糖法、小鼠血糖下落法，小鼠驚厥法

51、簡述酶的特性。

答：1、酶是高效催化劑2、酶對(duì)底物的結(jié)構(gòu)具有嚴(yán)格的挑選性3、酶催化反應(yīng)的反應(yīng)條件溫柔4、酶的催化活性在生物體內(nèi)受到多種因素的調(diào)節(jié)。

52、酶與底物復(fù)合物促進(jìn)反應(yīng)速度的緣故是啥？

答：1、定向作用與底物濃縮2、酶使底物分子變形3、酸堿催化4、共價(jià)催化

53、米氏方程是啥？其中Ks與Km的意義分不是啥？求取Vm和Km的辦法有哪

兩種辦法？

答：，Ks值稱為米氏常數(shù)。辦法：Lineweaver-Burk作圖法，

Langmuir作圖法。

54、妨礙酶催化速度的因素有哪些？

答：底物濃度、酶濃度、抑制劑、激活劑、溫度、pH值和離子強(qiáng)度

55、酶除蛋白質(zhì)的鑒不常用辦法以外，還有哪三種鑒不辦法？

答、：1、酶活性實(shí)驗(yàn)2、沉淀實(shí)驗(yàn)3、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

56、簡