分枝桿菌梭菌屬第1頁(yè)/共91頁(yè)第二篇致病性細(xì)菌第十八章分枝桿菌屬M(fèi)ycobacterium

醫(yī)學(xué)微生物學(xué)教研室哈爾濱醫(yī)科大學(xué)第2頁(yè)/共91頁(yè)結(jié)核分枝桿菌

形態(tài)、染色及培養(yǎng)特性抵抗力和變異性致病物資及特點(diǎn)所致疾病免疫性及超敏反應(yīng)郭霍現(xiàn)象結(jié)核菌素試驗(yàn)卡介苗治療和預(yù)防原則麻風(fēng)分枝桿菌

形態(tài)染色特點(diǎn)致病特點(diǎn)及分型防治原則非結(jié)核分枝桿菌

非結(jié)核分枝桿菌的分組及致病性

主要內(nèi)容第3頁(yè)/共91頁(yè)分枝桿菌屬（Mycobacterium）

共同特性細(xì)長(zhǎng)略帶彎曲的桿菌生長(zhǎng)速度慢無(wú)鞭毛、無(wú)芽孢、不產(chǎn)生內(nèi)外毒素細(xì)胞壁含有豐富的脂質(zhì)成分（分枝菌酸）致病性與菌體成分相關(guān)抗酸桿菌（acid-fastbacillus）第4頁(yè)/共91頁(yè)分枝桿菌屬分類(lèi)結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群結(jié)核分枝桿菌牛型分枝桿菌非洲分枝桿菌田鼠分枝桿菌麻風(fēng)分枝桿菌非結(jié)核分枝桿菌

根據(jù)生長(zhǎng)速度快生長(zhǎng)菌慢生長(zhǎng)菌第5頁(yè)/共91頁(yè)第一節(jié)結(jié)核分枝桿菌Mycobacteriumtuberculosis(TB)第6頁(yè)/共91頁(yè)流行病學(xué)結(jié)核病的病原菌1882年德國(guó)細(xì)菌學(xué)家Koch證明全球性衛(wèi)生問(wèn)題是艾滋病高發(fā)區(qū)人群的首要死因世界防治結(jié)核病日3月24日第7頁(yè)/共91頁(yè)結(jié)核病的國(guó)際形勢(shì)WHO統(tǒng)計(jì)世界1/3的人口感染結(jié)核世界范圍每年死亡人數(shù)為200萬(wàn)人↘140萬(wàn)（2010年）90%以上在發(fā)展中國(guó)家每年新病例為800萬(wàn)-1000萬(wàn)人我國(guó)結(jié)核病人450萬(wàn)人，每年死亡人數(shù)約25萬(wàn)第8頁(yè)/共91頁(yè)生物學(xué)形狀形態(tài)染色培養(yǎng)特性抵抗力變異性第9頁(yè)/共91頁(yè)形態(tài)與染色細(xì)長(zhǎng)略彎,分枝狀桿菌無(wú)芽胞無(wú)鞭毛,無(wú)內(nèi)外毒素抗酸染色陽(yáng)性(Zeihl-Neelsenacid-faststain)第10頁(yè)/共91頁(yè)齊-尼氏抗酸染色法

Ziehl-Neelsenmethodforacidfastbacteria涂片、固定、干燥初染：石炭酸復(fù)紅脫色：3%的鹽酸酒精復(fù)染：美籃染液干燥、鏡檢第11頁(yè)/共91頁(yè)培養(yǎng)特性專(zhuān)性需氧，最適pH6.5-6.8生長(zhǎng)緩慢：代時(shí)18h營(yíng)養(yǎng)要求高羅氏培養(yǎng)基：甘油、天門(mén)冬素、蛋黃、馬鈴薯、無(wú)機(jī)鹽類(lèi)、孔雀藍(lán)液體培養(yǎng)基

吐溫-80(Tween80)第12頁(yè)/共91頁(yè)抵抗力Resistantto干燥酸堿堿性染料青霉素等

Sensitivity紫外線(xiàn)酒精濕熱抗結(jié)核藥物異煙肼利福平等第13頁(yè)/共91頁(yè)變異性形態(tài)

L型Much顆粒菌落耐藥性毒力變異卡介菌-卡介苗（BacilliCalmette-Guèrin，BCG）是毒力變異株，將有毒的牛型結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)于含甘油、膽汁、馬鈴薯的培養(yǎng)基中，經(jīng)230次傳代，歷史13年而獲得的減毒活菌株，目前廣泛應(yīng)用于結(jié)核病的預(yù)防第14頁(yè)/共91頁(yè)致病性第15頁(yè)/共91頁(yè)致病物質(zhì)類(lèi)脂蛋白質(zhì)多糖第16頁(yè)/共91頁(yè)致病物質(zhì)類(lèi)脂（lipid）分枝菌酸（mycolicacid）…….抗酸染色特性索狀因子（cordfactor)………..慢性肉芽腫磷脂（phosphatide）………….結(jié)核結(jié)節(jié)，干酪樣壞死蠟質(zhì)D（wax-D）………………遲發(fā)型超敏反應(yīng)硫酸腦苷酯（sulfatide）……...細(xì)胞內(nèi)寄生蛋白質(zhì)…結(jié)核結(jié)節(jié)形成、全身中毒多糖（polysaccharide）…….胞內(nèi)寄生第17頁(yè)/共91頁(yè)所致疾病感染類(lèi)型肺部感染：肺結(jié)核（原發(fā)感染、繼發(fā)感染）肺外感染傳播途徑呼吸道消化道破損皮膚黏膜等侵犯多種組織器官第18頁(yè)/共91頁(yè)肺結(jié)核-原發(fā)感染(primaryinfection)多發(fā)生于兒童

原發(fā)灶（滲出性炎性病灶）淋巴管肺門(mén)淋巴結(jié)

原發(fā)綜合征胸透為啞鈴形陰影第19頁(yè)/共91頁(yè)原發(fā)結(jié)核原發(fā)綜合征：原發(fā)灶、淋巴管炎、肺門(mén)淋巴結(jié)腫大致病性第20頁(yè)/共91頁(yè)第21頁(yè)/共91頁(yè)第22頁(yè)/共91頁(yè)原發(fā)型肺結(jié)核正第23頁(yè)/共91頁(yè)肺結(jié)核-繼發(fā)感染：成人多發(fā)誘發(fā)因素原發(fā)病灶中潛伏的結(jié)核分枝桿菌引起外界的結(jié)核分枝桿菌再次入侵感染特點(diǎn)病灶局限，不累及臨近淋巴組織易發(fā)生慢性肉芽腫和干酪樣壞死和空洞第24頁(yè)/共91頁(yè)肺結(jié)核-繼發(fā)感染病程呈慢性漸進(jìn)性，伴有乏力、體重減輕、咳嗽、盜汗、午后潮熱、胸痛等。病灶多局限呈干酪樣結(jié)節(jié)，若結(jié)節(jié)破潰，則可形成空洞，傳染性強(qiáng)。致病性第25頁(yè)/共91頁(yè)右上干酪樣肺結(jié)核第26頁(yè)/共91頁(yè)右下干酪樣肺結(jié)核第27頁(yè)/共91頁(yè)右下干酪性肺炎并空洞形成第28頁(yè)/共91頁(yè)肺外感染免疫力低下患者形成全身粟粒性結(jié)核或播散性結(jié)核第29頁(yè)/共91頁(yè)第30頁(yè)/共91頁(yè)

臨床表現(xiàn)咳嗽，咳痰(血痰）全身倦怠感微熱盜汗胸痛食欲低下體重減少第31頁(yè)/共91頁(yè)感染結(jié)核菌的過(guò)程感染不發(fā)病（既往感染）初次感染發(fā)病原發(fā)感染抵抗力下降時(shí)發(fā)病繼發(fā)感染

成人多發(fā)數(shù)月-2年之內(nèi)發(fā)病

兒童多見(jiàn)80%-90%5%-10%5%-10%第32頁(yè)/共91頁(yè)免疫機(jī)制：主要是細(xì)胞免疫感染免疫、有菌免疫（infectionimmunity）感染TB或接種BCG后，機(jī)體可產(chǎn)生對(duì)該菌特異性免疫力，維持依賴(lài)于TB在體內(nèi)的存在細(xì)胞免疫遲發(fā)型超敏反應(yīng)

第33頁(yè)/共91頁(yè)結(jié)核菌初次感染（10-14d)既往感染(1-2d)皮下注射紅腫、潰瘍、壞死紅腫、淺表潰爛淋巴結(jié)腫大

全身播散死亡病灶局限無(wú)播散，無(wú)死亡獲得免疫力郭霍現(xiàn)象第34頁(yè)/共91頁(yè)結(jié)核菌素試驗(yàn)結(jié)核菌素試劑舊結(jié)核菌素（oldtuberculin，OT)純蛋白衍化物

(purifiedproteinderivative，PPD)第35頁(yè)/共91頁(yè)結(jié)核菌素試驗(yàn)方法取兩種PPD5單位注入兩前臂皮內(nèi)48～72小時(shí)后觀察紅腫直徑結(jié)果陰性：＜5mm陽(yáng)性：＞5mm強(qiáng)陽(yáng)性：≥15mm第36頁(yè)/共91頁(yè)結(jié)核菌素試驗(yàn)結(jié)果、臨床意義陽(yáng)性強(qiáng)陽(yáng)性

陰性硬結(jié)、紅腫直徑5～15mm之間既往感染過(guò)結(jié)核分枝桿菌卡介苗接種成功硬結(jié)直徑超過(guò)15mm以上表明可能有活動(dòng)性結(jié)核，應(yīng)進(jìn)一步檢查注射部位有針眼大的紅點(diǎn)或稍有紅腫，硬結(jié)直徑小于5mm原發(fā)感染的早期嚴(yán)重結(jié)核病或其他傳染病（麻疹）老年人免疫力低下病人第37頁(yè)/共91頁(yè)微生物學(xué)檢查標(biāo)本取材和處理涂片染色鏡檢：抗酸染色須與非結(jié)核分枝桿菌進(jìn)行鑒別加熱法：非結(jié)核分枝桿菌加熱2分鐘即失去抗酸性，而結(jié)核分支桿菌則不然結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)：檢測(cè)潛伏結(jié)核感染的唯一的方法細(xì)菌學(xué)基因診斷：PCR動(dòng)物試驗(yàn)第38頁(yè)/共91頁(yè)結(jié)核分枝桿菌痰標(biāo)本抗酸染色結(jié)核分枝桿菌尿標(biāo)本抗酸染色熒光金胺染色結(jié)核分枝桿菌第39頁(yè)/共91頁(yè)結(jié)核病快速診斷方法全自動(dòng)核酸擴(kuò)增試驗(yàn)（NAAT）被世界衛(wèi)生組織認(rèn)可約100分鐘內(nèi)可為多名病人做出準(zhǔn)確診斷第40頁(yè)/共91頁(yè)特異性防治卡介苗預(yù)防接種對(duì)象：新生兒和結(jié)核菌素試驗(yàn)陰性的兒童免疫時(shí)間：3～5年藥物治療五項(xiàng)原則早期、聯(lián)合、規(guī)則、足量、全程第41頁(yè)/共91頁(yè)第二節(jié)麻風(fēng)分枝桿菌Mycobacteriumleprae第42頁(yè)/共91頁(yè)麻風(fēng)分枝桿菌（M.leprae）麻風(fēng)病的病原菌慢性傳染病主要侵及皮膚、粘膜和神經(jīng)引起關(guān)節(jié)的畸形性病變世界各地均有報(bào)道主要分布在亞、非洲拉丁美洲第43頁(yè)/共91頁(yè)生物學(xué)形狀第44頁(yè)/共91頁(yè)形態(tài)與染色細(xì)長(zhǎng)略彎曲無(wú)芽胞，無(wú)莢膜，無(wú)鞭毛抗酸染色陽(yáng)性典型的胞內(nèi)寄生菌麻風(fēng)細(xì)胞抵抗力抗干燥：可存活7天低溫環(huán)境生存良好紫外線(xiàn)及加熱敏感第45頁(yè)/共91頁(yè)培養(yǎng)特性不能在人工培養(yǎng)基中生長(zhǎng)小鼠足墊：傳代動(dòng)物模型：犰狳（armadillo)第46頁(yè)/共91頁(yè)致病性易感人群：人傳播途徑：密切接觸和呼吸道傳播潛伏期：平均2-5年發(fā)病慢、病程長(zhǎng)麻風(fēng)分為3種類(lèi)型瘤型麻風(fēng)結(jié)核樣型界線(xiàn)類(lèi)、未定類(lèi)第47頁(yè)/共91頁(yè)瘤型麻風(fēng)傳染性強(qiáng)病情嚴(yán)重侵犯部位皮膚和粘膜神經(jīng)眼睛及內(nèi)臟鏡檢病變部位麻風(fēng)細(xì)胞肉芽腫結(jié)核樣型傳染性小侵犯部位皮膚外周神經(jīng)很少累及內(nèi)臟第48頁(yè)/共91頁(yè)Mycobacteriumleprae第49頁(yè)/共91頁(yè)第50頁(yè)/共91頁(yè)結(jié)核樣型麻風(fēng)皮膚損害第51頁(yè)/共91頁(yè)界線(xiàn)類(lèi)麻風(fēng)引起的手變形第52頁(yè)/共91頁(yè)微生物學(xué)診斷顯微鏡檢查，抗酸染色PCR：尚在研究階段第53頁(yè)/共91頁(yè)麻風(fēng)細(xì)胞抗酸染色麻風(fēng)分枝桿菌組織切片（Triff染色）第54頁(yè)/共91頁(yè)防治原則特異的預(yù)防尚無(wú)有效的菌苗早期發(fā)現(xiàn)、早治療目前多采用二三種藥聯(lián)合治療氨苯砜（dapsone，DDS）第55頁(yè)/共91頁(yè)LepromatousLeprosyPre-andPost-Treatment第56頁(yè)/共91頁(yè)非結(jié)核分枝桿菌除人型結(jié)核分枝桿菌、牛型結(jié)核分枝桿菌與麻風(fēng)分枝桿菌以外的分枝桿菌菌群海分支桿菌(M.marinum)恥垢桿菌(M.smegmatis)多存在于自然界，是條件致病菌與結(jié)核分支桿菌鑒別第57頁(yè)/共91頁(yè)小結(jié)生物學(xué)性狀形態(tài)大小、培養(yǎng)、染色特點(diǎn)及抵抗力致病性致病物質(zhì)及引起的疾病郭霍現(xiàn)象、結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)及判定標(biāo)準(zhǔn)微生物學(xué)檢查抗酸染色及快速檢測(cè)方法（核酸檢測(cè)）治療與預(yù)防：BCG第58頁(yè)/共91頁(yè)問(wèn)題簡(jiǎn)述結(jié)核分枝桿菌的主要生物學(xué)特性簡(jiǎn)述結(jié)核菌素試驗(yàn)原理、結(jié)果判斷及意義簡(jiǎn)述結(jié)核病的預(yù)防及抗結(jié)核藥物的治療原則何為卡介苗？簡(jiǎn)述卡介苗在實(shí)際工作中的應(yīng)用及對(duì)其效果的評(píng)價(jià)簡(jiǎn)述麻風(fēng)分枝桿菌的生物學(xué)特性及致病特點(diǎn)第59頁(yè)/共91頁(yè)參考文獻(xiàn)普通高等教育“十一五”國(guó)家規(guī)劃教材《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)(第二版)谷鴻喜主編，北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社2009年7月普通高等教育“十一五”國(guó)家規(guī)劃教材《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》(第六版)李凡主編，高等教育出版社2011年5月WHO：/en/USCDC:NIH:ChinaCDC:ChinaMinistryofHealth:維基百科：

第60頁(yè)/共91頁(yè)第十九章梭菌屬第61頁(yè)/共91頁(yè)第二篇致病性細(xì)菌第十九章梭菌屬Clostridium醫(yī)學(xué)微生物學(xué)教研室哈爾濱醫(yī)科大學(xué)第62頁(yè)/共91頁(yè)主要內(nèi)容破傷風(fēng)梭菌

芽胞及抵抗力破傷風(fēng)痙攣毒素致病機(jī)制

所致疾病

特異性防治產(chǎn)氣莢膜梭菌

形態(tài)及培養(yǎng)特點(diǎn)致病物質(zhì)所致疾病微生物檢查法肉毒梭菌

形態(tài)特點(diǎn)肉毒毒素致病機(jī)制肉毒中毒毒素檢測(cè)艱難梭菌

毒素及致病性第63頁(yè)/共91頁(yè)梭菌屬

（Clostridium）

一群專(zhuān)性厭氧、革蘭陽(yáng)性的粗大桿菌形成芽胞，細(xì)菌膨脹呈梭形產(chǎn)生外毒素廣泛分布于自然界破傷風(fēng)梭菌－破傷風(fēng)產(chǎn)氣莢膜梭菌－氣性壞疽肉毒梭菌－肉毒中毒艱難梭菌－假膜性結(jié)腸炎、抗生素相關(guān)腹瀉第64頁(yè)/共91頁(yè)DrawingofaSoldierdyingofTetanus第一節(jié)破傷風(fēng)梭菌(C.tetani)第65頁(yè)/共91頁(yè)生物學(xué)性狀形態(tài)與染色G+,1mx5m，粗大桿菌芽胞位于頂端，菌體呈鼓槌狀芽胞抵抗力強(qiáng)

專(zhuān)性厭氧

周身鞭毛第66頁(yè)/共91頁(yè)破傷風(fēng)梭菌第67頁(yè)/共91頁(yè)致病性

感染途徑

創(chuàng)傷、不潔接生疾病

引起破傷風(fēng)、新生兒破傷風(fēng)感染條件厭氧微環(huán)境傷口深而窄混有泥土、異物局部組織缺血或同時(shí)伴有需氧菌混合感染第68頁(yè)/共91頁(yè)致病性

致病物質(zhì)破傷風(fēng)痙攣毒素（tetanospasmin）強(qiáng)毒性蛋白質(zhì)對(duì)人的致死量是1gα輕鏈具有毒性作用β重鏈能與神經(jīng)細(xì)胞表面受體神經(jīng)節(jié)苷脂結(jié)合0.3%甲醛作用4周后脫毒成為類(lèi)毒素第69頁(yè)/共91頁(yè)破傷風(fēng)痙攣毒素對(duì)腦干神經(jīng)和脊髓前角細(xì)胞有高度親和力局部感染毒素脊髓前角神經(jīng)細(xì)胞與神經(jīng)節(jié)苷脂結(jié)合α封閉抑制性突觸阻止抑制突觸釋放介質(zhì)(甘)興奮性增高全身肌肉痙攣血、淋巴外周神經(jīng)間隙阻斷上下神經(jīng)元間正常抑制性神經(jīng)沖動(dòng)傳遞致病機(jī)制β第70頁(yè)/共91頁(yè)破傷風(fēng)痙攣毒素作用第71頁(yè)/共91頁(yè)第72頁(yè)/共91頁(yè)

嚼肌痙攣，牙關(guān)緊閉和吞咽困難。軀干及四肢肌肉強(qiáng)直，角弓反張?bào)w征。膈肌痙攣、呼吸困難窒息而死。

第73頁(yè)/共91頁(yè)免疫性

破傷風(fēng)免疫是典型的抗毒素免疫微量毒素即發(fā)病，且與神經(jīng)迅速結(jié)合，不能引起有效免疫應(yīng)答有效地獲得抗毒素的途徑是：主動(dòng)免疫：注射類(lèi)毒素被動(dòng)免疫：注入大劑量抗毒素第74頁(yè)/共91頁(yè)微生物學(xué)檢查法

臨床診斷主要結(jié)合創(chuàng)傷史和特有體征微生物學(xué)檢查對(duì)早期診斷意義不大必要時(shí)可取傷口滲出物涂片染色鏡檢及厭氧菌培養(yǎng)，并以培養(yǎng)物濾液做動(dòng)物試驗(yàn)，以確定有無(wú)毒素產(chǎn)生第75頁(yè)/共91頁(yè)防治原則人工主動(dòng)免疫制劑：精制破傷風(fēng)類(lèi)毒素對(duì)象：嬰幼兒、部隊(duì)?wèi)?zhàn)士、建筑工人及其他易受傷人群方法：基礎(chǔ)免疫－－1年后加強(qiáng)免疫對(duì)3～6個(gè)月兒童可采用白－百－破（DPT）三聯(lián)疫苗人工被動(dòng)免疫制劑：注射破傷風(fēng)抗毒素（TAT）用途：緊急預(yù)防1500-3000u特異治療早期、大量注射破傷風(fēng)抗毒素注意事項(xiàng)：注射前應(yīng)做皮膚過(guò)敏試驗(yàn)，脫敏療法抗生素的使用大量青霉素或甲硝唑第76頁(yè)/共91頁(yè)第二節(jié)產(chǎn)氣莢膜梭菌革蘭陽(yáng)性大桿菌卵圓形芽胞莢膜無(wú)鞭毛厭氧培養(yǎng)：繁殖極快分解乳糖產(chǎn)氣多凝固酪蛋白A-E5型A型常見(jiàn)第77頁(yè)/共91頁(yè)洶涌發(fā)酵實(shí)驗(yàn)第78頁(yè)/共91頁(yè)所致疾病

多種毒素和酶：α-毒素氣性壞疽（gasgangrene）局部組織壞死、水腫、氣腫、腫脹劇痛，觸摸有捻發(fā)感特殊的臭味全身中毒食物中毒：A型產(chǎn)腸毒素第79頁(yè)/共91頁(yè)微生物學(xué)檢查法直接涂片鏡檢分離培養(yǎng)與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)血平板或皰肉培養(yǎng)基厭氧培養(yǎng)涂片