有物方學(xué)究主內(nèi)容1、關(guān)物質(zhì)查方法建立研發(fā)思路2、關(guān)物質(zhì)法的建立和法學(xué)驗證2.1原料藥和制的相關(guān)理性質(zhì)2.2有關(guān)物質(zhì)分方法的選2.3有關(guān)物質(zhì)分方法的驗2.4有關(guān)物質(zhì)雜的定量方3、關(guān)物質(zhì)質(zhì)的分析4、關(guān)物質(zhì)質(zhì)限度的制有物檢方建的發(fā)思研思路有關(guān)物質(zhì)檢測方法的建重點是測方法的先性、準(zhǔn)確、可行性。⑴先有物質(zhì)的方法選擇，對于制藥有EP、等量標(biāo)準(zhǔn)藥品，首選以上的色譜條進(jìn)行篩選尤其關(guān)注離子對試劑的使用。⑵用不色譜條件進(jìn)行對比研究如果方法是等度測的，方法最好選用梯度色譜條件，比兩種方法定結(jié)果的質(zhì)數(shù)及質(zhì)量等。確證有關(guān)物質(zhì)測定方法的準(zhǔn)確性。⑶所篩的方法進(jìn)行系統(tǒng)的方法研究，比不同檢測法的優(yōu)劣選擇較好的色譜條件作為本有關(guān)物質(zhì)查的測定法。⑷于仿藥同時要將自制樣品與售原研樣進(jìn)行全面質(zhì)量比較分析其雜質(zhì)的種類和含量，保自制樣與市售原樣品的雜質(zhì)在同一水平。

原藥制的關(guān)化質(zhì)在立有物質(zhì)檢查方法前，需首了解原料和制劑的關(guān)理化性。⑴于原藥，了解原料藥的基本質(zhì)和結(jié)構(gòu)點。了解料藥合成藝過程中的起始原料、副產(chǎn)、副產(chǎn)物生的雜質(zhì)中間產(chǎn)物或可能產(chǎn)生的降解產(chǎn)物等結(jié)合相關(guān)知的雜質(zhì)來確有關(guān)物質(zhì)測的條件⑵于制，可能影響藥物有關(guān)物的重要因有輔料、型、存儲件等，主要了解輔料對有關(guān)質(zhì)檢測的擾情況，同劑型在不同存貯條件下可能產(chǎn)生雜質(zhì)等。于復(fù)方制劑，時要考慮復(fù)方中原的相互作用可能產(chǎn)生的雜質(zhì)等。

有物分方的擇有雜質(zhì)檢測方法包括化學(xué)法、譜法、色法等，因物結(jié)構(gòu)及解產(chǎn)物的不同采用不同的檢方法。通合適的分技術(shù)將不同結(jié)構(gòu)的雜質(zhì)進(jìn)行分離、測，從而到對雜質(zhì)的有控制。目普遍采用雜質(zhì)檢測方法主要有：⑴效液色譜法目前采的分析方法主要以高效相色譜法主，為常的分析方法選擇不同色譜柱對質(zhì)進(jìn)行有效的分離。

⑵薄層色譜(TLC)

是色譜法中一種，是速分離和性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實驗技，但準(zhǔn)確較低。

⑶氣相色譜GC)

氣相色譜法要是用于氣化的物的檢測和分離。一般用于有機(jī)殘留溶劑檢測和分。也可用一些能揮發(fā)的雜質(zhì)的檢測。⑷細(xì)管泳法（CE）毛細(xì)管電泳法是彈性石英細(xì)管為分通道，以壓直流電場為驅(qū)動力依據(jù)樣品各組分的度和（或）分配行為的差異而實現(xiàn)組分分離一

種分析方法其應(yīng)用比廣泛，但方法測定精密度不高，專屬性不穩(wěn)，且CE儀價格較高。由各種析方法均具有一定的局性，因此進(jìn)行雜質(zhì)析時，應(yīng)意不同原理的分析方法間的互補(bǔ)充與證如與TLC及與的互補(bǔ)充反HPLC系統(tǒng)與正相HPLC統(tǒng)的相互補(bǔ)充，HPLC不同檢器檢測結(jié)的相互補(bǔ)等。

有物分方的證①測長選有物質(zhì)測波長是結(jié)主分雜質(zhì)最吸波行選擇測方法分別稱取待測供試品、照品、空輔料、市對照樣品量，用流動相溶解并稀釋到定濃度，制成對照溶液、供試品溶液以及空白輔料溶，分別于用法測定，采用DAD檢測器行，確定測物質(zhì)中雜質(zhì)的最吸收波長、主峰的最大吸收長以及空輔料的干情況等，有雜質(zhì)對照品的同時進(jìn)行描，或進(jìn)行測定。要時可將試品溶液當(dāng)破壞后測定各降解產(chǎn)物的最大吸波長。判結(jié)果根據(jù)測定結(jié)果確定有關(guān)質(zhì)測定的測波長。

有物分方的證②屬試專性系在其它成分可能共存的況下，采的方法能確測定出測雜質(zhì)的特性⑴于原藥，可根據(jù)其合成工藝采用各步應(yīng)的中間（尤其是幾步反應(yīng)的中間體）、立體構(gòu)體、粗、重結(jié)晶液等作為測試品進(jìn)行統(tǒng)適性究，察產(chǎn)品各雜質(zhì)峰及成分峰相間的分離是否符合要求，從而驗證分析方法工藝雜質(zhì)分離能力。

⑵根據(jù)藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)點、制劑處方與工藝、儲存條件等選用合適酸、堿、、熱、濕、氧反應(yīng)等加破壞性試來驗證分析方法的專屬性。⑶制降試驗在試驗過程中，應(yīng)意破壞性驗要適度應(yīng)著重考敏感條件。如在一定條件下定，則無要再提高件的劇烈程度進(jìn)行重復(fù)試驗。破壞驗的程度無統(tǒng)一要求，般以強(qiáng)力壞后主成的含量仍占絕大部分為宜。要達(dá)到種破壞程，需要在研究程中進(jìn)行索，先通初步試驗了解樣品對光、熱、濕、、堿、氧條件的基本穩(wěn)情況，然進(jìn)一步調(diào)破壞性試驗條件（如光照強(qiáng)度、酸濃度、破的時間、溫度），以得能充分反降解產(chǎn)物與主成分分離的結(jié)果和圖。

有物分方的證③測與量檢限系指樣中的被析物能夠檢測到的最低量，是反映分析方法靈敏度的一重要指標(biāo)；最檢限得大該質(zhì)報限，保證出控的質(zhì)。測方法取待測物質(zhì)對照品適量加流動相制成一點度的對照溶液，按倍倍稀釋法，以信比為31時應(yīng)的濃度或注入儀器的確定檢測。同時將噪比為3：1的品溶液進(jìn)樣6針，峰面積計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。

判斷結(jié)果：小檢測限度下樣品面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)，以小檢測限確定供試品溶配制的濃作為依據(jù)定限是指測雜質(zhì)能被定量測的最低量。定量限體現(xiàn)了分析方法是否具備靈的定量檢測能。雜質(zhì)定試驗，需察方法的定量限，以保證含量很少雜質(zhì)能夠準(zhǔn)確測出。

測方法取待測物質(zhì)對照品適量加流動相制成一點度的對照溶液，按倍倍稀釋法，以信比為10：1時相應(yīng)的濃或注入儀器的量確定檢測限。同時將信噪比為10：的樣溶液進(jìn)樣6針，以面積計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。判結(jié)果定量限濃度下樣品峰面的相對標(biāo)偏差應(yīng)≤10%。

有物分方的證

④統(tǒng)應(yīng)

系統(tǒng)適應(yīng)性驗主要是察主成分雜質(zhì)的分離情況以及主峰參數(shù)信息如理論塔板、拖尾因子、分離度等，均應(yīng)符合測定要求。

⑤密試⑥液定試

精密度試驗括：重復(fù)試驗、中精密度試驗等。考察樣品在制溶劑中雜質(zhì)與主的穩(wěn)定性，取一定濃度的樣品溶液，分別不同時間樣測定雜與主峰的峰面積，以相對標(biāo)準(zhǔn)偏差表示不同間測定結(jié)果的定性判斷結(jié)果結(jié)果RSD,%≤2.0%在測時間內(nèi)的樣品溶液穩(wěn)定性良好。

⑦用試

耐用性試驗指測定條發(fā)生小的動時，測定結(jié)果不受影響的承受程度。一般系變化條件分別考察動相比例變化5％流動相值變化、柱溫變化5檢測波變化5nm流速對值變化20％以及采三根不同號的色譜進(jìn)行測定時儀器色譜為的變化每個條件下各測試兩次?？山邮艿臏?zhǔn)為：各質(zhì)峰的拖尾因不得大于2.0，雜質(zhì)峰其他成分必須達(dá)到線分離；各條件下的雜質(zhì)含量數(shù)據(jù)n=6）相對標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)不大于2.0%，雜含量的絕值在0.1％內(nèi)。特殊樣品如果色條件變化較敏感的可適當(dāng)降低變化范圍。耐性試部分還包括樣品萃取（?。┓€(wěn)?。嚎衫斫馓崛》椒ㄖ貜?fù)性良好。即提取方法的定驗證試。

有物雜的量法有物質(zhì)質(zhì)的定量方法根據(jù)雜質(zhì)主成分的大吸收波及校正因來確定。若雜質(zhì)與主峰的吸波長基本致，則一采用自身對照法或峰面積歸一化法若雜質(zhì)與峰的吸收波長異范圍較校正因子在～1.1之則采用不加正因子的成分自身對照法超出該范，校正因在.2～5.0范圍以內(nèi)時采用主成分自身對照法的定量方式，用校正因進(jìn)行校正若雜質(zhì)與主峰的吸收波長相差較大校正因子～5.0范圍以時，不能通過校正因子校正，則要采用外標(biāo)法行測定。

①標(biāo)（質(zhì)照法外法定比較準(zhǔn)確，采用外標(biāo)法行測定時應(yīng)進(jìn)行相的方法學(xué)究。

A檢波的擇

檢測波長的擇測定方參照紫外-可見分光光度（中國藥2010版二部錄Ⅳ）進(jìn)行定，或采HPLC法，DAD檢器進(jìn)行測定同時考察輔料干擾等準(zhǔn)線

線性關(guān)系應(yīng)設(shè)計的測范圍內(nèi)測?？捎靡毁A備液經(jīng)精密稀釋，或分

別精密稱樣制備一系被測物質(zhì)度系列進(jìn)行測定，至少制備5個濃度。以得的響應(yīng)信號作為測物濃度函數(shù)作圖觀察是否呈線性，用最小二乘法進(jìn)線性回歸有物雜的量法

C密試

儀器精密度驗主要是察測定方在所用的試驗儀器測定結(jié)果的偏差，精密一般用偏、標(biāo)準(zhǔn)偏或相對標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。測方法取一定濃度的雜質(zhì)對照溶液，連測定次數(shù)少6次，峰面積的定結(jié)果計算相對準(zhǔn)偏差，察儀器測的。

D重復(fù)試

重復(fù)性系指同樣的操條件下，較短時間間隔內(nèi)，由同一分析人員測定所得果的精密復(fù)性測定可在規(guī)定范圍內(nèi)用9次定結(jié)果行評價，如制備3個不濃度的試，各測定次或100％的濃度水平用至少測次的結(jié)果進(jìn)行評價常用的測方法時采100%的濃度，測6，計算定結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。測方法按含量測定方法，分平行稱取份樣按外標(biāo)法測定質(zhì)的含量以雜質(zhì)含量測定果計算相標(biāo)準(zhǔn)偏差間密

中間精密度指在同一驗室，由實驗室內(nèi)部條件改變，如時間、

分析人員、器設(shè)備、定結(jié)果的密度。驗證設(shè)計方案中的變動因素般為日期分析人員、設(shè)。考察在同因素變的條件下，測定結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差。有物雜的量法測方法按含量測定的方法，分由不同的員、時間不同儀器外標(biāo)法測定樣品雜質(zhì)的含量以雜質(zhì)含測定結(jié)果算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。

F收試

回收率試驗驗證測定法的準(zhǔn)確試驗設(shè)計需考慮在規(guī)定范圍內(nèi)，制備3不同濃的試樣，各定3次，即測定次，告已知加量的回收（％）或測定結(jié)果均值與真值之差及可信限。并考察不同濃度下測定結(jié)的相對標(biāo)偏差。測方法按含量測定的方法，按樣回收率定方法，已知雜質(zhì)量的樣品中加入不同濃度的質(zhì)對照品按外標(biāo)法別測定不同濃度樣品中的測的量，算測的量加入量的百分量（即回率），以同濃度下的回收率計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏。

G雜的檢限

檢測限系指樣中的被析物能夠檢測到的最低量反映分析方法靈敏度一個重要標(biāo)；最低測限不得大于該雜質(zhì)的報告限度，保證檢出控制的雜質(zhì)。測方法取待測物質(zhì)對照品適量加流動相制成一點度的對照溶液，按倍倍稀釋法，以信比為31時應(yīng)的濃度或注入儀器的確定檢測。同時將噪比為3：1的品溶液進(jìn)樣6針，峰面積計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。

判斷結(jié)果：小檢測限度下樣品面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)，以最小檢限來確定供試品溶配制的濃作為依據(jù)有物雜的量法

H質(zhì)定限

定量限是指測雜質(zhì)能被定量測的最低量定量限體現(xiàn)了分析方法是否具靈敏的定檢測能力雜質(zhì)定量試驗，需考察方法的定量，以保證量很少的雜質(zhì)夠被準(zhǔn)確出。測方法取待測物質(zhì)對照品適量加流動相制成一點度的對照溶液，按倍倍稀釋法，以信比為10：1時相應(yīng)的濃或注入儀器的量確定檢測限。同時將信噪比為10：的樣溶液進(jìn)樣6針，以面積計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。判結(jié)果定量限濃度下樣品峰面的相對標(biāo)偏差應(yīng)≤10%。

有物雜的量法②加正子主分身對法

采用加校正子自身對法應(yīng)進(jìn)行應(yīng)雜質(zhì)的校正因子的定僅適用于知雜質(zhì)的制如果校因子在0.2～5.0的圍內(nèi)也用加校正因子主成分自對照法。

校因的義特

一般來講，定量測定中，物質(zhì)的檢量與色譜響應(yīng)值（峰面等）A之間的值稱為絕校正因子即單位響應(yīng)值（峰面積等）所對應(yīng)

的被測物質(zhì)量（濃度質(zhì)量）；某物質(zhì)i與所選的參照物質(zhì)的對校正因子之比，即為相校正因子即通常所的校正因子。但這種方法有時會因同儀器及譜條件的波動可產(chǎn)生一范圍的誤，需進(jìn)行充分的方法耐用性驗證，結(jié)合色譜定位控制等措，將誤差制在一定圍內(nèi)。

校因測的求

A測定校因子的各雜質(zhì)與主成分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對照品）應(yīng)

符合標(biāo)準(zhǔn)物（對照品的要求確定校因子的分方法應(yīng)與終確定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)方法一致，譜條件等經(jīng)篩選優(yōu)后確定，如有變更，需考慮對校正子的影響必要時重新確。C要關(guān)注影待測物UV收的各因素，如液制備所溶劑最好與最終確定的動相相同檢測波長好在特定雜質(zhì)及主成分曲線的或谷處避開吸收值急劇化波段，保證測定法具有較好的耐用性，并保持測定果的恒定有物雜的量法校因的定A單度點測定制備適當(dāng)度的特定雜質(zhì)對照品溶液和主成分對照品溶液，分進(jìn)樣測定待測樣品絕對校正因子與參照樣品絕對校正子的比，到校正因子。多濃度測定：制適當(dāng)?shù)母咧?、低三水平濃度的特定雜質(zhì)對照溶液和主分對照品溶液（蓋定量限標(biāo)準(zhǔn)限度，分別進(jìn)樣測定，同法進(jìn)行分別各計算，求均值，計算RSD得到校因子。C標(biāo)曲線法測：精密稱雜質(zhì)對照品和主成分對照品，分別制備系列溶（涵蓋定量限、標(biāo)準(zhǔn)度），分進(jìn)樣后，最小二乘法以進(jìn)樣量對響應(yīng)值（峰積等）進(jìn)線性回歸，求兩條標(biāo)準(zhǔn)線，兩曲斜率之比即為校正因子。D吸系數(shù)比值：對于UV檢器來講，兩物質(zhì)的相對正因子實上也是兩質(zhì)以流動相為溶在檢測波長的紫外吸系數(shù)E1cm1%比故可按收系數(shù)法測定法的相關(guān)技術(shù)求測定各吸收系數(shù)對照品別的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)高低三水平濃測定、吸收度介于0.30.8之間、至臺不同型號UV分光度計2份試液同時平行制備測定、臺儀器2份供液的平行定結(jié)果不超過0.5%。測定物質(zhì)的吸收系數(shù)后，經(jīng)統(tǒng)分析確定物質(zhì)吸收數(shù)，計算比值，求得校正因子。

有物雜的量法測方的擇上述各方中A和B法為簡捷，以快捷地化特定雜質(zhì)與主成分紫外吸收征的差異多用于評采用主成分自身對照法定量雜質(zhì)時否需要校。但如采用加正因子的成分自身照法定量雜質(zhì)，需將標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)賦值息轉(zhuǎn)化為正因子固化在量標(biāo)準(zhǔn)中那么校正子的準(zhǔn)確性非常關(guān)鍵，校正因子的確計算應(yīng)合更為嚴(yán)格的求，需要慮并控制算校正因子過程中的各種誤差因素以及儀器用性和色譜系的耐用性因素，以使求得的常數(shù)更為準(zhǔn)確并具代表性此時采用CD法更為適宜，如能考慮測定人員不同試驗因素的影響，會更加符合常數(shù)求算的基本要求。在采校正子定質(zhì)的候加正因定方的合性測定果準(zhǔn)性試對比究據(jù)研究據(jù)包括質(zhì)照外標(biāo)、校正子主分自對法加正因的成自身照對同多樣雜定量定果對比據(jù)作是否要正能否效正檢結(jié)的持與據(jù)。

有物雜的量法③加正子主分身對法自對法

不校正子的主成分自身對照法自身對照）是雜質(zhì)主成分的應(yīng)因子基本相同（校正因子0.9～1.1）。一情況下如雜質(zhì)與主成分的分子結(jié)構(gòu)相似，其響應(yīng)因子差別不會太。測方法稱取供試品樣品適量，適當(dāng)溶劑制成一定度的供試溶液；精密量取供試