實(shí)驗(yàn)二坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備第1頁/共13頁實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮驮?/p>

蛙類的一些基本生理活動(dòng)規(guī)律與溫血?jiǎng)游锵嗨疲S持其離體組織正?；顒?dòng)所需的理化條件比較簡(jiǎn)單，易于建立和控制。因此，在實(shí)驗(yàn)中常用蟾蜍或蛙的坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本來觀察興奮與興奮性、刺激與肌肉收縮等基本生理現(xiàn)象和過程。故制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本是生理實(shí)驗(yàn)中必須掌握的一項(xiàng)基本技能。第2頁/共13頁

實(shí)驗(yàn)對(duì)象

蟾蜍或蛙

實(shí)驗(yàn)器材和藥品

蛙板、普通剪刀、手術(shù)剪、鑷子、探針、玻璃分針、蛙釘、滴管、培養(yǎng)皿、鋅銅弓、任氏液。第3頁/共13頁實(shí)驗(yàn)方法1.破壞腦和脊髓

取蟾蜍一只，用自來水沖洗干凈。左手握住蟾蜍，用食指按壓其頭部前端，拇指按壓背部，右手持從相當(dāng)于枕骨大孔刺入顱腔，左右攪動(dòng)充分搗毀腦組織。然后將探針抽回至進(jìn)針處，再向后刺入脊椎管，反復(fù)抽插搗毀脊髓（圖1-1）。此時(shí)如蟾蜍四肢松軟，呼吸消失，表明腦和脊髓已完全破壞，否則應(yīng)按上法反復(fù)進(jìn)行。第4頁/共13頁圖1-1圖1-1破壞蟾蜍腦脊髓的方法第5頁/共13頁2.剪除軀干上部及內(nèi)臟

在骶髂關(guān)節(jié)水平以上0.1cm～1cm處剪斷脊柱，左手握住蟾蜍后肢，用拇指壓住骶骨，使蟾蜍頭與內(nèi)臟自然下垂，右手持普通剪刀，沿脊柱兩側(cè)剪除一切內(nèi)臟及頭胸部，留下后肢、骶骨、脊柱以及脊柱兩側(cè)的坐骨神經(jīng)（圖1-2）剪除過程中注意勿損傷坐骨神經(jīng)。圖1-2剪除軀干上部及內(nèi)臟圖1-2第6頁/共13頁3.剝皮

握緊脊柱斷端（注意不要握住或壓迫神經(jīng)），右手握住其上的皮膚邊緣，用力向下剝掉全部后肢的皮膚（圖1-3）。把標(biāo)本放入盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。將手及用過的剪刀、鑷等全部手術(shù)器械洗凈，再進(jìn)行下面步驟。圖1-3第7頁/共13頁4.分離兩腿

用鑷子夾住脊柱將標(biāo)本提起，背面朝上，剪去向上突起的尾骨（注意勿損傷坐骨神經(jīng)）。然后沿正中線用剪刀將脊柱和恥骨聯(lián)合中央辟開兩側(cè)大腿，并完全分離。將兩條腿浸入任氏液的培養(yǎng)皿中。5.制作坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本

取一蛙腿置于蛙板上的玻璃板上。第8頁/共13頁（1）游離坐骨神經(jīng)

將腿標(biāo)本腹面朝上放置，用玻璃針沿脊柱旁游離坐骨神經(jīng)，將坐骨神經(jīng)連同2～3節(jié)脊椎骨用粗剪刀從脊柱上剪下來。再將標(biāo)本背面朝上放置，把梨狀肌及其附近的結(jié)締組織剪去。循坐骨神經(jīng)溝（股二頭肌與半膜肌之間的裂縫處），找出坐骨神經(jīng)的大腿段（圖1-4）。用玻璃針仔細(xì)剝離游離至腘窩，然后剪去從脊柱根部至腘窩的所有坐骨神經(jīng)分支。圖1-4第9頁/共13頁（2）完成坐骨神經(jīng)小腿標(biāo)本

將游離干凈的坐有神經(jīng)搭于腓腸肌上，在膝關(guān)節(jié)周圍剪掉全部大腿肌肉，并用普通剪刀將股骨刮干凈，然后在股骨中部剪去上段股骨（保留足夠的股骨斷端，用于固定），保留的部分就是坐骨神經(jīng)小腿標(biāo)本。（3）完成坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本

將上述坐骨神經(jīng)小腿標(biāo)本在跟腱處穿線結(jié)扎后，于結(jié)扎處遠(yuǎn)端剪斷跟腱。游離腓腸肌至膝關(guān)節(jié)囊將小腿其余部分剪掉，這樣就制得一個(gè)具有附著在股骨上的腓腸肌并帶有支配腓肌的坐骨神經(jīng)的標(biāo)本(圖1-5)。第10頁/共13頁6.檢查標(biāo)本興奮性

用經(jīng)任氏液潤(rùn)濕的鋅銅弓輕輕接觸一下坐骨神經(jīng)，如腓腸肌發(fā)生迅速而明顯的收縮，則表明標(biāo)本的興奮性良好，即可將標(biāo)本放在盛有任氏液的培養(yǎng)皿中，以備實(shí)驗(yàn)用。若無鋅銅弓，亦可用中等強(qiáng)度單個(gè)電刺激作上述測(cè)試。圖1-5第11頁/共13頁

實(shí)驗(yàn)要求

掌握制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的技能，并獲得興奮性良好的標(biāo)本。注意事項(xiàng)

1.操作過程中，勿污染、壓榨、損傷、過度牽拉