細胞工程植物組織培養(yǎng)植物體細胞雜交動物細胞培養(yǎng)動物細胞融合單克隆抗體技術胚胎移植核移植植物細胞工程技術動物細胞工程技術所采用技術的理論基礎植物細胞工程通常采用的技術手段植物組織培養(yǎng)植物體細胞雜交植物細胞的全能性植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)

燒傷病人的治療通常是取燒傷病人的健康皮膚進行自體移植，但對于大面積燒傷病人來講，健康皮膚很有限，請同學們想一想如何來治療該病人？

許多動物的細胞能夠分泌蛋白質(zhì),如抗體等.但是,單個細胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)量是很少的,怎樣才能獲得大量的分泌蛋白呢?一、動物細胞培養(yǎng)條件P461、無菌、無毒的環(huán)境

（添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）2、營養(yǎng)（葡萄糖、氨基酸、微量元素、無機鹽、促生長因子、動物血清、血漿等。）3、溫度和PH

36.5+（-）0.5度,7.2-7.44、氣體環(huán)境：

O2和CO2（95%空氣和5%CO2

）保證細胞順利的生長增殖二、動物細胞培養(yǎng)概念P441、概念：2、目的：3、理論基礎：細胞增值獲得細胞和細胞產(chǎn)物

就是從動物機體內(nèi)取出相關的組織，將它分散成單個細胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖。三、動物細胞培養(yǎng)過程P44-46動物胚胎或幼齡動物的組織、器官胰蛋白酶剪碎單個細胞加培養(yǎng)液制成細胞懸浮液

原代培養(yǎng)細胞增殖去掉組織間蛋白

傳代培養(yǎng)胰蛋白酶10代細胞50代細胞50代以后核型不變核型改變遺傳物質(zhì)改變?nèi)?、動物細胞培養(yǎng)過程：四、動物細胞培養(yǎng)技術的應用P47大規(guī)模生產(chǎn)有重要價值的生物制品，如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等為基因工程提供受體細胞用于檢測有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性科學家培養(yǎng)正?；蚋鞣N病變的細胞，用于生理、病理、藥理等方面的研究。獲得細胞或細胞產(chǎn)物細胞的全能性植物體培養(yǎng)結(jié)果快速繁殖、培育無病毒植株等培養(yǎng)目的葡萄糖、動物血清蔗糖、植物激素培養(yǎng)基特有成分液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基性質(zhì)細胞增殖原理動物細胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)比較項目植物細胞和動物細胞培養(yǎng)的比較細胞群體1、動物細胞培養(yǎng)的正確過程是A．原代培養(yǎng)—→傳代培養(yǎng)—→細胞株—→細胞系B．原代培養(yǎng)—→傳代培養(yǎng)—→細胞系—→細胞株C．傳代培養(yǎng)—→細胞系—→原代培養(yǎng)—→細胞株D．原代培養(yǎng)—→細胞系—→傳代培養(yǎng)—→細胞株2、動物細胞培養(yǎng)與植物細胞培養(yǎng)的重要區(qū)別在于A．培養(yǎng)基不同B．動物細胞培養(yǎng)不需要在與菌條件下進行C．動物細胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細胞不能D．動物細胞能大量培養(yǎng)，而植物細胞只能培養(yǎng)成植株3、下列有關動物細胞培養(yǎng)的敘述，正確的是A．動物細胞培養(yǎng)的目的是獲得大量的細胞分泌蛋白B．細胞遺傳物質(zhì)的改變發(fā)生于原代培養(yǎng)過程中C．在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細胞從瓶壁上脫離，制成懸浮液D．動物細胞培養(yǎng)液中通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、生長素和動物血清等4、動物細胞培養(yǎng)技術的用途有

①生產(chǎn)有價值的生物制品，如病毒疫苗、干擾素等②生產(chǎn)基因工程技術中所用的受體細胞③可以用于檢測有毒物質(zhì)④培養(yǎng)的各種細胞可直接用于生理、病理、藥理等方面的研究

A．①②B．①②③C．②③④D．①②③④

(1)容器A中放置的是動物器官或組織。它一般取自＿＿＿＿＿＿＿＿＿

(2)容器A中的動物器官或組織首先要進行的處理是＿＿，然后用＿＿＿＿＿酶處理，這是為了使細胞分散開來。這樣做的目的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿

(3)培養(yǎng)首先在B瓶中進行，這時的細胞培養(yǎng)稱為＿＿＿＿。

(4)為了把B瓶中的細胞分裝到C瓶中，用＿＿＿＿＿處理，然后配置成＿＿＿＿＿，再分裝。

(5)有少數(shù)的細胞能存活下來，繼續(xù)傳下去，一般能傳到40—50代，這種傳代細胞叫做＿＿＿＿＿。這種細胞的遺傳物質(zhì)與前面的細胞＿＿＿（相同，不同）。（6）這種細胞傳至50代后一般不能再傳，但有少數(shù)細胞遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，帶有

細胞的特征，有可能在培養(yǎng)條件下無限制的傳下去。

胚胎或幼齡動物組織器官剪碎胰蛋白使每個細胞都能與培養(yǎng)液接觸原代培養(yǎng)胰蛋白酶懸浮液細胞株相同癌動物體細胞核移植技術和克隆動物動物體細胞核移植概念:將動物的一個細胞的細胞核，移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新胚胎最終發(fā)育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物核移植胚胎細胞核移植體細胞核移植（難度高）受體細胞：MⅡ期的卵母細胞１、動物的克隆與植物克隆一樣嗎？不２、用動物體細胞進行克隆的過程,其實際操作過程是什么？動物克隆過程的實際是細胞核移植３、閱讀課本P48，簡述高產(chǎn)牛體細胞核移植過程

思考題１、核在進行體細胞核移植之前，為何要去掉受體卵母細胞的核？為使核移植動物的遺傳物質(zhì)全部來自有利用價值的動物提供的細胞。２、用于核移植的供體細胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細胞，為什么？10代以內(nèi)的細胞保持一般保持正常二倍體的核型，未突變3、細胞核移植生產(chǎn)的克隆動物是對體細胞供體動物進行了100%的復制嗎？為什么？不是，克隆動物絕大部分DNA來自供體細胞核，但核外還有少部分DNA（如線粒體DNA）來自受體卵母細胞克隆動物的研究意義1.克隆動物作為生物反應器，生產(chǎn)醫(yī)用蛋白2.改良動物品種3.治療人類疾病，作為供體4.保護瀕危動物體細胞核移植技術存在的問題：許多克隆動物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷，如體型過大，異常肥胖，發(fā)育困難，臟器缺陷，免疫失調(diào)等。動物細胞融合與單克隆抗體如果將牛的細胞與植物細胞雜交，得到綠色的小奶牛，那豈不是只要曬曬太陽就可以擠出牛奶啦！動物細胞也能融合嗎？動物細胞融合1.定義：2.原理：3.融合方法：4.意義：5.應用：細胞膜具有流動性生產(chǎn)單克隆抗體1、動物細胞融合過程不同DNA的兩個細胞滅活病毒誘導細胞融合融合后的細胞進行有絲分裂主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株用途物理、化學方法（同左）滅活的病毒物理（離心、振動、電刺激）化學（聚乙二醇）誘導方法使細胞分散后誘導細胞融合去除細胞壁后誘導原生質(zhì)體融合細胞融合的方法細胞膜的流動性細胞膜的流動性、植物細胞全能性原理動物細胞融合植物體細胞雜交比較項目植物、動物細胞融合的比較設計方案：一個B淋巴細胞－－只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細胞－－能無限增殖如何獲得化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體？雜種細胞二、單克隆抗體1.傳統(tǒng)獲取抗體方法：缺點：反復注射，血清中獲?、佗冖蹌游锛毎诤霞夹gB、BB、B瘤、瘤瘤、瘤只有雜交細胞才能活動物細胞培養(yǎng)單克隆抗體制備過程獲得產(chǎn)生相應抗體的B淋巴細胞2.制備過程：①獲取效應B細胞，骨髓瘤細胞通過什么方法獲得效應B細胞？怎樣能得到足夠多的骨髓瘤細胞？②人工誘導融合：關鍵：方法：結(jié)果：③用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞此細胞特點：體外進行細胞培養(yǎng)膜的融合BBBB瘤瘤瘤瘤①迅速大量增值②產(chǎn)生專一抗體④克隆雜交細胞，再篩選，目的：⑤體外或體內(nèi)克隆⑥提取單克隆抗體3.單克隆抗體優(yōu)點：篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞①特異性強②靈敏度高③可以大量制備4.單克隆抗體的應用：

①在基礎理論研究中具有重要意義

②在疾病診斷、治療和預防方面，具有特異性高、靈敏度高等優(yōu)越性。③生物導彈附錄資料:不需要的可以自行刪除常見職業(yè)病簡介

塵肺病一、塵肺病的概念和種類：生產(chǎn)過程中長期吸入生產(chǎn)性粉塵所引起的以肺組織纖維化為主的疾病稱塵肺病。1.矽肺2.煤工塵肺3.石墨塵肺4.碳黑塵肺5.石棉肺6.滑石塵肺7.水泥塵肺8.云母塵肺9.陶工塵肺10.鋁塵肺11.電焊工塵肺12.鑄工塵肺13.根據(jù)《塵肺病診斷標準》和《塵肺病理診斷標準》可以診斷的其他塵肺病二、影響粉塵致病的因素1、粉塵的理化性質(zhì)，無機粉塵中以游離二氧化硅致纖維化能力最強，游離二氧化硅含量超過10%的粉塵，稱為矽塵，是矽肺的致病因素。2、粉塵的濃度和暴露時間。3、粉塵的分散度：即粉塵粒徑的大小，粒徑越小，分散度越高。4、粉塵的硬度5、粉塵的溶解度、荷電性和爆炸性。三、粉塵的致病機理粉塵的致病機理有脂質(zhì)過氧化學說，鈣離子通道學說，免疫學說等。但無論通過何種機理，都是以下過程空氣中的粉塵→經(jīng)呼吸道進入肺泡→肺泡中的吞噬細胞吞噬矽塵顆?！鷫m粒通過不同機制對吞噬細胞發(fā)生毒作用→吞噬細胞分泌致纖維化因子→肺組織纖維化→吞噬細胞破裂→釋放出矽塵顆粒→矽塵顆粒被另一吞噬細胞吞噬→繼續(xù)發(fā)生毒作用四、塵肺病的臨床表現(xiàn)1、癥狀和體征：早期有咳嗽、咳痰、胸悶氣短、胸痛等表現(xiàn)，并進行性加重。但塵肺病人的臨床表現(xiàn)與病變程度往往不一致。2、胸部X-線表現(xiàn)：肺間質(zhì)纖維化的表現(xiàn)3、并發(fā)癥：最常見的有肺結(jié)核、肺源性心臟病、氣胸、肺部感染等。:五、塵肺病的診斷:應遵循職業(yè)病診斷原則1、有職業(yè)病診斷資質(zhì)的醫(yī)療機構(gòu)中，3名以上有診斷資質(zhì)的醫(yī)生集體診斷。2、本人提出職業(yè)病診斷申請（可以在戶口所在地、工作單位所在地和常住地職業(yè)病診斷機構(gòu)）。3、用人單位提供職業(yè)史證明材料、及以往職業(yè)衛(wèi)生檢測、健康監(jiān)護等資料。4、依據(jù)國家職業(yè)病診斷標準和病人臨床表現(xiàn)進行綜合分析。汞中毒一、汞的理化特性和接觸機會汞常溫下呈液體，表面張力大易形成很小的汞珠，易揮發(fā)，質(zhì)量大易沉積在車間空氣的底部。遇碘形成碘化汞沉淀。常用與燈具、儀表燈行業(yè)。二、汞中毒的機理和臨床表現(xiàn)1、中毒機理：空氣中的汞通過呼吸道極易吸收進入體內(nèi)，在體內(nèi)主要分布于肝臟、中樞圣經(jīng)系統(tǒng)。汞與細胞內(nèi)蛋白質(zhì)上的巰基結(jié)合，使含巰基的酶失去活性而發(fā)生中毒。2、汞中毒的臨床表現(xiàn)：1）口腔炎2）震顫：舌、指尖、眼瞼3）易興奮征三、汞中毒的防治1、改革生產(chǎn)工藝、汞作業(yè)車間地面應光滑、并在車間內(nèi)四周設溝槽、排風扇設在車間的下部、定期用碘對車間進行熏蒸。2、嚴格的健康監(jiān)護措施3、治療：二巰基丙磺酸鈉或二巰基丁二酸鈉鉛中毒鉛可通過消化道、呼吸道吸收進入體內(nèi)，職業(yè)接觸主要通過呼吸道，生活接觸主要通過消化道吸收。鉛對神經(jīng)系統(tǒng)、造血系統(tǒng)、肝臟有毒性作用，尤其是對神經(jīng)系統(tǒng)和造血系統(tǒng)。

兒童高鉛血癥和鉛中毒要依據(jù)兒童靜脈血鉛水平進行診斷。

高鉛血癥：連續(xù)兩次靜脈血鉛水平為100～199mg/L；

鉛中毒：連續(xù)兩次靜脈血鉛水平等于或高于200mg/L；并依據(jù)血鉛水平分為輕、中、重度鉛中毒。

輕度鉛中毒：血鉛水平為200～249mg/L；

中度鉛中毒：血鉛水平為250～449mg/L；

重度鉛中毒：血鉛水平等于或高于450mg/L；職業(yè)性鉛中毒的診斷：血鉛≥600mg/L刺激性氣體中毒一、刺激性氣體的種類：常見的刺激性氣體有：氨氣、氯氣、氯化氫氣體、氮氧化物、二氧化硫、三氧化硫、光氣、硫酸二甲酯、氟化物、環(huán)氧乙烷、臭氧等。二、刺激性氣體的中毒機理刺激性氣體根據(jù)其水溶性不同，高水溶性的主要作用于上呼吸道等，對上呼吸道造成刺激癥狀，如氨氣、氯化氫等。低水溶性的上呼吸道刺激性小，可進入深部呼吸道和肺泡，在肺泡內(nèi)水解，對肺泡上皮細胞造成損害，使通透性增強，肺間質(zhì)中的液體進入肺泡，造成肺水腫。三、急性刺激性氣體中毒：輕度中毒：急性氣管炎或支氣管炎中毒中毒：化學性肺炎重度重度：化學性肺水腫四：刺激性化學物所致慢性阻塞性肺疾病病2013版職業(yè)病目錄新增“刺激性化學物所致慢性阻塞性肺疾病”窒息性氣體中毒一、窒息性氣體的概念：窒息性氣體是指被機體吸入后，可使氧的供應、攝取、運輸、和利用發(fā)生障礙，使全身組織細胞得不到或不能氧，而導致組織細胞缺氧窒息的有害氣體的總稱。二、窒息性氣體的分類1、單純窒息性氣體如氮氣，甲烷，乙烷等。2、化學窒息性氣體常見有一氧化碳，硫化氫，氫氰酸等。三、窒息性氣體