1國產(chǎn)重組乙型肝炎疫苗（CHO細胞）什么是乙型肝炎？是一種由乙型肝炎病毒（HBV）感染機體后所引起的疾病。乙型肝炎病毒是一種嗜肝病毒，主要存在于肝細胞內(nèi)并損害肝細胞，引起肝細胞炎癥、壞死、纖維化。乙型病毒性肝炎分急性和慢性兩種。急性乙型肝炎在成年人中90%可自愈，而慢性乙型肝炎表現(xiàn)不一，分為慢性乙肝攜帶者、慢性活動性乙型肝炎、乙肝肝硬化等。我國目前乙肝病毒攜帶率為7.18%，其中約三分之一有反復肝損害，表現(xiàn)為活動性的乙型肝炎或者肝硬化。隨著乙肝疫苗的推廣應(yīng)用，我國乙肝病毒感染率逐年下降，5歲以下兒童的HBsAg攜帶率僅為0.96%。(2006年我國進行的乙型肝炎流行病毒調(diào)查結(jié)果)41992年與2006年HBsAg陽性率比較2010年湖北省CDC在2個市的3個縣人群中開展乙肝血清學監(jiān)測，共監(jiān)測人群700人,HBsAg陽性率為2.14%；0～4歲為0.67%,15歲以上為5.00%,15～19歲最高,為7.00%2006年調(diào)查結(jié)果表明，我國1-59人群乙肝表面抗原攜帶率為7.18%，5歲以下兒童的HBsAg攜帶率僅為0.96%

2011年全國報告發(fā)病/死亡前10位病種乙肝為何難治?乙肝病毒兩層結(jié)構(gòu)，外包一層致密堅硬的蛋白質(zhì)外殼，專門抵御藥物對他的作用，藥物對他根本無可奈何；病毒隱匿在肝細胞里面復制，藥物分子比肝細胞還大，根本無法進入到肝細胞里面，進而也不可能對病毒有絲毫的作用；

病毒有一個復制模塊，存在于細胞核中，專門誘導病毒高速復制繁殖，藥物分子連細胞都無法進入，更無法進入到細胞核中；

病毒會變性、變異。藥物一接近它它就會迅速的改變結(jié)構(gòu)和特性，從而讓藥物無法捕捉到他，逃避掉藥物對它的作用；

久之病毒會與人體基因長生鏈接，此時任何藥物都無法做到切除，必需借助其它高科技醫(yī)學手段；

病毒生命周期是90天，附著藥物分子沒有那么久的吞殺效力，一般都會被人體快速消化掉，所以殺滅病毒根本無從談起。乙肝治療新技術(shù)三大肝病突破性技術(shù)先后研發(fā)成功。最早的是日本中微子透析技術(shù)；緊隨其后，德國O3技術(shù)也震撼性問世；2011年末，我國上海復旦大學研究的治療性疫苗（乙克）也宣告三期臨床試驗效果顯著。復旦新聞文化網(wǎng)/fudannews/2011/1115/29282.html8目前乙肝疫苗接種的問題1、低無應(yīng)答率高，情況普遍，10-15%接種疫苗后無應(yīng)答。2、保護時間短，新生兒接種5微克3年后抗體陽性率約30%。3、成人應(yīng)用劑量低。4、母嬰阻斷沒有正確處理。華北制藥—金坦生物99不同劑量乙肝疫苗母嬰阻斷效果疫苗劑量母親單陽性母親雙陽性調(diào)查人數(shù)陽性人數(shù)陽性率（％）調(diào)查人數(shù)陽性人數(shù)陽性率（％）10g317121.179044.445g32593312.74612337.70合計430358.141512717.88崔富強王富珍鄭徽，接種不同劑量重組乙型肝炎疫苗（酵母）阻斷乙型肝炎病毒母嬰傳播的評價，中國計劃免疫.2007,13(4).-289-292（X2=32.616,P<0.001）X2=23.032,P<0.001乙肝疫苗預防接種常見的問題10結(jié)論:1、接種10ugX3重組HepB(酵母)阻斷HBV母嬰傳播的效果優(yōu)于5ugX3重組HepB(酵母)。2、對于母親HBsAg陽性兒童，特別是母親HBsAg和HBeAg雙陽性的兒童，主動免疫時采用10ugX3的重組HepB(酵母)為宜。6不同免疫劑量低、無應(yīng)答率比較

鄭徽,王富珍,陳園生，等.新生兒接種重組乙型肝炎疫苗（酵母）后低、無應(yīng)答率及影響因素中國計劃免疫,2007;13(4):303-305.WHO,HepatitisBpositionpaper.（X2=50.91P<0.01）無應(yīng)答標準：<10mIU/ml低應(yīng)答標準：10～100mIU/ml華北制藥—金坦生物12陳胤忠，江蘇省鹽城市CDC，《基因重組乙型肝炎疫苗用于成人的免疫程序和接種劑量的研究》，《中國計劃免疫》2005.2結(jié)果：高劑量疫苗組抗一HBsGMT和抗體高滴度分布比例均高于低劑量疫苗組；重組(CHO細胞)乙肝疫苗抗一HBsGMT高于重組(酵母)乙肝疫苗，重組(CHO細胞)乙肝疫苗10ug誘導的抗一HBsGMT顯著優(yōu)于10ug重組(酶母)乙肝疫苗。結(jié)論:對成人開展乙肝疫苗接種應(yīng)選擇高劑量的乙肝疫苗，建議選用20ug重組(CHO細胞)乙肝疫苗．并優(yōu)先選擇0、1、6個月免疫程序。13高劑量疫苗是主流疫苗中華醫(yī)學會肝病學分會、中華醫(yī)學會感染病學分會聯(lián)合制訂《慢性乙型肝炎防治指南》（2010版）建議：對成人建議接種20μgCHO或20μg重組酵母乙型肝炎疫苗。對免疫功能低下或無應(yīng)答者，應(yīng)增加疫苗的接種劑量和針次；對3針免疫程序無應(yīng)答者可再接種3針，并于第2次接種3針乙型肝炎疫苗后1~2個月檢測血清中抗-HBs。14北京疾控中心做的觀察華北制藥CHO20-10-10大連漢遜酵母10-10-10深圳康泰酵母10-5-5北京天壇酵母10-5-5

在大學新生當中做的觀察，華北CHO疫苗陽轉(zhuǎn)率最高，達到98.7%。全國肝炎疫苗研究及應(yīng)用經(jīng)驗交流會、《中國計劃免疫》2007.8151、天壇2、康泰3、大連4、華北全國肝炎疫苗研究及應(yīng)用經(jīng)驗交流會、《中國計劃免疫》2007.816由此可見劑量越高，抗體滴度越高。相同劑量，產(chǎn)生抗體滴度相近。17乙肝疫苗的種類1、血源乙肝疫苗—用無癥狀的HBsAg攜帶者的血液制成

2、基因工程乙肝疫苗—利用基因工程研制重組DNA乙肝疫苗，曾先后研制過大腸桿菌系統(tǒng)、啤酒酵母細胞系統(tǒng)、哺乳動物細胞系統(tǒng)和牛痘病毒系統(tǒng)的重組乙肝疫苗。根據(jù)生產(chǎn)系統(tǒng)：（酵母、CHO細胞）

啤酒酵母乙肝疫苗（釀酒酵母、酵母）

漢遜酵母乙肝疫苗

畢赤酵母乙肝疫苗

CHO細胞乙肝疫苗乙肝疫苗的種類3、含前S蛋白的乙肝疫苗目前臨床上應(yīng)用的血源性疫苗與基因工程疫苗，均只含HBsAg蛋白，當證實S蛋白能增強HBsAg的免疫應(yīng)答后，又注意到單純只含HBsAg蛋白的疫苗對血液透析病人與新生兒免疫效果較差時，遂生產(chǎn)出添加前S蛋白的酵母源性重組乙肝疫苗，它確能明顯地增強免疫應(yīng)答。19酵母疫苗：Engerix-B(史克)、Recombivac-B（merck）漢遜酵母：萊茵、Hepavax-Gene(綠十字韓)、

GeneVacB(印度),畢赤酵母：ShanvacB

(印度)、

Enivax-HB(印度),Euvax(LG韓國)

CHO細胞：Bio-hep-B（以色列）,

Genhevac-B（法國）,Hepacare(英國),Sci-B-vac(澳大利亞、香港、以色列)

默克2004年已經(jīng)改為生產(chǎn)CHO疫苗。現(xiàn)有的國產(chǎn)及進口基因重組乙肝疫苗20

生產(chǎn)單位疫苗名稱(種類)劑型國內(nèi)大連漢信重組乙肝苗（漢遜酵母）10μg/0.5ml/支

天壇生物重組乙肝苗（釀酒酵母）5μg/0.5ml/支10μg/0.5ml/支10μg/1.0ml/支20μg/1.0ml/支華藥金坦重組乙肝苗（CHO）10μg/0.5ml/支20μg/1.0ml/支深圳康泰重組乙肝苗（釀酒酵母）10μg/0.5ml/支20μg/1.0ml/支5μg/0.5ml/支60μg/1.0ml/支北京華爾盾重組乙肝苗（CHO）10μg/支20μg/支進口益可欣重組乙肝苗（漢遜酵母）10μg/0.5ml/支20μg/ml葛蘭素史克重組乙肝苗（釀酒酵母）10μg/0.5ml/支20μg/1.0ml/支聯(lián)合疫苗北京科興倍爾來福HA500EI.U.+HB10mg/1ml葛蘭素史克

HA720EI.U.+HB20mg/1.0ml到目前為止，有兩種規(guī)模化生產(chǎn)的基因工程乙肝疫苗：一種是CHO細胞表達的一種是酵母細胞表達的

同重組乙肝疫苗(酵母)相比，重組乙肝疫苗(CHO細胞)具有如下特點:CHO細胞表達的重組HepB是高等真核細胞表達產(chǎn)物，其天然結(jié)構(gòu)較低等的真核細胞酵母表達的HBsAg蛋白更適合人體吸收，生產(chǎn)過程中不同于酵母使用硫氰酸鹽處理，安全性好什么是重組乙型肝炎疫苗(CHO細胞)？

采用基因工程技術(shù)將無傳染性的乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的S基因片段克隆到載體，用重組載體轉(zhuǎn)染真核生物CHO細胞通過細胞培養(yǎng)、增殖、分泌出HBsAg到培養(yǎng)液中，收集分泌液，經(jīng)高速離心、純化、除菌后，加人佐劑吸附(氫氧化鋁)而制成23CHO—中華倉鼠卵巢細胞

Chinesehamsterovarycell1、工程細胞2、國外75%以上基因工程藥品由哺乳動物細胞表達,我國寥寥無幾（僅有乙肝疫苗、重組人紅細胞生成素兩個產(chǎn)品）3、產(chǎn)品活性高4、技術(shù)門檻高中國生物工程雜志2005，25（2）24《藥典》及《預防接種工作規(guī)范》

收錄品種，明確指明的常用疫苗：

CHO乙肝疫苗啤酒酵母乙肝疫苗

25CHO乙肝疫苗的優(yōu)勢CHO苗特性酵母苗特性重組CHO細胞乙肝疫苗技術(shù)為我國專有技術(shù)，國家Ⅰ類新藥用我國乙肝病毒流行株adr亞型的HBsAg基因，針對性更強由哺乳動物細胞（CHO細胞）表達，結(jié)構(gòu)均一，抗原決定簇與天然抗原相似，免疫原性高糖基化完全，穩(wěn)定性高，產(chǎn)品25℃放置3月后，效力仍然很高全人群應(yīng)用酵母技術(shù)系美國默克公司技術(shù)轉(zhuǎn)讓。流行株為adw亞型低等的真核細胞酵母菌表達，抗原結(jié)構(gòu)松散，影響其免疫原性?？贵w維持時間短產(chǎn)品無糖基化，穩(wěn)定性較差有人群限制，使用不便26快----產(chǎn)生抗體時間快中國藥品生物制品檢定所檢測，CHO疫苗第一針注射完平均第8天產(chǎn)生抗體。漢遜酵母疫苗第一針后平均第25天后產(chǎn)生抗體。

CHO8天漢遜酵母25天----中國藥品生物制品檢定所十一五課題27產(chǎn)生抗體滴度高CHO疫苗酵母疫苗28CHO疫苗的持久性數(shù)據(jù)：中國CDC病毒所在河北正定的觀察劑量：10μg人群：新生兒免疫8年后，抗體陽性率85.76%，抗體水平在18.47mIU/ml以上。----《中國計劃免疫》，2007年2月29華北疫苗與其它CHO疫苗的區(qū)別1、質(zhì)量標準最高。原液純度達到99%以上；效力>1.2有效期3年2、連續(xù)生產(chǎn)、自動化水平高。3、生產(chǎn)規(guī)模大，產(chǎn)量高。4、擴免經(jīng)驗豐富。

華北乙肝疫苗在新生兒的使用選取眾多應(yīng)用中比較代表性的幾個30中國肝炎防治基金會劉崇柏等關(guān)于“農(nóng)村貧困地區(qū)新生兒乙型肝炎疫苗扶貧工作效果分析”（中國計劃免疫2003年6月第9卷第3期）中，對中國肝炎防治基金會開展的乙型肝炎疫苗新生兒免疫扶貧項目的工作效果進行了分析。扶貧項目中使用的乙肝疫苗為北京天壇、華北制藥及深圳康泰，使用華北制藥疫苗的四個縣中，3個縣的保護率為100%，1個縣保護率為95.44%?！袊媱澝庖?003年6月第9卷第3期31河北省衛(wèi)生防疫站、中國預防醫(yī)學科學院病毒學研究所等單位曾在河北省正定縣選擇7個鄉(xiāng)做研究現(xiàn)場，對國產(chǎn)乙肝基因重組（CHO）疫苗的免疫效果進行研究，取得了良好的效果。1年內(nèi)陽轉(zhuǎn)率98.25%，3年內(nèi)陽轉(zhuǎn)率92.31%。——中華醫(yī)學雜志2002年1月第82卷第1期32

北京市衛(wèi)生防疫站、北京大興縣衛(wèi)生防疫站、北京順義區(qū)衛(wèi)生防疫站等單位曾選大興、順義地區(qū)的健康新生兒為觀察對象，進行國產(chǎn)基因重組疫苗的實驗，也證明CHO疫苗有很好的免疫效果。實驗分組為：第I組酵母苗10-5-5μg接種、第II組酵母苗5-5-5μg接種、第III組CHO苗10-10-10μg接種。3組陽轉(zhuǎn)分別為85.51%、86.44%、100%?！袊媱澝庖?000年6月第6卷第3期3334華北CHO乙肝疫苗在全國使用情況安徽、吉林、山西、河北的新生兒使用CHO乙肝疫苗。中國肝炎防治基金會采購50萬人份華北CHO乙肝疫苗，用于青海兒童。陜西查漏補種使用的是華北CHO乙肝疫苗。國家CDC工作人員接種華北CHO乙肝疫苗。北京的大學生接種華北CHO乙肝疫苗。35

謝謝附錄資料：不需要的自行刪除兒科疑難病例討論病例資料一般情況患兒，男，8月，因“發(fā)熱1天”由門診擬“上呼吸道感染”于2013年2月17日

收入院。病例資料現(xiàn)病史：

患兒于昨夜無明顯誘因下于家中出現(xiàn)發(fā)熱，體溫39.2℃左右，無咳嗽，無鼻塞，自服“小兒柴桂顆?！焙笕杂邪l(fā)熱，且喂藥后患兒嘔吐1次，非噴射性，嘔出胃內(nèi)容物，無腹瀉，無面色發(fā)紺，無抽搐，即來我院就診。

病來患兒精神偏軟，胃納一般，夜寐欠安，大小便無殊。病例資料個人史、既往史及家族史:未見明顯異常情況。病例資料體格檢查：T

39.7℃，P

122次/分

,R

28次/分，Wt

10kg，神清，精神尚可，前囟未閉，1.0cm*1.0cm，平坦，氣尚平，三凹征陰性，全身未見皮疹，淺表淋巴結(jié)未及腫大，鞏膜無黃染，外耳道無異常分泌物，鼻不塞，咽紅，雙側(cè)扁桃未見腫大，頸軟，無抵抗，兩肺呼吸音粗，未及明顯干濕性啰音，心率122次/分,律齊，未及明顯病理性雜音，腹平軟，未及包塊，肝脾肋下未及，脊椎及四肢無關(guān)節(jié)紅腫疼痛，活動自如，神經(jīng)系統(tǒng)檢查病理征未引出。病例資料入院前輔助檢查：（2013-02-17我院）血常規(guī)+CRP示W(wǎng)BC20.6G/L,N55.3%,L39.47%,HB109g/L，PLT385G/L

，CRP19MG/L。

病例資料初步診斷

急性上呼吸道感染33.47106.615121CRP(mg/L)

41091199352PLT(10^9/L)0.2360.2610.3070.318HCT

8089104105HGB(g/L)2.993.373.894.01RBC(10^12/L)

36.937.924.830.2LY%54.859.974.760.4NE%

22.211.813.624.3WBC(10^9/L)92.17

日期BRT+CRP輔助檢查

日期BRT+CRP2.262.273.043.053.07WBC(10^9/L)14.114.317.918.410.5NE%51.72738.942.623.1LY%33.953.839.839.362.8RBC(10^12/L)2.812.712.822.932.99HGB(g/L)7773787979HCT0.2240.210.2260.2340.238PLT(10^9/L)410535814818683CRP(mg/L)19.721722.4918.32<1輔助檢查

日期ESR63.10ESR(mm/h)143393101

日期肝功能63.053.10TP(60.0-83.0g/L)68.304773.18083.9ALB(34.0-54.0g/L)44.126.725.832.734.8BIB24.220.347.347.319.1輔助檢查輔助檢查病毒類：巨細胞病毒抗體IgG陽性(AU/mL)，余均陰性。輔助檢查2.21心臟B超：1.心內(nèi)結(jié)構(gòu)、房室大小、瓣膜活動及血流信號未見明顯異常；2.左心室功能測定正常；3.心包少量積液。B超測定左右冠狀動脈內(nèi)徑返回未見明顯擴張（左冠狀動脈起始段內(nèi)徑1.52mm，右冠狀動脈起始段內(nèi)徑1.81mm）3.8復查心臟B超：左冠狀動脈起始段內(nèi)徑2.5mm，右冠狀動脈起始段內(nèi)徑3.7mm輔助檢查2.21胸片：兩肺支氣管肺炎。2.25肺部CT:1.兩下肺散在斑片狀密度增高影，考慮炎癥可能；2.右側(cè)胸腔積液；3.兩側(cè)胸膜增厚。血氨、異常白細胞形態(tài)、免疫球蛋白類、T細胞+NK+B細胞、ANA譜、血培養(yǎng)（兩次）、二便常規(guī)、腦電圖：