..jz*jz*.輸血相容性檢測室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程【目 的】標(biāo)準(zhǔn)輸血科各級檢驗(yàn)人員室內(nèi)質(zhì)控操作程序，確保檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確、牢靠?！具m用范圍】適用于輸血相容性檢測工程?！韭?責(zé)】輸血科全體員工均遵守執(zhí)行?！惨弧?ABO、RhD血型室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程【檢驗(yàn)原理】選擇型別的紅細(xì)胞和血清，依據(jù)其與在用試劑標(biāo)準(zhǔn)血清：抗A、抗B、抗D、ABO血型反定型紅細(xì)胞及ABO標(biāo)本一樣的試劑和方法進(jìn)展檢測，以監(jiān)控試驗(yàn)室進(jìn)展ABO、RhD血型檢測過程中應(yīng)用的試劑、設(shè)備及試驗(yàn)流程，并評估試驗(yàn)結(jié)果的有效性?！局饕噭┙M成】1A1RhD〔+〕紅細(xì)胞2B型RhD〔+〕紅細(xì)胞3A4B血清5O型RhD〔+〕紅細(xì)胞6RhD〔-〕紅細(xì)胞血型鑒定試劑：標(biāo)準(zhǔn)血清：抗A，抗B，抗DABOAc，Bc，OcABO【主要儀器】卡式專用離心機(jī)【檢驗(yàn)方法】首先將質(zhì)控品、標(biāo)準(zhǔn)血清及ABO操作步驟按不同檢驗(yàn)方法〔平板法、試管法、微柱凝膠法〕具體如下：平板法：在玻片上〔或紙片上〕按表1加樣各1滴〔50ul〕，混勻〔直徑約20mm大小〕，前后緩慢搖擺玻片，21395mm×12mm或75mm×12mm1加樣各150ul1000rpm時(shí)間1分鐘或轉(zhuǎn)速3400rpm時(shí)間15秒〕，判定結(jié)果，并記錄。表1 平板法、試管法ABO及RhD血型室內(nèi)質(zhì)控加樣表抗A+樣本抗B+樣本抗D+樣本4%Ac+樣本4%Bc+樣本4%Oc+樣本111333抗A+樣本抗B+樣本抗D+樣本4%Ac+樣本4%Bc+樣本4%Oc+樣本222444抗抗A+樣本 抗B+樣本5 5抗D+樣本5.抗D+樣本6柱凝膠法：取4張待檢ABO1分別參與第1張卡的1-3孔中各1滴〔50ul〕，將樣本2分別參與第2張卡的1-3孔中各1滴〔50ul〕，將樣本5分別參與第3張卡的1-31滴〔50ul643孔內(nèi)。使用卡式專用離心機(jī)離心，取出，肉眼判定結(jié)果，并記錄?！窘⒖贾怠渴状问褂觅|(zhì)控品或不連續(xù)使用時(shí)，需要連續(xù)做三天試驗(yàn)，結(jié)果全都，方可定為參考值；更換不同批號質(zhì)控品時(shí)，需舊質(zhì)控品同時(shí)做，連續(xù)兩天，舊批號質(zhì)控品在控，批號質(zhì)控品質(zhì)控品結(jié)果全都，可確定參考值；更換試劑時(shí)，需舊批號試劑同時(shí)做兩次質(zhì)控品，兩次結(jié)果全都，可確定參考值；不同儀器或不同方法學(xué)均要單獨(dú)定值。質(zhì)控規(guī)那么：按“輸血相容性檢測的室內(nèi)質(zhì)控程序“執(zhí)行?！臼Э嘏卸ā筷栃越Y(jié)果與預(yù)期結(jié)果比較消滅超過1+凝集強(qiáng)度的差異，或陰性質(zhì)控消滅陽性結(jié)果時(shí)，均視為失控。失控緣由分析：按“輸血相容性檢測的室內(nèi)質(zhì)控程序“執(zhí)行。失控解決方案：按“輸血相容性檢測的室內(nèi)質(zhì)控程序“執(zhí)行?！居涗洷砀瘛俊拜斞嗳菪詸z測室內(nèi)質(zhì)控參考值登記表“ SXK-JL65“輸血相容性檢測室內(nèi)質(zhì)控登記表“………………SXK-JL66SXK-JL67【本卷須知】室內(nèi)質(zhì)控品、標(biāo)準(zhǔn)血清、標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞保存在2～8℃，嚴(yán)禁在室溫長期存放。用后剩余質(zhì)控品不宜與質(zhì)控品混合，以防污染，不同批號質(zhì)控品不得混用。紅細(xì)胞質(zhì)控品：輕拿輕放，防止猛烈震蕩；假設(shè)發(fā)生凝集，出血菌落或嚴(yán)峻溶血，不得使用；假設(shè)消滅稍微溶血可用生理鹽水對其進(jìn)展洗滌，重懸浮后使用?！緟⒖假Y料】....jz*jz*長春愽迅生物技術(shù)“ABO、RhD血型檢測質(zhì)控品〔微柱凝膠法〕說明書“長春愽迅生物技術(shù)“ABO、RhD血型檢測卡〔微柱凝膠法〕說明書“上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司“抗A抗B血型定型試劑〔單克隆抗體〕說明書“D〔IgM+IgG〕血型定型試劑〔單克隆抗體〕說明書“〔二〕不規(guī)那么抗體篩檢室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程【檢驗(yàn)原理】選擇血清，標(biāo)本其與在用試劑抗人球蛋白檢測卡〔微柱凝膠〕中的陽性及陰性結(jié)果，通過每天或每批與待檢標(biāo)本一樣的試劑和方法進(jìn)展檢測，以監(jiān)控試驗(yàn)室進(jìn)展不規(guī)那么抗體篩檢過程中應(yīng)用的試劑、設(shè)備及試驗(yàn)流程，并評估試驗(yàn)結(jié)果的有效性?！局饕噭┙M成】質(zhì)控品：樣本1 O型血清樣本2 IgG型抗D〔+〕AB血清不規(guī)那么抗體篩檢試劑：抗人球蛋白不規(guī)那么抗體篩檢卡〔微柱凝膠〕Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ抗體篩檢紅細(xì)胞【主要儀器】 卡式專用離心機(jī)【檢驗(yàn)方法】 微柱凝膠法，具體操作步驟如下：將質(zhì)控品、抗體篩檢紅細(xì)胞從冰箱取出后平衡至室溫。取1張抗人球蛋白不規(guī)那么抗體篩檢卡做好標(biāo)記。將Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ抗體篩檢細(xì)胞用低離子強(qiáng)度鹽溶液稀釋至0.8%，對應(yīng)參與上述檢測卡1～650ul/管。31，后32，50ul/管。37℃孵育器中15分鐘。即刻使用卡式專用離心機(jī)離心，取出，肉眼判定結(jié)果，并記錄?！窘⒖贾怠渴状问褂觅|(zhì)控品或不連續(xù)使用時(shí)，需要連續(xù)做三天試驗(yàn)，結(jié)果全都，方可定為參考值；更換不同批號質(zhì)控品時(shí)，需舊質(zhì)控品同時(shí)做，連續(xù)兩天，舊批號質(zhì)控品在控，批號質(zhì)控品質(zhì)控品結(jié)果全都，可確定參考值；更換試劑時(shí)，需舊批號試劑同時(shí)做兩次質(zhì)控品，兩次結(jié)果全都，可確定參考值；不同儀器或不同方法學(xué)均要單獨(dú)定值。質(zhì)控規(guī)那么：按“輸血相容性檢測的室內(nèi)質(zhì)控程序“執(zhí)行。【失控判定】陽性結(jié)果與預(yù)期結(jié)果比較消滅超過1+凝集強(qiáng)度的差異，或陰性質(zhì)控消滅陽性結(jié)果時(shí)，均視為失控。失控緣由分析：按“輸血相容性檢測的室內(nèi)質(zhì)控程序“執(zhí)行。失控解決方案：按“輸血相容性檢測的室內(nèi)質(zhì)控程序“執(zhí)行。【記錄表格】“輸血相容性檢測室內(nèi)質(zhì)控參考值登記表“ SXK-JL65“輸血相容性檢測室內(nèi)質(zhì)控登記表“………………SXK-JL66SXK-JL67本卷須知室內(nèi)質(zhì)控品、抗篩細(xì)胞、保存在2～8℃，嚴(yán)禁在室溫長期存放。用后剩余質(zhì)控品不宜與質(zhì)控品混合，以防污染，不同批號質(zhì)控品不得混用。參考資料長春愽迅生物技術(shù)“不規(guī)那么抗體篩檢質(zhì)控品說明書“長春愽迅生物技術(shù)“抗人球蛋白檢測卡不規(guī)那么抗體篩檢操作說明書“長春愽徳生物技術(shù)有限責(zé)任公司“不規(guī)那么抗體檢測試劑〔人紅細(xì)胞〕使用說明書“〔三〕穿插配血室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程【檢驗(yàn)原理】分散胺介質(zhì)法：紅細(xì)胞外表帶有大量的負(fù)電荷，以防止其產(chǎn)生自發(fā)性聚攏，其懸浮在電解質(zhì)中形成Zeta電位，Zeta離子溶液降低介質(zhì)的離子強(qiáng)度，削減紅細(xì)胞四周的陽離子云，以促進(jìn)紅細(xì)胞和血清〔血漿〕中的抗體結(jié)合，其后參與分散胺溶液〔Polybrene，為高價(jià)陽離子多聚物、肝素中和劑〕，以中和紅細(xì)胞外表帶有的負(fù)電荷，使紅細(xì)胞外表帶有的負(fù)電荷，使紅細(xì)胞Zeta電位降低，縮短紅細(xì)胞之間的距離，使紅細(xì)胞產(chǎn)生非特異性的分散，最終參與懸浮液〔Resuspending〕，中和分散胺〔Polybrene〕陽離子作用，使正常的紅細(xì)胞非特異性分散散開，試驗(yàn)結(jié)果為陰性，但假設(shè)紅細(xì)胞被相應(yīng)的抗體致敏，那么會(huì)被分散胺分散，試驗(yàn)結(jié)果為陽性。微柱凝膠法：選擇的血清和相應(yīng)的細(xì)胞，標(biāo)本其與在用試劑抗人球蛋白檢測卡〔微柱凝膠〕中的陽性及陰性結(jié)果，通過每天或每批與待檢標(biāo)本一樣的試劑和方法進(jìn)展檢測，以監(jiān)控試驗(yàn)室進(jìn)展穿插配血過程中應(yīng)用的試劑、設(shè)備及試驗(yàn)流程，并評估試驗(yàn)結(jié)果的有效性。【主要試劑組成】質(zhì)控品：樣本1 AB型RhD〔+〕紅細(xì)胞樣本2 O型RhD〔+〕紅細(xì)胞樣本3 RhD〔-〕紅細(xì)胞樣本4 O血清樣本5 IgG抗DAB血清穿插配血檢測試劑：LIMPolybreneResuspending〕抗人球蛋白穿插配血檢測卡〔微柱凝膠〕【主要儀器】 卡式專用離心機(jī)【檢驗(yàn)方法】首先將質(zhì)控品、分散胺介質(zhì)從冰箱取出后平衡至室溫。操作步驟按不同檢驗(yàn)方法〔試管法、微柱凝膠法〕進(jìn)展。分散胺介質(zhì)法 為試管法，操作步驟如下：取4支〔95mm×12mm75mm×12mm〕試管做好標(biāo)記.依據(jù)組合1〔樣本4+樣本1〕、組合24+樣本2〕、組合35+樣本1〕、組合4〔樣本53150ul〕。各管參與低離子溶液〔LIM〕0.65ml，混合均勻后，各管參與分散胺〔Polybrene〕溶液2滴〔100ul〕，并混合均勻。用離心機(jī)3400rpm時(shí)間100.1ml液體。輕輕搖動(dòng)試管，目測紅細(xì)胞有無分散，如無分散，那么必需重做。最終參與懸浮液〔Resuspending〕2滴〔100ul〕，輕輕搖動(dòng)試管混合并同時(shí)觀看結(jié)果。如分散散開，表示由Polybrene引起的非特異性凝集，抗體篩檢結(jié)果為陰性。假設(shè)凝集不散開，那么為紅細(xì)胞抗原抗體結(jié)果的特異性反響，抗體篩檢結(jié)果為陽性，應(yīng)進(jìn)一步作抗體鑒定。2、微柱凝膠法操作步驟如下：取1張待檢抗人球蛋白穿插配血檢測卡〔微柱凝膠〕做好標(biāo)記。14+樣本124235+樣本145+樣本350ul。37℃孵育器中15分鐘。即刻使用卡式專用離心機(jī)離心，取出，肉眼判定結(jié)果，并記錄。【結(jié)果解釋】穿插配血室內(nèi)質(zhì)控依據(jù)其檢測作用可分為IgG組和IgM組如表2。組合質(zhì)控品組合檢測結(jié)果檢測作用表2 穿插配血室內(nèi)質(zhì)控組合質(zhì)控品組合檢測結(jié)果檢測作用組合1樣本4+樣本1+檢測IgM類抗原抗體反響組合2樣本4+樣本2-檢測IgM類抗原抗體反響組合3樣本5+樣本1+檢測IgG類抗原抗體反響組合4樣本5+樣本3-檢測IgG類抗原抗體反響【建立參考值】首次使用質(zhì)控品或不連續(xù)使用時(shí)，需要連續(xù)做三天試驗(yàn)，結(jié)果全都，方可定為參考值；更換不同批號質(zhì)控品時(shí)，需舊質(zhì)控品同時(shí)做，連續(xù)兩天，舊批號質(zhì)控品在控，批號質(zhì)控品質(zhì)控品結(jié)果全都，可確定參考值；更換試劑時(shí)，需舊批號試劑同時(shí)做兩次質(zhì)控品，兩次結(jié)果全都，可確定參考值；不同儀器或不同方法學(xué)均要單獨(dú)定值。質(zhì)控規(guī)那么：按“輸血相容性檢測的室內(nèi)質(zhì)控程序“執(zhí)行?！臼Э嘏卸ā筷栃越Y(jié)果與預(yù)期結(jié)果比較消滅超過1+凝集強(qiáng)度的差異，或陰性質(zhì)控消滅陽性結(jié)果時(shí)，均視為失控。失控緣由分析：按“輸血相容性檢測的室內(nèi)質(zhì)控程序“執(zhí)行。失控解決方案：按“輸血相容性檢測的室內(nèi)質(zhì)控程序“執(zhí)行?！居涗洷砀瘛俊拜斞嗳菪詸z測室內(nèi)質(zhì)控參考值登記表“ SXK-JL65“輸血相容性檢測室內(nèi)質(zhì)控登記表“………………SXK-JL66SXK-JL67【本卷須知】室內(nèi)質(zhì)控品保存在2～8℃，嚴(yán)禁在室溫長期存放。用后