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———R-SHM芯片除酶除熱原流程

脂質(zhì)納米粒LNPs作為mRNA遞送的首先載體。LNPs主要通過(guò)陽(yáng)離子的磷脂材料與其他輔助磷脂完成顆粒的構(gòu)建，通過(guò)RNA所帶的負(fù)電與陽(yáng)離子磷脂的正電相互吸附，可實(shí)現(xiàn)較高的包載效果，并且在體內(nèi)由低密度脂蛋白介導(dǎo)的胞吞機(jī)制可使納米粒子成功被細(xì)胞攝取，實(shí)現(xiàn)良好的細(xì)胞攝取效果。

R-SHM處方工藝篩選芯片盒，使用次數(shù)根據(jù)不同的測(cè)試條件可以＞30次*或＞100次**。

備注：

*采用處方BNT空白LNP處方測(cè)試，測(cè)試條件為1:3，總流速12ml/min,總體積為10ml，粒徑和PDI能保持一致。

**采用純乙醇測(cè)試，測(cè)試條件為1:1，總流速20ml/min,總體積為10ml，芯片無(wú)泄露。采用BNT處方，粒徑和PDI能與新芯片保持一致。

流速范圍：1ml/min-20ml/min。R-SHM芯片除酶除熱原流程

試劑75%乙醇，

0.5MNaOH溶液，

無(wú)水乙醇，

DEPC水1、芯片使用前清洗01

75%乙醇清洗用2支2.5ml注射器各取2ml75%乙醇，

調(diào)用"清洗程序的方法

(兩相比例=1:1，總體積4ml，流速12ml/min)

取15ml離心管掛上機(jī)器左邊的收集管卡槽

點(diǎn)擊軟件運(yùn)行。

02

0.5MNaOH溶液清洗用2支2.5ml注射器，

各取0.5MNaOH溶液，

重復(fù)上述操作條件清洗。

清洗后靜置1小時(shí)。

03

殘余液體排空用2支2.5ml注射器，

抽滿空氣，

插入芯片，

重復(fù)上述操作條件排空。

04

無(wú)水乙醇DEPC水用2支5ml注射器，

各取無(wú)水乙醇，DEPC水5ml，

軟件設(shè)置

（兩相比例=1:1，總體積10ml,流速12ml/min），

具體操作如上，重復(fù)清洗3次，

排空殘余液體。

清洗步驟：無(wú)水乙醇-DEPC水清洗

75%乙醇清洗

0.5MNaOH溶液清洗

殘余液體排空

無(wú)水乙醇-DEPC水清洗3次

殘余液體排空注意：溶液的抽取體積應(yīng)大于軟件設(shè)置

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