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用相差顯微鏡觀察口腔上皮細(xì)胞第1頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期六實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.了解相差顯微鏡觀察活細(xì)胞的基本原理。2.了解相差顯微鏡的特殊組件和位置。3.掌握調(diào)節(jié)相差顯微鏡的基本步驟。第2頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期六實(shí)驗(yàn)原理人的眼睛能感知光強(qiáng)弱(振幅)和顏色(波長(zhǎng))的變化,但不能感知光相位的變化?;罴?xì)胞大多數(shù)高度透明,光波通過(guò)時(shí)不被吸收,其振幅和波長(zhǎng)基本不變,即光強(qiáng)弱和顏色改很少,人眼睛幾乎感覺(jué)不到。相差顯微鏡可將光相位的變化轉(zhuǎn)變?yōu)檎穹淖兓?,從而使看不清的活?xì)胞結(jié)構(gòu)成為可見(jiàn)。第3頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期六第4頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期六相差顯微鏡原理及結(jié)構(gòu)第5頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期六相差顯微鏡的部件
第6頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期六環(huán)狀光闌
環(huán)狀光闌是在玻璃片上噴涂金屬薄膜借以擋光,只留下環(huán)形透光窄縫的光闌。它能使來(lái)自反光鏡的直射光只能從環(huán)狀部分通過(guò),形成一個(gè)空心圓筒狀的光柱,經(jīng)聚光器并照射到標(biāo)本以后,就產(chǎn)生兩部分光,一部分是直射光,另一部分是經(jīng)過(guò)標(biāo)本后產(chǎn)生的衍射光,這兩部分光經(jīng)物鏡內(nèi)相板的作用而改變了光的相位和振幅。在相差聚光器下面裝有一個(gè)轉(zhuǎn)盤(pán),盤(pán)上鑲有寬狹不同的環(huán)狀光闌,在不同光闌邊上刻有10×、20×,40×等字樣,這表示當(dāng)用不同放大倍數(shù)的物鏡時(shí),必須配合相應(yīng)的環(huán)狀光闌。第7頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期六第8頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期六麥克奧迪BA200顯微鏡第9頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期六第10頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期六第11頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期六相差顯微鏡的使用第12頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期六相差顯微鏡實(shí)驗(yàn)方法和步驟安放相差裝置取下原有聚光器和物鏡,分別安上相差聚光器和相差物鏡,并將轉(zhuǎn)盤(pán)轉(zhuǎn)到“0”標(biāo)記的位置。用10×相差物鏡調(diào)光。調(diào)節(jié)光源。
合軸調(diào)節(jié)取下原有目鏡,換上合軸調(diào)整望遠(yuǎn)鏡。上下移動(dòng)望遠(yuǎn)鏡筒,至能看清物鏡中的相板環(huán)為止。
放回目鏡取下合軸調(diào)整望遠(yuǎn)鏡,放回目鏡即可進(jìn)行觀察。更換不同放大倍數(shù)的相差物鏡時(shí),每次都要按上述方法重新調(diào)節(jié)。第13頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期六材料與試劑(一)儀器相差顯微鏡。(二)材料口腔上皮細(xì)胞,載玻片,蓋玻片,牙簽,濾紙條和指甲油。(三)試劑生理鹽水。第14頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期六實(shí)驗(yàn)步驟1.樣品制備在一張清潔無(wú)痕的載玻片上滴一小滴生理鹽水,用牙簽刮自己的口腔粘膜少許與生理鹽水混勻,蓋上清潔的蓋玻片,用濾紙條吸掉蓋片周?chē)嘤嗟乃?。?5頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月20日,星期六相差顯微鏡觀察2.將10x相差物鏡旋入光路。3.將相應(yīng)于10x相差物鏡的相差聚光器的環(huán)狀光闌移入光路中,完全打開(kāi)聚光孔徑光闌。4.將樣品置于載物臺(tái)上,用聚焦螺旋聚焦樣品。5.用柯勒照明法調(diào)節(jié)聚光器6.觀察物鏡后焦面,調(diào)節(jié)儀器使聚光器中環(huán)狀光闌的像和相差物鏡中相板的圓環(huán)互相吻合,這一步是調(diào)好相差像最重要的步驟。第16頁(yè),共17頁(yè),2023年,2月2
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