分解纖維素的細菌使用第1頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基第2頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日1．直接計數(shù)法：最常用顯微鏡直接計數(shù)法。測定微生物數(shù)量的方法：第3頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日2．間接計數(shù)法：最常用稀釋平板計數(shù)法。

第4頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日第5頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日第6頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日閱讀27頁基礎(chǔ)知識部分第一、二段，回答下列問題：1.纖維素在生物圈的分布狀況？纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)。植物的根、莖、葉等器官都含有大量的纖維素。其中棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物。一、纖維素和纖維素酶2.纖維素酶的組成及作用？纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認為它至少包括三種組分，即C1酶、

CX酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。第7頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日3、纖維素的分解

能分解纖維素的微生物有各種細菌、真菌和少數(shù)放線菌。方法：濾紙崩潰法4、纖維素酶活性的測定實驗：第8頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日下列生物能分解纖維素的是（）①人②兔③牛④蘑菇⑤纖維桿菌A、①②③④⑤B、②③⑤C、②③④⑤D、③⑤C第9頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日二、纖維素分解菌的篩選1.纖維素分解菌的篩選方法剛果紅染色法：

這種方法能夠通過顏色反應(yīng)直接對微生物進行篩選閱讀課本第28頁的相關(guān)部分，回答下列問題：第10頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日2.纖維素分解菌的篩選方法的原理

剛果紅是一種染料，它可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不和纖維二糖、葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后剛果紅—纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解為中心的透明圈。這樣我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。第11頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日練一練：1.下列關(guān)于纖維素酶的說法，錯誤的是A.纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括三種B.纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C.纖維素酶可用于去掉植物的細胞壁D.葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖第12頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日練一練：1.下列關(guān)于纖維素酶的說法，錯誤的是A.纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括三種B.纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C.纖維素酶可用于去掉植物的細胞壁D.葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖第13頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日2.利用剛果紅法可以篩選出纖維素分解菌，下列說法錯誤的是A.剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物B.剛果紅能與纖維二糖形成紅色復(fù)合物C.剛果紅不能與葡萄糖形成紅色復(fù)合物D.若培養(yǎng)基上產(chǎn)生了透明圈，則說明已篩

選出了纖維素分解菌第14頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日三、實驗操作土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落第15頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日土壤取樣①取樣環(huán)境富含纖維素的環(huán)境中

由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系，在富含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含量相對提高，因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。②原因第16頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日土壤取樣③實例：樹林中多年落葉形成的腐殖土，多年積累的枯枝敗葉等。④討論:如果找不到合適的環(huán)境，可將濾紙埋在土壤中，將濾紙埋在土壤中有什么作用？你認為濾紙應(yīng)埋進土壤中多深？

將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對集中，實際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將濾紙埋于深約10cm左右的土壤中。第17頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日1.選擇培養(yǎng)的目的：增加纖維素分解菌的濃度，以確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物選擇培養(yǎng)第18頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日參照課本29頁旁欄中的比例配置，回答下列問題a.旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基？為什么？b.這個培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用？如果具有，是如何進行選擇的？是液體培養(yǎng)基，原因是配方中無凝固劑有選擇作用，本配方中的碳源是纖維素，所以能分解纖維素的微生物可以大量繁殖2.制備選擇培養(yǎng)基第19頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日3.操作方法：將土樣加入裝有30ml選擇培養(yǎng)基的錐形瓶中，將錐形瓶固定在搖床上，在一定溫度下振蕩培養(yǎng)1～2天，直至培養(yǎng)液變渾濁。也可重復(fù)選擇培養(yǎng)第20頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日思考：為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物？在選擇培養(yǎng)的條件下，可以使那些能夠適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖，而那些不適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“濃縮”的作用第21頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日梯度稀釋按照課題1的稀釋操作方法，將選擇培養(yǎng)后的培養(yǎng)基進行等比稀釋，稀釋最大倍數(shù)到106第22頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上1.制備培養(yǎng)基:

參照旁欄中的比例2.涂布平板：

將稀釋度為104～106的菌懸液各取0.1ml涂布在培養(yǎng)基上，30℃倒置培養(yǎng)第23頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日挑選產(chǎn)生透明圈的菌落

挑取產(chǎn)生明顯的透明圈的菌落，一般即為分解纖維素的菌落。接種到纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上，在300C－370C培養(yǎng)，可獲得純培養(yǎng)。第24頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日剛果紅染色法方法一：先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進行顏色反應(yīng)方法二：在倒平板時就加入剛果紅思考：這兩種方法各有哪些優(yōu)點與不足？第25頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日

方法一缺點是操作繁瑣，加入剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜；優(yōu)點是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用

方法二優(yōu)點是操作簡便，不存在菌落混雜問題缺點一是由于培養(yǎng)基中還含有淀粉類物質(zhì)，可以使能產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應(yīng)；缺點二有些微生物具有降解色素的能力，它們在長時間培養(yǎng)過程中會降解剛果紅，形成明顯的透明圈，與纖維素分解菌不易區(qū)分第26頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日實驗錄像第27頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日1.在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌，符合下列哪一生物學(xué)觀點？A.生物結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)的觀點

B.生物結(jié)構(gòu)與功能整體性觀點C.生物與環(huán)境相適應(yīng)的觀點D.生物發(fā)展進化的觀點練一練：第28頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日2.從土壤中分離獲得某種微生物的步驟是①土壤取樣②梯度稀釋

③選擇培養(yǎng)④菌懸液涂布平板

⑤挑選出單個菌落A.①②③④⑤

B.①③②④⑤C.①②④③⑤D.①④②③⑤第29頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日3.有關(guān)選擇培養(yǎng)正確的敘述是A.可以增加纖維素分解菌的濃度B.可以減少纖維素分解菌的濃度C.所用培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基D.所用培養(yǎng)基是平板培養(yǎng)基第30頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日四、課題延伸

本課題對分解纖維素的微生物進行了初步的篩選，但是這只是分離純化的第一步。為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實驗，纖維素酶的測定方法一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進行定量的測定。第31頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日

4．鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中碳源為（

）

A、CMC-NaB、木聚糖C、纖維素D、裂解酶A第32頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日

5．剛果紅染色時，加入剛果紅應(yīng)在（

）

（1）制備培養(yǎng)基時（2）梯度稀釋時（3）倒平板時（4）涂布時

（5）長出菌落時

A、（1）（3）

B、（2）（5）

C、（3）（5）

D、（4）（5）C第33頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日

6．為以纖維素為唯一碳源篩選出真菌和細菌，試分析此類微生物在生態(tài)系統(tǒng)中的作用與下列哪種生物類似？（

）

A．硝化細菌B、藍藻C、蚯蚓D、兔子C第34頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日

7.有關(guān)平板劃線操作正確的是（

）

A.使用已滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿，操作過程中不再滅菌

B.打開含菌種的試管需要通過火焰滅菌，取出菌種后需要馬上塞上棉塞

C.將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線即可

D.最后將平板倒置，放入恒溫箱中培養(yǎng)

D第35頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日練一練：1、下列關(guān)于纖維素酶的說法，錯誤的是A、纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括三種B、纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C、纖維素酶可用于去掉植物的細胞壁D、葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖2、利用剛果紅法可以篩選出纖維素分解菌，下列說法錯誤的是A、剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物B、剛果紅能與纖維二糖形成紅色復(fù)合物C、剛果紅不能與葡萄糖形成紅色復(fù)合物D、若培養(yǎng)基上產(chǎn)生了透明圈，則說明已篩選出了纖維素分解菌第36頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日1、在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌，符合下列哪一生物學(xué)觀點？（）A、生物結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)的觀點B、生物結(jié)構(gòu)與功能整體性觀點C、生物與環(huán)境相適應(yīng)的觀點

D、生物發(fā)展進化的觀點C第37頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日A、可以增加纖維素分解菌的濃度B、可以減少纖維素分解菌的濃度C、所用培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基D、所用培養(yǎng)基是平板培養(yǎng)基3、有關(guān)選擇培養(yǎng)正確的敘述是（）A第38頁，共40頁，2023年，2月20日，星期日2、從土壤中