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怎樣解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)匯報(bào)如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第1頁(yè)主要內(nèi)容微生物檢驗(yàn)項(xiàng)目正常菌群與病原菌藥敏試驗(yàn)與匯報(bào)解讀經(jīng)驗(yàn)用藥與目標(biāo)用藥CLSI新改變標(biāo)本采集注意事項(xiàng)2如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第2頁(yè)細(xì)菌引發(fā)感染診療各種臨床標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng)、厭氧菌培養(yǎng)各種標(biāo)本革蘭染色血清降鈣素原(PCT)檢測(cè)腹瀉病人大便菌群失調(diào)檢測(cè)3如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第3頁(yè)真菌引發(fā)感染診療各種臨床標(biāo)本真菌培養(yǎng)真菌涂片檢驗(yàn)真菌D-葡聚糖檢測(cè)、GM試驗(yàn)?zāi)X脊液墨汁染色隱球菌莢膜抗原乳膠凝集:診療及療效監(jiān)測(cè)4如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第4頁(yè)其它病原體引發(fā)感染診療肺炎支原體抗體檢測(cè)肥大外斐反應(yīng)檢測(cè)傷寒感染抗酸染色檢測(cè)抗酸桿菌,如:結(jié)核桿菌結(jié)核熒光定量PCR檢測(cè)肺炎鏈球菌抗原測(cè)定:尿、腦脊液5如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第5頁(yè)6如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第6頁(yè)條件致病菌幾個(gè)身份病原菌:會(huì)于宿主體內(nèi)繁殖并侵入或破壞組織,引發(fā)感染微生物。患者由這類菌引發(fā)感染,用細(xì)菌匯報(bào)提醒抗生素治療,療效顯著。定植菌:(定植:細(xì)菌或真菌在人體某個(gè)部位定居下來形成相對(duì)穩(wěn)定寄生狀態(tài),不會(huì)隨外界機(jī)械沖擊而完全離開原來借居部位。)會(huì)于體內(nèi)繁殖但不會(huì)入侵或破壞組織微生物。以下現(xiàn)象提醒匯報(bào)細(xì)菌為定植菌:①用細(xì)菌匯報(bào)提醒抗生素治療,該菌消失,感染癥狀依然存在。②或是因?yàn)樵摼耗退?,臨床憑經(jīng)驗(yàn)聯(lián)適用藥,感染癥狀好轉(zhuǎn),但該菌依然存在。污染菌:留取標(biāo)本過程中,污染了非感染部位細(xì)菌。按其治療無效,屢次送檢可排除。7如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第7頁(yè)藥敏試驗(yàn)與匯報(bào)解讀
基本概念藥敏試驗(yàn)臨床價(jià)值匯報(bào)解讀與相關(guān)問題8/77如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第8頁(yè)CLSI介紹臨床最慣用到CLSI標(biāo)準(zhǔn)文件是抗菌藥品敏感性試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)文件。本文件是針對(duì)需氧菌藥敏標(biāo)準(zhǔn)指南。其主要內(nèi)容包含需氧菌紙片法和稀釋法藥敏試驗(yàn)選藥(抗菌藥品分組)、結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)(折點(diǎn))和質(zhì)量控制。CLSI依據(jù)細(xì)菌學(xué)、藥動(dòng)學(xué)和臨床資料設(shè)定并定時(shí)修訂抗生素對(duì)不一樣細(xì)菌敏感折點(diǎn),經(jīng)過折點(diǎn)將細(xì)菌分為敏感(S)、中介(I)、耐藥(R)。CLSI最新版本M100-S199如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第9頁(yè)CLSI文件中關(guān)于敏感、中介、耐藥定義CLSI.PerformanceStandardsforAntimicrobialSusceptibilityTesting;NineteenthInformationalSupplement.M100-S19ed.,28(1):21.10如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第10頁(yè)敏感:最高血藥濃度>4倍MIC,使用常規(guī)劑量有效;中介:最高血藥濃度≈MIC,加大劑量或藥品濃縮部位有效;耐藥:最高血藥濃度<MIC,無效。11如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第11頁(yè)CLSI推薦藥敏試驗(yàn)藥品分組12如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第12頁(yè)抗生素等效性與抗菌譜抗生素等效性:是指用一個(gè)相關(guān)抗生素試驗(yàn)結(jié)果預(yù)測(cè)同類抗生素體內(nèi)抗菌活性。如頭孢噻吩與其它一代頭孢含有等效性,可用頭孢噻吩結(jié)果預(yù)測(cè)其它一代頭孢。此特征允許檢測(cè)少數(shù)幾個(gè)抗生素而不影響臨床對(duì)其它抗生素廣泛選擇??咕V:是指細(xì)菌在“野生菌”狀態(tài)下能被抗生素在體內(nèi)到達(dá)有效濃度時(shí)抑制種類。這些細(xì)菌稱為對(duì)該抗生素天然敏感菌。未列在抗菌譜中細(xì)菌則為天然耐藥菌。13如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第13頁(yè)細(xì)菌耐藥性細(xì)菌耐藥性:是細(xì)菌抵抗抗菌藥品殺菌、抑菌作用一個(gè)防御能力,一個(gè)生物學(xué)表型。天然耐藥(固有耐藥):耐藥性為某種細(xì)菌固有特點(diǎn)稱細(xì)菌天然或固有耐藥性。天然耐藥非常穩(wěn)定,據(jù)此就可預(yù)測(cè)某一細(xì)菌或可能存在細(xì)菌對(duì)某種抗生素是否耐藥。取得性耐藥:因?yàn)榧?xì)菌取得耐藥基因,使原來敏感細(xì)菌變?yōu)槟退幏Q細(xì)菌取得性耐藥。取得性耐藥是當(dāng)前臨床面臨最主要耐藥問題。由天然敏感菌基因突變或取得一段基因片段,使其基因型改變而產(chǎn)生耐藥。取得性耐藥不停在改變(其改變頻率與抗生素應(yīng)用相關(guān)),不能預(yù)測(cè),需要做藥敏試驗(yàn)。14如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第14頁(yè)常見細(xì)菌天然耐藥情況馬越,李景云,金少鴻.細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)分析中應(yīng)注意問題.中國(guó)抗生素雜志,,30(12):76315如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第15頁(yè)3.匯報(bào)解讀與相關(guān)問題匯報(bào)單介紹藥敏試驗(yàn)藥品選擇特殊耐藥機(jī)制解讀陰性匯報(bào)結(jié)果解讀各種標(biāo)本陽性結(jié)果解讀相關(guān)問題與臨床可能埋怨16/77如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第16頁(yè)17如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第17頁(yè)18如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第18頁(yè)藥敏試驗(yàn)藥品選擇
藥敏試驗(yàn)藥品選擇標(biāo)準(zhǔn)代表藥品在藥敏試驗(yàn)中作用19如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第19頁(yè)藥敏試驗(yàn)藥品選擇標(biāo)準(zhǔn)代表性:所選藥品應(yīng)含有代表性及對(duì)同類藥品有提醒作用,同類藥品通常只選擇一個(gè)或幾個(gè)代表品種;預(yù)報(bào)性:選擇藥品可反抗菌藥品使用或耐藥機(jī)制有提醒作用。如金葡菌對(duì)苯唑西林耐藥提醒對(duì)全部β-內(nèi)酰胺類耐藥;革蘭陽性球菌耐慶大霉素提醒對(duì)氨基糖苷類耐藥;肺炎鏈球菌選擇苯唑西林提醒青霉素耐藥性。如大腸和克雷伯菌藥敏中選三代頭孢(頭孢他啶、頭孢噻肟)或氨曲南可提醒細(xì)菌是否產(chǎn)ESBLs;在腸球菌藥敏中選高濃度慶大霉素或鏈霉素可提醒能否采取聯(lián)適用藥方案。特殊性:選擇感染部位有較高濃度抗菌藥。如尿路感染尿液標(biāo)本可選擇呋喃妥因,中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染腦脊液可選氯霉素、頭孢呋辛等(能經(jīng)過血腦屏障)。20如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第20頁(yè)代表藥品在藥敏試驗(yàn)
中作用——代表性代表性藥品在藥敏試驗(yàn)中作用不但僅局限于該藥品本身,還代表與其相關(guān)抗菌藥品類似藥品,藥敏結(jié)果可用于解釋相關(guān)藥品頭孢孟多、頭孢尼西和頭孢呋辛亞胺培南和美洛培南環(huán)丙沙星和左氧氟沙星洛美沙星、諾氟沙星和氧氟沙星頭孢噻肟和頭孢曲松青霉素G和氨芐西林阿奇霉素、克拉霉素和紅霉素萬古霉素、替考拉寧21如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第21頁(yè)代表藥品在藥敏試驗(yàn)
中作用——預(yù)報(bào)性22如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第22頁(yè)倪語星,王金良.抗微生物藥品敏感性試驗(yàn)規(guī)范.上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,,7-8.23如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第23頁(yè)特殊耐藥機(jī)制解讀常見特殊耐藥表型ESBLs(產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶)MRS(耐甲氧西林葡萄球菌)包含MRSA(耐甲氧西林金黃色葡萄球菌)和MRSCN(耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌)BL(產(chǎn)β內(nèi)酰胺酶)HLAR(高水平氨基糖苷類耐藥腸球菌)AMPC酶碳青酶烯酶24如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第24頁(yè)特殊耐藥機(jī)制解讀CLSI要求不能報(bào)敏感抗菌藥和細(xì)菌組合CLSI.PerformanceStandardsforAntimicrobialSusceptibilityTesting;NineteenthInformationalSupplement.M100-S19ed.,28(1):23.25如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第25頁(yè)陰性匯報(bào)結(jié)果解讀陰性匯報(bào)提醒以下可能非感染性疾病感染已治愈感染未治愈,但各種原因造成病原體未檢測(cè)出來采樣運(yùn)輸不妥:標(biāo)本采集、送檢、保留不妥,造成病原菌死亡,污染菌大量增殖;抗生素影響:經(jīng)抗菌治療,標(biāo)本中含大量抗生素,病原菌受到傷害,不能正常生長(zhǎng);苛養(yǎng)菌:如嗜血桿菌、軍團(tuán)菌、淋球菌等因培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成份不佳或培養(yǎng)條件限制,造成漏檢;特殊病原體:常規(guī)培養(yǎng)無法檢測(cè)病原體如厭氧菌、結(jié)核桿菌、衣原體、支原體、病毒等。檢驗(yàn)技術(shù)受限:試驗(yàn)室條件和人員技術(shù)影響。26如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第26頁(yè)血培養(yǎng)陽性結(jié)果解讀臨床原因–病史、體征、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、影像學(xué)、病程、其它部位培養(yǎng)結(jié)果試驗(yàn)室原因–微生物判定–血培養(yǎng)陽性率(陽性瓶/總數(shù))–每套血培養(yǎng)陽性瓶數(shù)–微生物陽性檢出時(shí)間–菌株種類(如凝固酶陰性葡萄球菌)?分子分型技術(shù)(如脈沖場(chǎng)凝膠電泳)?傳統(tǒng)方法(生化、抗菌譜)27如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第27頁(yè)痰培養(yǎng)陽性結(jié)果解讀痰培養(yǎng)結(jié)果包含:涂片染色結(jié)果、分離致病菌判定結(jié)果、藥敏試驗(yàn)結(jié)果。痰涂片革蘭染色匯報(bào)內(nèi)容白細(xì)胞和鱗狀上皮細(xì)胞數(shù)量。包含白細(xì)胞和鱗狀上皮細(xì)胞數(shù)/低倍鏡、細(xì)胞內(nèi)是否含有細(xì)菌和胞內(nèi)細(xì)菌染色及形態(tài)學(xué)特征。細(xì)菌學(xué)鏡檢描述性匯報(bào)。痰標(biāo)本直接涂片目標(biāo)和意義評(píng)價(jià)標(biāo)本質(zhì)量。判別標(biāo)本是否適合做細(xì)菌培養(yǎng)。初步判定病原菌。判斷病原菌有沒有、數(shù)量及其類別。有利于初步匯報(bào)、選擇培養(yǎng)基和對(duì)培養(yǎng)結(jié)果綜合分析。28如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第28頁(yè)痰培養(yǎng)陽性結(jié)果分析常見有三種情況第一個(gè)情況:患者有經(jīng)典呼吸道感染癥狀,按細(xì)菌匯報(bào)選抗生素療效顯著這類患者痰標(biāo)本共同特征:痰涂片革蘭染色:見大量白細(xì)胞,并見白細(xì)胞吞噬或伴行大量形態(tài)一致非上呼吸道正常菌;痰培養(yǎng):生長(zhǎng)大量非上呼吸道正常菌,痰培養(yǎng)與痰涂片所見一致結(jié)論:匯報(bào)細(xì)菌為病原菌。29如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第29頁(yè)痰培養(yǎng)陽性結(jié)果分析第二種情況:患者有經(jīng)典呼吸道感染癥狀,按細(xì)菌匯報(bào)選取抗生素治療無效,改為憑經(jīng)驗(yàn)聯(lián)適用藥這類患者痰細(xì)菌檢驗(yàn)時(shí)有以下特征:痰涂片:大量白細(xì)胞,吞噬或伴行是革蘭陽性球菌(形似葡萄球菌)、革蘭染色陰陽不定小球菌或桿菌(形似厭氧菌)、出芽念珠菌,偶見革蘭陰性桿菌;痰培養(yǎng):生長(zhǎng)大量陰性桿菌,痰涂片所見大量細(xì)菌不生長(zhǎng)或少許生長(zhǎng),痰涂片鏡檢與痰培養(yǎng)結(jié)果不一致。結(jié)論:匯報(bào)細(xì)菌為定植菌30如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第30頁(yè)痰培養(yǎng)陽性結(jié)果分析第三種情況:患者感染已基本治愈,做痰檢目標(biāo)是希望得到一張陰性匯報(bào)作為停頓治療、出院憑證這類患者痰做細(xì)菌檢驗(yàn)時(shí)特征:痰涂片:顯示標(biāo)原來自上呼吸道,大量上皮細(xì)胞,大量陰性桿菌,少許白細(xì)胞。痰培養(yǎng):生長(zhǎng)大量陰性桿菌,較常見是綠膿桿菌和不動(dòng)桿菌結(jié)論:匯報(bào)細(xì)菌為定植菌。31如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第31頁(yè)痰標(biāo)本細(xì)胞學(xué)篩選標(biāo)準(zhǔn)分類細(xì)胞數(shù)/低倍鏡結(jié)果判斷白細(xì)胞鱗狀上皮細(xì)胞A>25(+++)<10(+)合格可用于細(xì)菌培養(yǎng)B>25(+++)10~25(++)尚合格可用于細(xì)菌培養(yǎng)C<10(+)>25(+++)不合格,重送標(biāo)本近年來推薦判別標(biāo)本合格簡(jiǎn)單方法是痰標(biāo)本涂片鏡檢>10個(gè)白細(xì)胞/低倍鏡,就可判斷是基本合格并可用于細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本,尤其是白細(xì)胞降低患者?!度珖?guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第2版,461頁(yè)32如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第32頁(yè)肺部細(xì)菌性感染病原診療:確定意義①血或胸液培養(yǎng)到病原菌②纖支鏡或人工氣道吸引標(biāo)本 細(xì)菌>105cfu/ml(2+)BALF(支氣管肺泡灌洗液):細(xì)菌≥104cfu/ml(1-2+)PSB(防污染樣本毛刷)、PBALF(防污染灌洗):細(xì)菌>103cfu/ml(1+)33如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第33頁(yè)肺部細(xì)菌性感染病原診療:有意義①合格痰標(biāo)本培養(yǎng)致病或條件致病菌≥3+②少許生長(zhǎng),但與鏡檢結(jié)果一致 (肺球、流感、卡他莫拉菌)③入院3天內(nèi)屢次培養(yǎng)到相同細(xì)菌34如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第34頁(yè)肺部細(xì)菌性感染病原診療:無意義①痰培養(yǎng)到上呼吸道正常菌 草鏈、表葡、非致病奈瑟菌、類白喉?xiàng)U菌等②各種病原菌少許(<+++)生長(zhǎng)③不符上述“確定”和“有意義”條款35如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第35頁(yè)尿培養(yǎng)陽性結(jié)果解讀36如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第36頁(yè)尿培養(yǎng)陽性結(jié)果解讀以下原因可使尿液中細(xì)菌數(shù)量降低,判斷結(jié)果時(shí)應(yīng)給予注意:使用抗生素治療,細(xì)菌生長(zhǎng)受到抑制;尿液稀釋,尿比重<1.003,營(yíng)養(yǎng)成份降低,細(xì)菌生長(zhǎng)遲緩;尿pH<5.0或>8.5,細(xì)菌生長(zhǎng)受阻;尿頻時(shí),膀胱內(nèi)細(xì)菌停留時(shí)間短,菌落數(shù)降低;尿道口消毒液混入標(biāo)本中,影響細(xì)菌繁殖,菌落數(shù)降低;不一樣種類細(xì)菌生長(zhǎng)速度不一樣、營(yíng)養(yǎng)要求不一樣,菌落計(jì)數(shù)有所不一樣。37如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第37頁(yè)糞便培養(yǎng)陽性結(jié)果解讀引發(fā)腹瀉原因:1.細(xì)菌感染2.食物中毒3.菌群失調(diào)38如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第38頁(yè)抗生素相關(guān)性腹瀉試驗(yàn)室診療抗生素相關(guān)性腹瀉本質(zhì)是腸道菌群失調(diào)細(xì)菌檢驗(yàn)現(xiàn)象:1.未生長(zhǎng)志賀氏菌、沙門氏菌2.未生長(zhǎng)真菌3.未生長(zhǎng)或生長(zhǎng)少許大腸桿菌4.生長(zhǎng)其它陰性桿菌或陽性球菌這種現(xiàn)象就是腸道菌群失調(diào)39如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第39頁(yè)重視原始標(biāo)本直接涂片分類血培養(yǎng)涂片痰涂片膿、分泌物涂片意義:全程導(dǎo)航40/77如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第40頁(yè)41如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第41頁(yè)42如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第42頁(yè)43如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第43頁(yè)44如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第44頁(yè)重視原始標(biāo)本直接涂片培養(yǎng)結(jié)果結(jié)合涂片判斷定植菌或致病菌尿培養(yǎng)分離出3種以上細(xì)菌,或分離出凝固酶陰性葡萄球菌、革蘭陽性棒狀桿菌等非定義為致病菌細(xì)菌,涂片未見到,應(yīng)在匯報(bào)中提醒可能是污染細(xì)菌提議結(jié)合臨床表現(xiàn)考慮結(jié)果參考價(jià)值。眼結(jié)膜拭子分離出凝固酶陰性葡萄球菌,涂片未見到,可能是污染細(xì)菌,應(yīng)提議重送標(biāo)本。前列腺液標(biāo)本分離出凝固酶陰性葡萄球菌或革蘭陽性小桿菌,涂片未見到,可能是污染細(xì)菌,應(yīng)提議重送標(biāo)本。當(dāng)涂片中見到細(xì)菌,并有細(xì)菌吞嗜現(xiàn)象存在,在培養(yǎng)時(shí)分離出該細(xì)菌可推測(cè)為致病菌。45如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第45頁(yè)相關(guān)問題2—是否直徑越達(dá)
藥品越好?答:不一定。因?yàn)椴灰粯铀幤穼?duì)同種細(xì)菌,同一藥品對(duì)不一樣細(xì)菌折點(diǎn)均可不一樣,而且若細(xì)菌產(chǎn)生一些特殊耐藥機(jī)制時(shí),即使體外敏感也應(yīng)報(bào)耐藥,另外尚需考慮藥動(dòng)學(xué)和耐受性。所以,不能單純比較直徑值而認(rèn)為直徑越大藥品就一定越好。藥敏直徑只表示一個(gè)藥品對(duì)某一株細(xì)菌抗菌作用強(qiáng)弱,直徑越大(離中介值越遠(yuǎn))說明該藥品對(duì)對(duì)應(yīng)病原菌作用越強(qiáng)。只能比較同一個(gè)藥對(duì)同一株菌,若直徑越小,可認(rèn)為其耐藥性提升。46如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第46頁(yè)相關(guān)問題3—是否全部匯報(bào)細(xì)菌均為病原菌?答:不一定。原因以下:所匯報(bào)細(xì)菌為污染菌或定植菌,細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果臨床意義大小與所取標(biāo)本相關(guān)。如為血液等無菌標(biāo)本則臨床意義較大,但即使血培養(yǎng)陽性也可能為污染菌。一些標(biāo)本易受污染如痰標(biāo)本易于受咽喉部攜帶菌污染,尿培養(yǎng)易受下尿道、尿道口借居菌污染??赡転閼?yīng)用抗菌藥后菌群交替或菌群失調(diào)。尤其是原為復(fù)數(shù)菌感染時(shí),針對(duì)優(yōu)勢(shì)菌治療一段時(shí)間后可能非優(yōu)勢(shì)上升為優(yōu)勢(shì)菌,或廣譜抗菌藥治療后可能出現(xiàn)真菌感染。有2種以上病原菌時(shí)因生長(zhǎng)速度不一樣、營(yíng)養(yǎng)要求不一樣,培養(yǎng)結(jié)果不能真實(shí)反應(yīng)病原菌種類、數(shù)量。47如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第47頁(yè)相關(guān)問題4—為何有時(shí)痰涂片結(jié)果與痰培養(yǎng)結(jié)果不一致?因?yàn)樘禈?biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)和涂片時(shí)選取部位不一致;一些快生長(zhǎng)菌所占百分比并不多,但因?yàn)樯L(zhǎng)速度快、營(yíng)養(yǎng)要求低,能在培養(yǎng)過程中快速變?yōu)閮?yōu)勢(shì)菌而掩蓋其它菌生長(zhǎng);標(biāo)本從采集到接種時(shí)間過長(zhǎng),造成部分苛養(yǎng)菌死亡,在涂片中看到只是菌殘骸而非活菌。48如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第48頁(yè)匯報(bào)方式1血培養(yǎng)三級(jí)匯報(bào)制度:1、陰性匯報(bào):培養(yǎng)兩天發(fā)初步匯報(bào):2天培養(yǎng)無細(xì)菌生長(zhǎng),繼續(xù)培養(yǎng)中;最終匯報(bào)時(shí)間為5天;2、陽性匯報(bào):機(jī)器報(bào)警當(dāng)日依據(jù)染色結(jié)果會(huì)給臨床初步形態(tài)學(xué)匯報(bào);第二天會(huì)給臨床初步藥敏匯報(bào);第三天發(fā)正式判定及藥敏匯報(bào)。49如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第49頁(yè)匯報(bào)方式2其它臨床標(biāo)本二級(jí)匯報(bào)方式:1、標(biāo)本接收當(dāng)日進(jìn)行染色,匯報(bào)臨床標(biāo)本圖片染色結(jié)果,內(nèi)容包含:白細(xì)胞、上皮細(xì)胞數(shù)量(椐此判斷標(biāo)本是否合格)、是否檢出細(xì)菌或真菌及其形態(tài)、是否有白細(xì)胞吞噬現(xiàn)象;2、盡可能在收到標(biāo)本兩天發(fā)出正式匯報(bào)(包含藥敏結(jié)果);3、胸腹水或腦脊液標(biāo)本被列為危機(jī)值匯報(bào)。50如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第50頁(yè)臨床對(duì)細(xì)菌室可能埋怨
—陽性率太低,臨床符合率差分析原因:標(biāo)本采集、送檢不規(guī)范,這是關(guān)鍵原因!不合格標(biāo)本直接造成病原菌分離率降低。操作程序不規(guī)范,未進(jìn)行直接涂片,未嚴(yán)格執(zhí)行拒收制度等也是主要原因。微生物和人體關(guān)系復(fù)雜。致病和條件致病,定植和感染等,造成細(xì)菌室判斷病原菌困難,要證實(shí)培養(yǎng)結(jié)果與感染相關(guān)性是臨床微生物檢驗(yàn)所面臨難題。已使用抗菌藥,病原菌受到傷害,不能正常生長(zhǎng)。試驗(yàn)室條件有限,苛養(yǎng)菌漏檢,常規(guī)培養(yǎng)不能檢測(cè)厭氧菌、結(jié)核桿菌、衣原體、支原體、病毒等.處理方法:拒收制度;規(guī)范操作;改進(jìn)技術(shù);加強(qiáng)溝通………51如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第51頁(yè)52如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第52頁(yè)53如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第53頁(yè)54如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第54頁(yè)CLSI新改變55/77如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第55頁(yè)56如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第56頁(yè)57如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第57頁(yè)58如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第58頁(yè)59如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第59頁(yè)60如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第60頁(yè)61如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第61頁(yè)標(biāo)本采集注意事項(xiàng)62/77如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第62頁(yè)血培養(yǎng)采集次數(shù)患者:推薦同時(shí)采集2-3套(不一樣部位)血培養(yǎng)標(biāo)本。(即雙瓶雙臂同時(shí)采集血培養(yǎng)標(biāo)本。)嬰幼兒患者:推薦同時(shí)采集2次(不一樣部位)血培養(yǎng)標(biāo)本。63如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第63頁(yè)采集部位推薦從外周靜脈采集血液標(biāo)本。不推薦動(dòng)脈血,因其診療價(jià)值沒有比靜脈血更大。不推薦靜脈留置導(dǎo)管,因其常伴有高污染率。假如必須從留置導(dǎo)管內(nèi)采血,也應(yīng)同時(shí)從外周靜脈采集另外一個(gè)血培養(yǎng)標(biāo)本以幫助陽性結(jié)果判讀提供解釋。64如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第64頁(yè)采集方法在采血之前,血培養(yǎng)瓶橡皮塞需使用70%酒精消毒并干燥。然后再進(jìn)行穿刺部位皮膚消毒。嚴(yán)格按照“酒精、含碘消毒劑、酒精”消毒步驟操作,并等候足夠消毒時(shí)間。嚴(yán)格無菌操作,不允許在皮膚消毒后用手接觸靜脈,除非帶有沒有菌手套。不推薦采血和接種血培養(yǎng)瓶更換注射器針頭。65如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第65頁(yè)血培養(yǎng)標(biāo)本運(yùn)輸采集后血培養(yǎng)瓶應(yīng)在1小時(shí)之內(nèi)送往試驗(yàn)室。血培養(yǎng)瓶在采血接種后在室溫不超出數(shù)小時(shí)。血培養(yǎng)瓶在接種前和接種后均不得冷藏或冷凍。66如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第66頁(yè)嬰幼兒血培養(yǎng)推薦同時(shí)采集2次(不一樣部位)血培養(yǎng)標(biāo)本。采血量每瓶不少于2ml。(少于病人總血容量1%)推薦采取兒童專用血培養(yǎng)瓶。67如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第67頁(yè)導(dǎo)管相關(guān)血流感染短期外周導(dǎo)管:經(jīng)過靜脈穿刺取得病人兩套外周血培養(yǎng)。無菌操作拔去導(dǎo)管并半定量培養(yǎng)。中心靜脈導(dǎo)管及靜脈留置口:最少兩套血培養(yǎng),其中最少一套采集自外周血靜脈,另一套應(yīng)該從導(dǎo)管口或VAP隔膜無菌采集,兩套血培養(yǎng)采集時(shí)間應(yīng)相近。68如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第68頁(yè)痰培養(yǎng)標(biāo)本采集與運(yùn)輸69/77如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第69頁(yè)幾個(gè)下呼吸道直接采集標(biāo)本經(jīng)氣管穿刺吸引(transtrachealaspiration,TTA)經(jīng)胸壁針刺吸引(transthoracicneedleaspiration,TNA)經(jīng)支氣管鏡采樣支氣管肺泡灌洗(bronchoalveolarlavage,BAL)經(jīng)支氣管鏡直接吸引防污染樣本毛刷(protectivespecimenbrush,PSB)開胸肺活檢(open-lungbiopsy,OLB)經(jīng)人工氣道吸引分泌物(endotrachealaspirates,ETA)70如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第70頁(yè)痰培養(yǎng)送檢次數(shù)對(duì)于普通細(xì)菌性肺炎,痰標(biāo)本送檢天天1次,連續(xù)2~3天。不提議24h內(nèi)屢次采集,除非痰液外觀性狀出現(xiàn)改變;懷疑分枝桿菌感染者,應(yīng)連續(xù)搜集3天清晨痰液送檢;懷疑軍團(tuán)菌或深部真菌感染,痰標(biāo)本理想送檢次數(shù)尚無定論。71如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第71頁(yè)尿培養(yǎng)標(biāo)本采集與運(yùn)輸72/77如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第72頁(yè)你知道嗎?尿液通常是無菌或一過性有少許微生物,不過尿道內(nèi)或尿道周圍皮膚菌群會(huì)污染尿液標(biāo)本,從而可能造成錯(cuò)誤培養(yǎng)結(jié)果。診療癥狀顯著病人(如尿急、尿頻、尿痛),一份標(biāo)本就已足夠,治療48-72小時(shí)后再采集第二份標(biāo)本。對(duì)于癥狀不顯著病人,需采集2-3份標(biāo)本。懷疑腎結(jié)核時(shí),應(yīng)連續(xù)3天采集晨尿。屢次搜集或24小時(shí)尿不能用作培養(yǎng)。申請(qǐng)單上必須注明病人癥狀是否顯著,這對(duì)于定量培養(yǎng)分析非常主要,尤其只有少許尿液標(biāo)本。室溫都有利于病原菌和污染菌會(huì)生長(zhǎng)繁殖,所以若30min內(nèi)不能及時(shí)培養(yǎng)尿液則必須冷藏,但也不能超出24小時(shí)。73如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第73頁(yè)導(dǎo)尿管尿液集尿袋內(nèi)尿液不能用作培養(yǎng);導(dǎo)尿管末端尿液也不能用于培養(yǎng),因?yàn)闃O難防止沒有尿道菌群污染。留置導(dǎo)管尿液標(biāo)本常經(jīng)過專門采樣端口采集,不能把導(dǎo)尿管與尿袋拔開后搜集尿液。采樣端口用酒精消毒;必要時(shí),可先夾住導(dǎo)尿管但不能超出30分鐘;將注射器針頭插入采樣端口,抽吸出尿液;注入無菌杯或試管中74如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第74頁(yè)糞便培養(yǎng)標(biāo)本采集與運(yùn)輸75/77如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第75頁(yè)你知道嗎?住院超出3d或入院診療不是胃腸炎患者不做常規(guī)糞便培養(yǎng)。除嬰兒和有活動(dòng)性腹瀉癥狀患者外不推薦用拭子做常規(guī)病原檢測(cè)。有腹部痙攣患者在發(fā)病6h內(nèi)采集到血便或液狀便效果最好。對(duì)于弧菌培養(yǎng)需要提出尤其申請(qǐng)。76如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第76頁(yè)腦脊液標(biāo)本采集與運(yùn)輸77/77如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第77頁(yè)腦脊液標(biāo)本采集方法以70%酒精或2%碘酊消毒背部下方,并麻醉之;然后以一特制通管針,輕輕由第三與第四腰椎間中線部位穿刺入脊髓蛛網(wǎng)膜,采集約3-5ml腦脊液于3支無菌試管中,每支試管最少1-2ml;然后馬上將第2支(或第1支)送至試驗(yàn)室。做腦脊液培養(yǎng)時(shí),提議同時(shí)做血培養(yǎng)。腰穿時(shí)必須作徹底消毒和無菌操作。78如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告兒科第78頁(yè)腦脊液標(biāo)本運(yùn)輸常溫馬上送檢,試驗(yàn)室收到標(biāo)本后應(yīng)馬上接種。腦脊液標(biāo)
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