土壤有效硅的測定A0?025mol?L-1檸檬酸浸提一硅鉬藍(lán)比色法方法提要土壤中有效硅以0.025mol?L-i檸檬酸浸提，浸提出的硅酸在一定的酸度條件下可與鉬試劑反應(yīng)生成硅鉬酸，用草酸等掩蔽劑去除磷的干擾后，硅鉬酸可被抗壞血酸等還原劑還原成硅鉬藍(lán)，在一定濃度范圍內(nèi)，藍(lán)色深淺與硅含量成正比，可進(jìn)行比色測定。適用范圍本方法適用于酸性、中性和微堿性土壤中有效硅的測定。主要儀器設(shè)備分光光度計；3.2恒溫往復(fù)式或旋轉(zhuǎn)式振蕩機(jī)，滿足180r/min的振蕩頻率或達(dá)到相同效果。試劑4.1無水碳酸鈉(Na2CO3)；檸檬酸溶液［c(C6H8O7)=0.025mol?L-1］：稱取5.25g檸檬酸(C6HgO7.H2O)溶于水中，稀釋至1L；14.3硫酸溶液［c(H2SO4)=0.6mol-L-1］：吸取16.6mL濃硫酸，緩緩加入到800mL水中，2 2 4冷卻后稀釋至1L；14.4硫酸溶液［c(H2SO4)=6mol-L-1］：量取166mL濃硫酸，緩緩加入到800mL水中，2 2 4冷卻后稀釋至1L；4.5鉬酸銨溶液［p((NH4)6Mo7O24?4H2O)=50g?L-1］：稱取50.00g鉬酸銨溶于水中,稀釋至1L；4.6草酸溶液［p(H2C2O4?2H2O)=50g?L-1］：稱取50.00g草酸溶于水中，稀釋至1L；4.7抗壞血酸溶液［p(C6H8O6)=15g"L-1］：稱取1.50g抗壞血酸(左旋，C6H8O6)，用［c6866861H2SO4)=6mol?L-1］硫酸溶液溶解并稀釋至100mL。此液需隨用隨配；2 2 44.8硅標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液［p(Si)=500Mg?mL-1］：稱取經(jīng)920°C灼燒過的二氧化硅(SiO22，優(yōu)級純)0.5347g,放入鉑坩鍋中，另取4g無水碳酸鈉于一干凈容器中，將3/4的碳酸鈉加入鉑坩鍋內(nèi)，以細(xì)圓頭玻棒（以防玻棒劃傷坩鍋）小心攪拌均勻，再用剩余的碳酸鈉擦洗玻棒并無損移入坩鍋中覆蓋在混合物表面。在920°C高溫電爐中熔融30min,取出稍冷，熔塊用熱水溶解，洗入500mL容量瓶中，定容后立即倒入塑料瓶中存放；4.9硅（Si）標(biāo)準(zhǔn)溶液［Q（Si）=25pg?mL-i］：準(zhǔn)確吸取硅標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液5.00mL于lOOmL容量瓶中，定容后搖勻，于塑料瓶中保存。分析步驟稱取過2mm孔徑篩的風(fēng)干試樣5.00g于200mL塑料瓶中，加入50.0mL0.025mol?L-1檸檬酸溶液，塞好瓶蓋搖勻，在25C?3OC的條件下，以180r/min的頻率連續(xù)振蕩2小時，取出后迅速干過濾于lOOmL塑料器皿中，棄去最初幾毫升濾液后，保留濾液待測定用。吸取上述濾液l.OOmL?5.00mL（使含硅在10pg?125pg范圍內(nèi)）于50mL容量瓶1中，用水稀釋至20mL左右，加入5mL［c（H2SO4）=0.6mol?L-1］硫酸溶液，在30C?35C2 2 4下放置15min,加5mL50g?L-1鉬酸銨溶液，搖勻后放置5min，再加入5mL50g?L-1草酸溶液和5mL15g?L-1抗壞血酸溶液，用水定容，搖勻后放置20min，1.5h內(nèi)在分光光度計上700nm波長處用1cm光徑比色皿比色測定。同時做空白試驗。以扣除空白后的吸光值查校準(zhǔn)曲線或求回歸方程得到測定液中硅的質(zhì)量濃度（Q）校準(zhǔn)曲線繪制：在試液測定的同時，分別吸取硅標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0、0.5、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL于50mL容量瓶中，用水稀釋至20mL左右，同樣品測試顯色、定容。此標(biāo)準(zhǔn)溶液硅的濃度分別為0.00、0.25、0.50、1.00、1.50、2.00、2.50pg?mL-1。搖勻后放置20min，1.5h內(nèi)在分光光度計上，用標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的零濃度調(diào)節(jié)儀器零點進(jìn)行比色，計算回歸方程或繪制工作曲線。結(jié)果計算p?V-D有效硅（Si），mg?kg-1= x1000mx103式中：p——查校準(zhǔn)曲線或求回歸方程而得測定液中硅的質(zhì)量濃度，gg?mL-1；V 測定時定容體積，50mL；D——分取倍數(shù)，加入浸提劑體積/浸提液吸取體積，50/（1?5）；103和1000 分別將gg換算成mg和將g換算為kg；m 風(fēng)干試樣質(zhì)量，go平行結(jié)果用算術(shù)平均值表示，保留二位小數(shù)。7精密度平行測定結(jié)果允許相對相差W10%。不同實驗室測定結(jié)果允許相對相差W15%。8注釋8.1酸度對硅鉬黃和硅鉬藍(lán)的生成和穩(wěn)定時間有很大影響，因此要嚴(yán)格控制酸度。8.2不同浸提劑浸出土壤有效硅的差別較大。對于我國南方水稻土來說，用pH4.0乙酸緩沖液浸提，浸出量多為30mg?kg-1?300mg?kg-1二氧化硅，用0.025mol?L-1檸檬酸浸提一般可浸提出80mg?kg-1?500mg?kg-1。8.3生成的硅鉬黃的穩(wěn)定時間受溫度影響很大，因此從加入鉬酸銨溶液到加入草酸溶1液之間的時間間距應(yīng)視溫度而定。為了保證結(jié)果重現(xiàn)性好，統(tǒng)一規(guī)定：在加入［c(^H2SO4)=0.6mol?L-1］硫酸溶液后于30°C?35°C保溫15min,加入鉬酸銨溶液后，搖勻放置5min。B.乙酸緩沖液浸提－硅鉬藍(lán)比色法方法提要經(jīng)pH4.0乙酸一乙酸鈉緩沖液浸提出的硅酸，在一定的酸度條件下可與鉬試劑反應(yīng)生成硅鉬酸，用草酸等掩蔽劑去除磷的干擾后，硅鉬酸可被抗壞血酸等還原劑還原成硅鉬藍(lán)，在一定濃度范圍內(nèi)，藍(lán)色深淺與硅含量成正比，可進(jìn)行比色測定。適用范圍本方法適用于水稻土有效硅的測定，其它中性、酸性及微堿性土壤也可參照使用。主要儀器設(shè)備分光光度計；3.2恒溫培養(yǎng)箱(控溫在60C以內(nèi))；3.3塑料瓶：200mL。試劑pH4.0乙酸一乙酸鈉緩沖液：量取49.2mL冰乙酸，加14.0g乙酸鈉，加水溶解，稀釋至1L。用1mol?L-1乙酸及1mol?L-1氫氧化鈉調(diào)至pH4.0；14.2硫酸溶液［c(H2SO4)=0.6mol?L-i］：吸取16.6mL濃硫酸，緩緩加入到800mL水中，2 2 4冷卻后稀釋至1L；14.3硫酸溶液［c(H2SO4)=6mol-L-1］：量取166mL濃硫酸，緩緩加入到800mL水中，2 2 4冷卻后稀釋至1L；4.4鉬酸銨溶液［p((NH4)6Mo7O24-4H2O)=50g-L-1］：稱取50.00g鉬酸銨溶于水中，稀釋至1L；4.5草酸溶液［p(H2C2O4?2H2O)=50g?L-1］：稱取50.00g草酸溶于水中，稀釋至1L；4.6抗壞血酸溶液［p(C6H8O6)=15g"L-1］：稱取1.50g抗壞血酸(左旋，C6H8O6)，用［c6866861(^H2SO4)=6mol?L-1］硫酸溶液溶解并稀釋至100mL。此液需隨用隨配；4.7硅標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液［p(Si)=500pg?mL-1］：準(zhǔn)確稱取經(jīng)920°C灼燒過的二氧化硅(Si022，優(yōu)級純)0.5347g,放入鉑坩鍋中，另取4g無水碳酸鈉于一干凈容器中，將3/4的碳酸鈉加入鉑坩鍋內(nèi)，以細(xì)圓頭玻棒(以防玻棒劃傷坩鍋)小心攪拌均勻，再用剩余的碳酸鈉擦洗玻棒并無損移入坩鍋中覆蓋在混合物表面。在920C高溫電爐中熔融30min,取出稍冷，熔塊用熱水溶解，洗入500mL容量瓶中，定容后立即倒入塑料瓶中存放；4.8硅(Si)標(biāo)準(zhǔn)溶液［p(Si)=25pg?mL-1］：準(zhǔn)確吸取硅標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液5.00mL于100mL容量瓶中，定容后搖勻，于塑料瓶中保存。分析步驟稱取通過2mm孔徑篩的風(fēng)干試樣10.00g于200mL塑料瓶中，加入100mL乙酸一乙酸鈉緩沖液，塞好瓶塞，搖勻，置于預(yù)先調(diào)節(jié)至40C的恒溫箱中保溫平衡5h，每隔1h搖動一次。取出，干過濾于三角瓶中，棄去最初濾液。取濾液5.00mL(含二氧化硅25pg?250pg)于50mL容量瓶中，用水稀釋至20mL1左右，加入5mL［c(H2SO4)=0.6mol?L-1］硫酸溶液，在30C?35C下放置15min,力口2 2 45mL50g?L-1鉬酸銨溶液，搖勻后放置5min，再加入5mL50g?L-1草酸溶液和5mL15g?L-1抗壞血酸溶液，加水定容，搖勻后放置20min，1.5h內(nèi)在分光光度計上700nm波長處用1cm光徑比色皿比色測定。同時做空白試驗。以扣除空白后的吸光值查校準(zhǔn)曲線或求回歸方程得到測定液中硅的質(zhì)量濃度(p)校準(zhǔn)曲線繪制：在試液測定的同時，分別吸取硅標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0、0.5、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL于50mL容量瓶中，用水稀釋至20mL左右，同樣品測試顯色、定容。此標(biāo)準(zhǔn)溶液硅的濃度分別為0.00、0.25、0.50、1.00、1.50、2.00、2.50“g?mL-i。搖勻后放置20min,1.5h內(nèi)在分光光度計上，用標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的零濃度調(diào)節(jié)儀器零點進(jìn)行比色，計算回歸方程或繪制校準(zhǔn)曲線。結(jié)果計算p?V-D有效硅(Si),mg?kg-1= x1000mx103式中：p——查校準(zhǔn)曲線或求回歸方程而得測定液中硅的質(zhì)量濃度，gg?mL-1；V 測定時定容體積，50mL；D 分取倍數(shù)，加入浸提劑體積/浸提液吸取體積，100/5；103和1000 分別將gg換算成mg和將g換算為kg；m 風(fēng)干試樣質(zhì)量，go精密度平行測定結(jié)果允許相對相差W10%。注釋8.1酸度對硅鉬黃和硅鉬藍(lán)的生