2．簡述血沉測定的方法學(xué)評價。①手工法包括魏氏法、潘氏法等：魏氏法簡便實用，ICSH推薦為血沉測定的參比方法；潘氏法與魏氏法測定相關(guān)性較好，采用手指采血，用血量少，尤其適用于兒童，但易混入組織液，目前已很少使用。手工法只能測定血沉某個時刻的最終結(jié)果，特異性差，其應(yīng)用有很大的局限性。②血沉儀可動態(tài)記錄整個血沉過程的變化，描繪出紅細胞沉降的曲線，反映了不同疾病或疾病不同階段，血沉3個沉降階段所存在的差異，為臨床分析血沉測定結(jié)果提供了新的手段。3．白細胞分類計數(shù)質(zhì)量控制中應(yīng)注意哪些影響因素?①影響白細胞分類計數(shù)準(zhǔn)確性的因素：主要是細胞在涂片中的分布不均和觀察者對細胞辨認的差異。②影響白細胞分類計數(shù)精確性的因素。③影響涂片染色效果的因素。④白細胞分類計數(shù)的參考方法：EDTA—K2抗凝靜脈血，人工制成血涂片，以Romanowsky液進行染色，使用“城墻式”移動法，油鏡下分類計數(shù)200個白細胞。當(dāng)其他分類法與此法作為標(biāo)準(zhǔn)進行比較時，需要4個熟練檢驗人員對同一張涂片各計數(shù)200個白細胞(即總數(shù)為800個細胞)后，求出平均值來作為各類白細胞的靶值。4．嗜酸性粒細胞升高的臨床意義是什么?嗜酸性粒細胞增多指成人外周血嗜酸性粒細胞>0．5×109／L。引起嗜酸性粒細胞增多的原因包括：①寄生蟲病是最常見的病因。②變態(tài)反應(yīng)性疾病是僅次于寄生蟲病的另一主要病因，見于支氣管哮喘、壞死性血管炎、藥物過敏反應(yīng)等。③皮膚病，如濕疹等。④血液病，如慢性粒細胞白血病、真性紅細胞增多癥、多發(fā)性骨髓瘤、脾切除術(shù)后、嗜酸性粒細胞白血病、霍奇金病。⑤某些惡性腫瘤，如肺癌。⑥某些傳染病，如猩紅熱急性期。⑦其他，如風(fēng)濕性疾病、腦垂體前葉功能減低癥等。⑧高嗜酸性粒細胞綜合征。5．電阻抗法血液分析儀進行血細胞計數(shù)的檢測原理是什么?根據(jù)血細胞相對非導(dǎo)電的性質(zhì)，懸浮在電解質(zhì)溶液中的血細胞顆粒在通過計數(shù)小孔時可引起電阻的變化，于是瞬間引起了電壓變化而出現(xiàn)一個脈沖信號。脈沖信號變化的程度取決于非導(dǎo)電性細胞體積的大小，細胞體積越大產(chǎn)生的脈沖振幅越高，記錄脈沖的數(shù)量就可測定細胞的數(shù)量。這些脈沖信號經(jīng)過放大、閾值調(diào)節(jié)、甄別、整形、計數(shù)及自動控制保護系統(tǒng)，最終可打印出數(shù)據(jù)報告6．試述血紅蛋白測定的主要方法及其方法學(xué)評價。①氰化高鐵血紅蛋白測定法(HiCN)為國際標(biāo)準(zhǔn)參考方法。操作簡單、顯色快且結(jié)果穩(wěn)定可靠，可檢測除SHb外的各種血紅蛋白。KCN有劇毒，且存在高白細胞和高球蛋白血癥可致試劑混濁，以及HbCO轉(zhuǎn)化較慢等問題。②十二烷基硫酸鈉(SDS)血紅蛋白測定法可替代HiCN法。SDS與Hb作用(除SHb外)，生成SDS—Hb棕紅色化合物，其吸收峰在538nm，SDS可用HiCN法定的抗凝血或溶血液，制備標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。本法操作簡單，呈色穩(wěn)定，準(zhǔn)確性和精確性符合要求，且無公害，為次選方法。SDS本身質(zhì)量差異較大，且破壞白細胞，不適用于同時有白細胞計數(shù)和Hb測定的血細胞分析儀上使用。③疊氮高鐵血紅蛋白(HiN3)測定法具有與HiCN測定法相似的優(yōu)點，顯色快而穩(wěn)定，試劑毒性僅為HiCN的1／7，但仍存在公害問題。④堿羥血紅蛋白(AHD575)測定法，試劑簡單，不含有毒劑，呈色穩(wěn)定，可用氯化血紅素作標(biāo)準(zhǔn)品。但此法在血液分析儀中的應(yīng)用受限。⑤多參數(shù)血液分析儀測Hb已逐步取代手工法，操作簡單、快速，同時可以獲得多項紅細胞的參數(shù)。其測定原理多采用HiCN法，但由于各型號儀器使用的溶血劑不同，形成Hb的衍生物不同。儀器要經(jīng)過HiCN標(biāo)準(zhǔn)液校正后，才能進行Hb測定。7．網(wǎng)織紅細胞檢測的臨床意義是什么?網(wǎng)織紅細胞計數(shù)(Ret)是反映骨髓造血功能的重要指標(biāo)。(1)判斷骨髓增生能力，判斷貧血類型：①網(wǎng)織紅細胞增多，表示骨髓造血功能旺盛。常見于溶血性貧血(尤其急性溶血)、急性失血；造血恢復(fù)期可見Ret短暫和迅速增高，是骨髓功能恢復(fù)較敏感的指標(biāo)；②網(wǎng)織紅細胞減少，表示骨髓造血功能低下，見于再生障礙性貧血、溶血性貧血、自身免疫性溶血性貧血危象。典型再生障礙性貧血，網(wǎng)織紅細胞計數(shù)常低于0．005，網(wǎng)織紅細胞絕對值低于15×109／L，為其診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。(2)評價療效，判斷病情變化：Ret是貧血患者隨訪檢查的項目之一。(3)骨髓移植后監(jiān)測骨髓造血恢復(fù)8．血沉變化的臨床意義是什么?(1)生理性增快：女性高于男性。婦女月經(jīng)期、妊娠3個月以上，以及老年人血沉常增快。(2)病理性增快可見于：①各種炎癥：感染是血沉加快最常見的原因，如急性細菌性感染；結(jié)核病、結(jié)締組織炎癥、風(fēng)濕熱等慢性炎癥于活動期血沉增快，病情好轉(zhuǎn)時血沉減慢，故血沉(ESR)可動態(tài)觀察病情變化。②組織損傷及壞死：見于較大范圍組織損傷或手術(shù)創(chuàng)傷。心肌梗死時血沉增快，而心絞痛時血沉多正常，可作為兩者鑒別指標(biāo)。③惡性腫瘤血沉增快，而良性腫瘤血沉多正常。④高球蛋白血癥。⑤貧血。⑥高膽固醇血癥。(3)血沉減慢：臨床意義較小，主要見于紅細胞明顯增多、纖維蛋白原含量嚴重減低時。血沉是較為常用而缺乏特異性的指標(biāo)，血沉常作為疾病是否活動的監(jiān)測指標(biāo)9．試述中性粒細胞病理變化的臨床意義。中性粒細胞增多指分葉核粒細胞超過70％，絕對值>7×109／L。①急性感染或炎癥是最常見的原因，以中性粒細胞為主。尤其是化膿性球菌感染。其增高程度與病原體種類、感染部位和程度以及機體的反應(yīng)性等有關(guān)。②廣泛組織損傷或壞死和急性溶血，如嚴重?zé)齻?、心肌梗死等均可見白細胞增多，以中性粒細胞為主。③急性失血，白細胞迅速增多，以中性粒細胞為主。④急性中毒。⑤惡性腫瘤、白血病，急性白血病以幼稚白血病細胞增多為主。慢性白血病以成熟的白血病細胞增高為主10．為什么血細胞分析儀對白細胞的分類結(jié)果只能作為篩檢試驗?(1)三分群血液分析儀用阻抗法的原理，依據(jù)白細胞的體積的大小，人為地將白細胞分成三群，這種分類不夠準(zhǔn)確。(2)五分類的血細胞分析儀聯(lián)合應(yīng)用光學(xué)和電學(xué)等技術(shù)的儀器，檢測同一血細胞的體積、細胞核形狀及胞質(zhì)中顆粒，在綜合分析后作出白細胞分類，這種檢測分類法雖然較電阻抗法高，但仍不能滿足臨床檢出異常細胞的需要。(3)各類型的血液分析儀尚不具有識別紅細胞、白細胞核、血小板的能力，仍不能檢出白細胞形態(tài)的病理性變化，特別是對幼稚細胞的檢測。而顯微鏡能根據(jù)血細胞與染色液特異性的結(jié)合，根據(jù)血涂片上細胞的體積、細胞核形狀及胞質(zhì)中顆粒等著色情況，進行綜合分析并能識別異常和幼稚細胞，因此，血細胞分析儀只能作為健康人血液一般檢驗的篩檢之用11．試述尿液常規(guī)分析的臨床價值。(1)泌尿系統(tǒng)疾病的診斷與療效觀察。泌尿系統(tǒng)的炎癥、結(jié)石、腫瘤、血管病變及腎移植術(shù)后發(fā)生排異反應(yīng)時，各種病變產(chǎn)物直接進入尿中，引起尿液成分變化，因此尿液分析是泌尿系統(tǒng)疾病診斷與療效觀察的首選項目。(2)其他系統(tǒng)疾病的診斷。尿液來自血液，其成分又與機體代謝有密切關(guān)系，故任何系統(tǒng)疾病的病變影響血液成分改變時，均能引起尿液成分的變化，因此可通過尿液分析協(xié)助臨床診斷。(3)安全用藥的監(jiān)護。某些藥物如慶大霉素、卡那霉素、多黏菌素B與磺胺類藥等?？梢鹉I損害，故用藥前及用藥過程中需觀察尿液的變化，以確保用藥安全。(4)職業(yè)病的輔助診斷。鉛、鎘、鉍、汞等均可引起腎損害，尿中此類重金屬排出量增多，對職業(yè)病的診斷及預(yù)防有一定意義(5)對人體健康狀態(tài)的評估。對人群進行尿液分析，可篩查有無腎、肝、膽疾病和糖尿病，以達早期診斷及預(yù)防疾病的目的12．試述糞便隱血試驗的臨床意義。糞便隱血檢查對消化道出血的診斷有重要價值。消化性潰瘍、藥物致胃黏膜損傷(如服用阿司匹林、吲哚美辛、糖皮質(zhì)激素等)、腸結(jié)核、Crohn病、潰瘍性結(jié)腸炎、結(jié)腸息肉、鉤蟲病及胃癌、結(jié)腸癌等消化道腫瘤時，糞便隱血試驗均常為陽性。故須結(jié)合臨床其他資料進行鑒別診斷。在消化性潰瘍時，陽性率為40％～70％，呈間斷性陽性。消化性潰瘍治療后當(dāng)糞便外觀正常時，隱血試驗陽性仍可持續(xù)5～7天，此后如出血完全停止，隱血試驗即可轉(zhuǎn)陰。消化道癌癥時，陽性率可達95％，呈持續(xù)陽性，故糞便隱血試驗常作為消化道惡性腫瘤診斷的一個篩選指標(biāo)。尤其對中老年人早期發(fā)現(xiàn)消化道惡性腫瘤有重要價值。此外在流行性出血熱患者的糞便中隱血試驗也有84％的陽性率，可作為該病的重要佐證。13．試述尿HCG金標(biāo)法測試原理。在纖維素膜的特定位置，分別包被單抗鼠IgG抗體(對照線)，單抗人HCG抗體(測定線)，呈上下排列，另外，試帶上還含有均勻分布的膠體金標(biāo)記人β-HCG單抗、膠體金標(biāo)記的鼠IgG抗原。檢測時因?qū)游饔媚蛞褐械腍CG與膠體金標(biāo)記的人β-HCG單抗結(jié)合，移至測定線，形成金標(biāo)記β-HCG單抗—β-HCG抗原—單抗人HCG抗體的雙抗體夾心式復(fù)合物，測試線呈現(xiàn)紫紅色。同時，金標(biāo)記鼠IgG抗原隨尿上行至單抗鼠IgG抗體，形成金標(biāo)記鼠IgG抗原與單抗鼠IgG抗體復(fù)合物，對照線呈紫紅色。1．簡述血細胞發(fā)育過程中的形態(tài)演變規(guī)律。胞體由大到小，但原始細胞比早幼粒細胞小，巨核細胞由小到大，核漿比例由大到??；胞核由大到小，成熟紅細胞胞核消失；核形由圓到凹陷到分葉，有的細胞可不分葉；核染色質(zhì)結(jié)構(gòu)由細致疏松到粗糙緊密，核染色質(zhì)顏色由淡紫色到深紫色；核膜由不明顯到明顯；核仁由顯著可見到無，胞質(zhì)量由少到多，胞質(zhì)顏色由藍到紅或由深藍到淺藍；胞質(zhì)顆粒由無到有；紅細胞在成熟過程中，胞質(zhì)不會出現(xiàn)顆粒。2．簡述再障的骨髓病理學(xué)特點。骨髓增生減退，造血組織與脂肪組織的容積百分比降低，脂肪細胞與基質(zhì)增多。粒細胞、紅細胞、巨核細胞均減少，淋巴細胞增多。間質(zhì)內(nèi)漿細胞、肥大細胞、網(wǎng)狀細胞等非造血細胞增多，并可有間質(zhì)水腫、出血甚至液性脂肪壞死3．再障的診斷標(biāo)準(zhǔn)是什么?①全血細胞減少，網(wǎng)織紅細胞絕對值減少；②一般無肝脾腫大；③骨髓至少1個部位增生減低或重度減低，骨髓小粒非造血細胞增多；④除外引起全血細胞減少的其他疾病，如PNH、MDS-RA急性造血功能停滯等；⑤一般抗貧血藥物治療無效。4．簡述溶血性貧血的共性改變。①一般貧血實驗室表現(xiàn)，正常細胞性貧血，網(wǎng)織紅細胞一般增高，血片中有特殊形態(tài)的紅細胞，類白血病反應(yīng)。骨髓有核細胞顯著增多，粒紅比例倒置。②血紅蛋白的釋放。③膽紅素代謝異常。④紅細胞壽命縮短。6．簡述凝血過程的三個階段。第一階段為血液凝血活酶的形成，第二階段為凝血酶的形成，第三階段為纖維蛋白的形成。第一階段有內(nèi)源性和外源性凝血系統(tǒng)兩個途徑。外源性凝血系統(tǒng)是由于血管壁或組織損傷后釋放因子Ⅲ，因子Ⅶ、鈣離子形成復(fù)合物，促使因子Ⅹ活化，然后形成凝血活酶。內(nèi)源性凝血系統(tǒng)是通過固相和液相激活因子Ⅻ，然后是Ⅸ-Ⅷ-Ca-PF3復(fù)合物形成，從而促使因子Ⅹ活化，形成凝血活酶7．如何早期診斷DIC。①存在可引起DIC的病因，如感染、創(chuàng)傷、腫瘤等。②有兩種以上的下列臨床表現(xiàn)：反復(fù)、嚴重或廣泛的出血；不明原因或難以糾正的休克；出現(xiàn)反映肺、腦、肝、腎等器官栓塞的癥狀和體征；原來疾病不可解釋的溶血現(xiàn)象。③實驗室檢查符合以下表現(xiàn)：血小板減少或進行性下降，F(xiàn)g含量減少，3P實驗陽性或D-二聚體升高。PT縮短或較正常對照延長3s以上8．簡述骨髓檢查的適應(yīng)證：①外周血細胞數(shù)量、成分及形態(tài)異常。②不明原因的發(fā)熱、肝腫大、脾腫大、淋巴結(jié)腫大。③不明原因的骨痛、骨質(zhì)破壞、腎功能異常、黃疸、紫癜、血沉明顯加快。④惡性血液病化療后的療效觀察。⑤其他：骨髓活檢、骨髓細胞培養(yǎng)、微生物學(xué)及寄生蟲學(xué)檢查等10．血小板在止血過程中的作用是什么?①血小板能維持正常血管壁的完整性，使其通透性減低。②通過黏附、聚集和細菌易位時，即可發(fā)生感染。5．頭孢菌素類抗生素，是否第四代頭孢就一定比第一代頭孢抗菌效果好，為什么?不一定，要看對什么細菌而言。如第一代頭孢菌素對革蘭陽性菌抗菌效果要好于第四代頭孢菌素，而第四代頭孢菌素對革蘭陰性菌抗菌能力則強于第一代頭孢菌素。6．藥敏試驗時常報告“中介”結(jié)果，你知道其臨床意義嗎?中介是介于敏感和耐藥之間的一個實驗緩沖區(qū)域，有兩層意義：一是反映在操作中可能因控制不好出現(xiàn)的結(jié)果有誤，應(yīng)重復(fù)試驗或改做MIC；二是提示高于正常給藥或在某些生理藥物濃集的部位(如尿液中喹諾酮類)時細菌可被抑制7．簡述用細菌制片和進行革蘭染色的基本步驟。制片：取生理鹽水一滴，置玻片上，用接種環(huán)挑取菌落，將細菌放在生理鹽水內(nèi)研勻成薄的菌膜后，自然干燥，并經(jīng)火焰固定。染色：①初染加結(jié)晶紫染于涂片上，染1min后，用水洗去染液。②媒染加碘液染1min，水洗。③脫色加95％乙醇，不時搖動約30s，至無紫色脫落為止，水洗。④復(fù)染加稀釋石炭酸復(fù)紅染30s，水洗，干后鏡檢。8．簡述甲基紅試驗的原理。某些細菌能分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，并進一步分解丙酮酸產(chǎn)生甲酸、乙酸、乳酸等使pH下降至4．5以下，加入甲基紅試劑后呈紅色，為陽性。若分解葡萄糖產(chǎn)酸量少，或產(chǎn)生的酸進一步分解為其他非酸性物質(zhì)，則pH在6．2以上，加入甲基紅試劑后呈黃色，為陰性9．簡述金黃色葡萄球菌的最低鑒定特征。①革蘭陽性球菌，呈葡萄串狀排列；②血平板上產(chǎn)生透明溶血環(huán)；③觸酶試驗陽性；④血漿凝固酶試驗陽性10．簡述細菌鑒定的基本思路。是首先進行革蘭染色以區(qū)分細菌的基本形態(tài)和革蘭染色性。根據(jù)形態(tài)和染色性的不同做一些大的分類試驗，如革蘭陰性桿菌做氧化酶試驗，革蘭陽性球菌做觸酶試驗，其后再進行不同的生化試驗，必要時進一步進行血清學(xué)試驗11．請敘述血液感染的細菌學(xué)檢驗程序無菌采集血液標(biāo)本→增菌培養(yǎng)(需氧或厭氧培養(yǎng))→有菌生長取其菌落。具體步驟：①涂片、染色、鏡檢。②直接藥敏試驗→初級報告。③分離培養(yǎng)→觀察菌落，取菌落涂片、染色、鏡檢。純培養(yǎng)→血清學(xué)鑒定、生化鑒定、藥敏試驗→出示報告2．補體的生物學(xué)活性是什么?補體的生物學(xué)活性是指補體活化過程的產(chǎn)物表現(xiàn)出的具有擴大免疫效應(yīng)的多項生物學(xué)活性，根據(jù)這些產(chǎn)物的活性特點可分為五類。(1)細胞溶解作用即膜攻擊作用新生的C5b可插入就近的細胞膜上，進而有C6、C7和C9與膜上有C5b組成膜攻擊單位C5b·67·8·9n，構(gòu)成可讓細胞膜內(nèi)外物質(zhì)自由出入的通道壁，造成細胞或細菌的破裂死亡。(2)調(diào)理作用與病原體或免疫復(fù)合物共價鍵結(jié)合的C3b，還可與吞噬細胞表面的C3b受體(CR1)結(jié)合，以促進其吞噬過程，成為補體的調(diào)理作用。(3)引起炎癥反應(yīng)引起炎癥反應(yīng)(的物質(zhì))，C3a、C4a、C5a有過敏毒素作用，C5a有對粒細胞的趨化作用，其綜合作用效果是導(dǎo)致組織充血、水腫及滲出等炎癥表現(xiàn)。(4)清除免疫復(fù)合物即補體(C3b)的免疫粘連作用在替代活化途徑和經(jīng)典活化途徑新產(chǎn)生的C3b，都可以借其不穩(wěn)定的硫酯鍵斷裂，直接與病原體(或其成分)或免疫復(fù)合物中的抗原成分共價性結(jié)合。和病原體或免疫復(fù)合物共價結(jié)合的C3b，可再與血小板或人紅細胞表面的C3b受體(CR1)結(jié)合，使這些病原體或免疫復(fù)合物黏附于血小板或人的紅細胞上，成為免疫黏連作用。免疫黏連作用不僅可減少血液中游離的免疫復(fù)合物及病原體，而且被黏附于血小板或紅細胞表面的免疫復(fù)合物或病原體易被吞噬細胞捕捉吞噬，消除它們對機體的危害。(5)免疫調(diào)節(jié)作用補體可對免疫應(yīng)答的各個環(huán)節(jié)發(fā)揮調(diào)節(jié)作用：①C3可參與捕捉、固定抗原，使抗原被APC處理與提呈；②補體成分可與多種免疫細胞相互作用，調(diào)節(jié)細胞的增殖分化例如C3b與B細胞表面CR1結(jié)合，可使B細胞增殖分化為漿細胞。CR2能結(jié)合C3d、iC3b及C3Dg，助B細胞活化；③補體參與調(diào)節(jié)多種免疫細胞效應(yīng)功能，如殺傷細胞結(jié)合C3b后可增強對靶細胞的ADCC作用。3．細胞因子的生物學(xué)作用特點是什么?(1)細胞因子的作用高效性：極微量(pg水平)即可發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。細胞因子的旁泌和自泌作用自產(chǎn)生分泌出來后作用于附近的細胞或自身產(chǎn)生細胞。(2)細胞因子作用的一時性：只在局部短時間發(fā)揮作用，臨床上細胞因子作為藥物治療時，在藥理劑量下也可隨血流分部全身發(fā)揮作用。(3)細胞因子作用的多效性：一種細胞因子可作用于多種靶細胞，發(fā)揮多種生物學(xué)效應(yīng)如促進靶細胞增殖分化，增強抗感染和殺傷效應(yīng)，促進或抑制其他細胞因子的產(chǎn)生和細胞膜表面分子的表達。(4)細胞因子作用的網(wǎng)絡(luò)性：不同的細胞因子之間有相互協(xié)同或相互制約的作用，由此構(gòu)成了復(fù)雜的細胞因子免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)，如IL-1又到產(chǎn)生IL-2，IL-10抑制γ干擾素產(chǎn)生。4．試論MHC在醫(yī)學(xué)上的意義。(1)器官移植：移植排斥反應(yīng)的實質(zhì)是免疫應(yīng)答，故移植成敗的關(guān)鍵是供受者間MHC的相容程度。(2)免疫調(diào)節(jié)：①抗原提呈：無論外源性抗原還是內(nèi)源性抗原大多需經(jīng)細胞加工處理后形成抗原肽段，再與HLA-Ⅰ、Ⅱ類分子結(jié)合，HLA-抗原肽復(fù)合物共同表達于細胞膜表面，才能被CD8＋T細胞或CD4＋T細胞所識別；②MHC限制性：在免疫應(yīng)答過程中各種免疫細胞如Th、Mφ、B及TC細胞間的相互作用均受到不同的MHC分子的調(diào)控或嚴格的約束。例如，TC細胞識別病毒抗原或腫瘤抗原時必須識別自身MHC-Ⅰ類分子；而Th細胞識別的抗原肽必須是與自身MHC-Ⅱ類分子結(jié)合者。這種特定T細胞識別特定類別自身MHC分子而發(fā)揮效應(yīng)的現(xiàn)象稱MHC限制性；③決定免疫應(yīng)答能力：在HLA-Ⅱ類基因區(qū)有一免疫應(yīng)答基因Ir可對免疫應(yīng)答進行調(diào)節(jié)，包括增進免疫應(yīng)答或抑制免疫應(yīng)答。(3)HLA與疾病的關(guān)系：人類MHC即HLA復(fù)合體是目前已知的最復(fù)雜多態(tài)性的人類基因系統(tǒng)，在人類證實強直性脊柱炎與B27有強相關(guān)性后，通過群體的流行病學(xué)調(diào)查和家系調(diào)查發(fā)現(xiàn)許多內(nèi)分泌疾病、類風(fēng)濕性疾病、自身免疫性疾病、腫瘤和感染性疾病等與HLA有關(guān)。HLA與疾病易感染相關(guān)的主要位點是DR3DR4和B27等。5．參與體液免疫應(yīng)答的細胞有哪些?如何發(fā)揮作用?胸腺依賴抗原(TD-Ag)次級B細胞產(chǎn)生抗體有下述細胞參加反應(yīng)。(1)抗原呈遞細胞(APC)：主要是單核-巨噬細胞類將處理的抗原提呈給Th細胞并分泌IL-1，IL-6活化T細胞。(2)Th細胞：經(jīng)抗原刺激活化后分泌細胞因子，特別是Th2細胞分泌IL-4、IL-5、IL-10等，除輔助B細胞活化分化變成漿細胞產(chǎn)生抗體，還有調(diào)節(jié)抗體產(chǎn)生的作用。(3)B細胞：經(jīng)抗原次級后變成漿細胞合成并分泌抗體，在對應(yīng)抗原再次應(yīng)答時B細胞是主要的抗原提呈細胞(APC)，可處理并提呈抗原給Th細胞，使之活化。(4)非胸腺依賴抗原(TI-Ag)直接刺激B細胞產(chǎn)生IgM類抗體，如脂多糖或肺炎球菌莢膜多糖抗原可直接與B細胞表面的Ig結(jié)合，刺激其分化為漿細胞。6．什么是自身抗原?它是怎樣產(chǎn)生的?有何臨床意義?一般來說，自身物質(zhì)對自身沒有抗原性。在一定條件下，自身物質(zhì)對自身發(fā)揮抗原作用，引起免疫應(yīng)答，稱之為自身抗原。自身抗原產(chǎn)生的原因：(1)隱蔽的自身抗原：某些自身物質(zhì)在正常條件下與血流和免疫系統(tǒng)相對隔絕，稱為隱蔽的自身抗原。外傷、感染或手術(shù)不甚等原因，使這些物質(zhì)進入血流，引起自身免疫應(yīng)答。例如眼外傷后，眼葡萄膜色素和眼晶體蛋白釋放可引起交感性眼炎和過敏性眼炎；精子抗原釋放引起男性不育癥；甲狀腺球蛋白釋放引起變態(tài)反應(yīng)性甲狀腺炎；腦脊液和周圍神經(jīng)的髓鞘蛋白的釋放引起脫髓鞘腦脊髓炎和外周神經(jīng)炎。(2)修飾的自身抗原：在病原微生物感染、電離輻射或藥物等影響下，自身組織分子改變，形成新的抗原決定簇或暴露出內(nèi)部的隱蔽的決定簇，成為自身抗原刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答，引起自身免疫疾病。例如，服用氨基比林或甲基多巴，可改變粒細胞或紅細胞表面的化學(xué)結(jié)構(gòu)，出現(xiàn)新的抗原決定簇，從而引起粒細胞減少癥或自身免疫性溶血性貧血。7．試述抗原抗體反應(yīng)的基本原理?？贵w能夠特異性結(jié)合是基于兩種分子間的結(jié)構(gòu)互補性與親和性，這兩種特性是由抗原與抗體分子的一級結(jié)構(gòu)決定的?？乖贵w反應(yīng)分為兩個階段：第一階段為抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合階段，此階段反應(yīng)快，僅需幾秒鐘至幾分鐘，但不出現(xiàn)可見反應(yīng)。第二階段為可見反應(yīng)階段，抗原抗體復(fù)合物在環(huán)境因素(如電解質(zhì)、pH、溫度、補體)的影響下，進一步交聯(lián)和聚集，表現(xiàn)為凝集、沉淀、溶解、補體結(jié)合介導(dǎo)的生物現(xiàn)象等肉眼可見的反應(yīng)。此階段反應(yīng)慢，往往需要數(shù)分鐘至數(shù)小時。8．簡述HVGR和GVHR的主要區(qū)別。HVGR是由宿主體內(nèi)致敏的免疫效應(yīng)細胞和抗體對移植物進行攻擊，導(dǎo)致移植物排斥；而GVHR是由移植物中的抗原特異性淋巴細胞，即“過路”淋巴細胞識別宿主抗原而發(fā)生的一種排斥反應(yīng)。這種反應(yīng)不僅導(dǎo)致移植失敗，而且還能給受者造成嚴重后果。9．T細胞亞群檢測有何臨床意義?T細胞亞群檢測已作為臨床輔助診斷與研究的一種重要手段，對各種疾病如自身免疫病、免疫缺陷病、病毒感染、惡性腫瘤等的發(fā)生、發(fā)展、臨床療效考核和預(yù)后估計都具有極其重要的意義；對了解機體的免疫狀態(tài)也有十分重要的意義。10．簡述ELISA的基本原理。①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或酶標(biāo)抗體，這種酶標(biāo)抗原或酶標(biāo)抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測定時，令受檢標(biāo)本(測定其中的抗原或抗體)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開，最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化形成有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，故可極大地放大反應(yīng)效果，從而使測定方法達到很高的敏感度。11．試述直接Coomb’s試驗與間接Coomb’s試驗的共同點與不同點。直接Coomb’s試驗主要用于檢查已吸附在紅細胞上的不完全抗體。此試驗常用于新生兒溶血癥、自身免疫性溶血癥及特發(fā)性自身免疫性貧血等檢查。間接Coomb’s試驗主要用于檢查血清中游離的不完全抗體。此試驗多用于檢測母體Rh(D)抗體，可及早發(fā)現(xiàn)和避免新生兒溶血癥的發(fā)生。亦可對紅細胞抗原不相容性輸血所產(chǎn)生的血型抗體進行檢測。12．簡述ELISA雙抗體夾心法的操作步驟。(1)特異性抗體與固相載體連接，形成固相抗體：洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。(2)加受檢標(biāo)本：使之與固相抗體接觸反應(yīng)一段時間，讓標(biāo)本中的抗原與固相載體上的抗體結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。(3)加酶抗體：使固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈正相關(guān)。(4)加底物：夾心復(fù)合物中的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進行該抗原的定性或定量。13．ELISA操作的注意事項有哪些?(1)加樣：在ELISA中除了包被外，一般需進行4～5次加樣。在定性測定中有時不強調(diào)加樣量的準(zhǔn)確性，例如規(guī)定為加樣1滴。此時應(yīng)該使用相同口徑的滴管，保持準(zhǔn)確的加樣姿勢，使每滴液體的體積基本相同。在定量測定中則加樣量應(yīng)力求準(zhǔn)確。標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液應(yīng)按規(guī)定配制。加樣時應(yīng)將液體加在孔底，避免加在孔壁上部，并注意不可出現(xiàn)氣泡。(2)孵育：在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本和加結(jié)合物后，此時反應(yīng)的溫度和時間應(yīng)按規(guī)定的要求，保溫容器最好是水浴箱，可使溫度迅速平衡。各ELISA板不應(yīng)疊在一起。為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)⑵桨宸旁诘撞繅|有濕紗布的濕盒中。濕盒應(yīng)該是金屬的，傳熱容易。如用保溫箱，空濕盒應(yīng)預(yù)先放在其中，以平衡溫度，這一步驟在室溫較低時更為重要。加入底物后，反應(yīng)時間和溫度通常不做嚴格要求。(3)洗滌：洗滌在ELISA過程中雖不是反應(yīng)步驟，但卻是決定成敗的關(guān)鍵。洗滌的目的是洗去反應(yīng)中沒有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。(4)顯色及終止反應(yīng)：顯色是酶促反應(yīng)，應(yīng)按規(guī)定的溫度和時間操作，用酸終止。(5)結(jié)果判斷：用比色計測定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于ELISA板底的平整與透明度和比色計的質(zhì)量。14．試述流式細胞術(shù)(FCM)的工作原理及其特點。經(jīng)過熒光抗體染色的單細胞懸液和鞘液在氮氣壓力下同時進入流室，形成鞘液包裹細胞懸液的穩(wěn)定層流，由噴嘴高速射下(1000～5000個細胞／s)，與垂直而來的激光束交會。在混合細胞中，由于細胞大小、胞內(nèi)顆粒多少以及DNA含量等不同，使激光產(chǎn)生不同的散射，分別由散射光檢測接受；細胞上著染的熒光染料在激光激發(fā)下，輻射出熒光，由熒光檢測器接受。所有信號自動傳入電子計算機分析處理，以獲得檢測結(jié)果。1．簡述核酸探針及其應(yīng)用。核酸探針