2023年沖刺-生物技術(shù)期末復(fù)習(xí)-基因工程原理（生物技術(shù)）筆試題庫含答案（圖片大小可自由調(diào)整）第I卷一.綜合考核題庫(共35題)1.切口平移法標記DNA探針時，需用的酶是：

A、DNaseI

B、Rnase

C、DNA連接酶

D、限制酶

正確答案:A2.下列哪種病不可以進行遺傳病的基因治療

A、血友病B

B、艾滋病

C、囊性纖維化

D、心血管疾病

正確答案:B3.當載有文庫的菌落被轉(zhuǎn)移到雜交膜上用于篩選時，需要堿性溶液處理的步驟，這一步驟的意義何在?

A、啟動雜交探針與互補序列間的反應(yīng)

B、標記DNA，便于檢測

C、裂解菌體細胞，并使DNA變性

D、促使文庫DNA結(jié)合到雜交膜上

正確答案:C4.在基因工程中，堿性磷酸酶多與下列那種工具酶一起標記DNA分子的5‘-末端

A、末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶

B、核酸外切酶

C、T4多核苷酸激酶

D、S1核酸酶

正確答案:C5.免疫共沉淀技術(shù)是檢測（)的技術(shù)

A、RNA－蛋白相互作用

B、蛋白－蛋白相互作用

C、RNA－RNA相互作用

D、DNA－蛋白相互作用

正確答案:B6.Klenow酶在有_________情況下，呈現(xiàn)DNA聚合酶活性，

正確答案:Dntp7.迄今發(fā)現(xiàn)的質(zhì)粒DNA都是環(huán)狀的。

正確答案:錯誤8.根據(jù)某一感興趣蛋白質(zhì)的序列、抗原性以及配基結(jié)合性質(zhì)制備探針，可從DNA文庫中篩選到相應(yīng)的基因。

正確答案:正確9.Northern印跡和Southern印跡的基本原理是一樣的，都是用于檢測結(jié)構(gòu)基因的表達。

正確答案:錯誤10.在長模板鏈的指導(dǎo)下，引物延伸合成長的DNA互補鏈時應(yīng)選用

A、T4DNA聚合酶

B、Klenow酶

C、大腸桿菌DNA聚合酶I

D、T7DNA聚合酶

正確答案:D11.第一個成功地用于基因工程的大腸桿菌質(zhì)粒是pBR322質(zhì)粒。

正確答案:錯誤12.目的基因通常是指

A、擬進行研究或利用的基因

B、人工合成的基因

C、載體DNA分子

D、具有編碼序列的DNA分子

正確答案:A13.克隆基因目的蛋白的表達形式主要有哪些類型？

正確答案:表達蛋白按溶解特性通常包括：不溶性蛋白和可溶性蛋白兩類，具體包括如下幾種結(jié)構(gòu)形態(tài)：包涵體型蛋白、融合型蛋白、分泌型蛋白。14.黏粒(cosmid)質(zhì)粒中，COS位點的功能是

A、限制酶切位點

B、參與包裝進入病毒外殼

C、選擇標記

D、復(fù)制起點

正確答案:B15.DNA沿凝膠平面垂直方向移出并移除到膜上，轉(zhuǎn)移后各個DNA片段在膜上的相對位置與凝膠中的相對位置一樣，因此也稱為_____________。

正確答案:印跡16.下面關(guān)于多克隆位點MultipleCloneSite（MCS)的描述錯誤的一項是

A、僅位于質(zhì)粒載體中

B、具有多種酶的識別序列

C、不同酶的識別序列可以有重疊

D、一般是人工合成后添加到載體中

正確答案:A17.下面有關(guān)限制酶的敘述正確的是（）

A、限制酶是外切酶而不是內(nèi)切酶

B、限制酶在特異序列（識別位點）對DNA進行切割

C、同一種限制酶切割DNA時留下的末端序列總是相同的

D、一些限制酶在識別位點內(nèi)稍有不同的位置切割雙鏈DNA，產(chǎn)生黏末端

E、一些限制酶在識別位點內(nèi)相同的位置切割雙鏈DNA，產(chǎn)生平末端

正確答案:B,C,D,E18.將含有一個mRNA的DNA拷貝的克隆稱作一個cDNA克隆，源于同一批RNA制備物的克隆群則構(gòu)建了一個______。

正確答案:cDNA文庫19.EcoRI切割載體DNA和供體DNA所產(chǎn)生的片段在用于重組連接前要

A、用CIP處理載體DNA防止自身環(huán)化

B、進行瓊脂糖凝膠電泳檢測

C、上述說法都正確

D、用65℃處理5～10min使限制性內(nèi)切核酸酶失活

正確答案:A20.基因重組的載體必須具備下列哪些特點：

A、本身是一個復(fù)制單位，能在受體細胞中復(fù)制

B、插入外源DNA后也不影響自身的復(fù)制

C、易于進入受體細胞

D、通過自身的酶系在受體細胞中復(fù)制

E、通常帶有抗性基因，易于篩選和鑒定

正確答案:A,B,C,E21.T4DNA連接酶是從T4噬菌體感染的E．coli中分離的，這種連接酶

A、催化連接反應(yīng)時既能以ATP又能以NAD作為能量來源

B、既能催化平末端連接又能催化黏性末端連接

C、是一種單肽酶，分子質(zhì)量為74kDa

D、既能催化單鏈DNA

連接又能催化雙鏈DNA

連接

正確答案:B22._________是一種借助顯微鏡將外源DNA直接注入受體細胞的方法。

正確答案:顯微注射法23.基因組文庫和cDNA文庫的區(qū)別？

正確答案:cDNA文庫是有時效性的，cDNA文庫構(gòu)建時的信息供體是某一時空條件下的細胞的總mRNA，它是在轉(zhuǎn)錄水平上反映該生物在某一特定發(fā)育時期、某一特定組織在某種環(huán)境條件下的基因表達情況，并不能包括該生物有機體的全部基因。24.限制性內(nèi)切酶通常保存在_________濃度的甘油溶液中。

正確答案:50%25.在眾多的植物轉(zhuǎn)基因方法中，下列哪種方法應(yīng)用最多、最廣泛

A、農(nóng)桿菌介導(dǎo)法

B、植物病毒DNA介導(dǎo)法

C、基因槍法

D、原生質(zhì)體法

正確答案:A26.接合質(zhì)粒

正確答案:指含有nic/born基因，能自我轉(zhuǎn)移的質(zhì)粒。27.為了防止DNA的自身環(huán)化，可用_________去雙鏈DNA_5’端的磷酸基團。

正確答案:堿性磷酸酶28.Ptrp表示（）

A、噬菌體啟動子

B、色氨酸啟動子

C、乳糖和色氨酸復(fù)合啟動子

D、乳糖啟動子

正確答案:B29.能夠產(chǎn)生防御病毒侵染的限制性內(nèi)切核酸酶的細菌，其本身的基因組中沒有被該核酸酶識別的序列。

正確答案:正確30.染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)是研究生命體組織或細胞內(nèi)蛋白質(zhì)與DNA相互作用的一種技術(shù)方法

正確答案:正確31.酵母雙雜交法是檢測（)的技術(shù)

A、RNA－蛋白相互作用

B、蛋白－蛋白相互作用

C、RNA－RNA相互作用

D、DNA－蛋白相互作用

正確答案:B32._________是指轉(zhuǎn)錄因子用于識別靶DNA的蛋白結(jié)構(gòu)域。

正確答案:鋅指結(jié)構(gòu)域33.外源DNA離開染色體是不能復(fù)制的，將外源DNA與____________連接，構(gòu)建成重組DNA分子，外源DNA則可被復(fù)制。

正確答案:克隆載體34.包涵體型蛋白具有生物活性。

正確答案:錯誤35.pSC101質(zhì)粒是第一個成功克隆真核DNA的載體，屬于松弛控制型的質(zhì)粒。

正確答案:錯誤第II卷一.綜合考核題庫(共35題)1.不同的表達載體需要不同的受體系統(tǒng)進行基因表達，受體系統(tǒng)根據(jù)宿主細胞的性質(zhì)可以分為兩大類：________________和真核表達系統(tǒng)。

正確答案:原核表達系統(tǒng)2.一般質(zhì)粒DNA的構(gòu)型有哪幾種？在瓊脂糖凝膠電泳中有何特點？

正確答案:超螺旋質(zhì)粒DNA、開環(huán)質(zhì)粒DNA、線狀質(zhì)粒DNA；電泳的泳動速度從大到小分別是：超螺旋質(zhì)粒DNA>線狀質(zhì)粒DNA>開環(huán)質(zhì)粒DNA。3.基因治療是把健康的外源基因?qū)?/p>

A、有基因缺陷的染色體中

B、有基因缺陷的細胞器中

C、有基因缺陷的DNA分子中

D、有基因缺陷的細胞中

正確答案:D4.單個細胞中所含有的質(zhì)粒DNA分子數(shù)目即為質(zhì)粒的_________。

正確答案:拷貝數(shù)5.Cosmid的特點元件是

正確答案:cos位點6.HIV為逆轉(zhuǎn)錄病毒。

正確答案:正確7.pGEM質(zhì)粒有幾個啟動子

A、0個

B、2個

C、3個

D、4個

正確答案:B8.用_________表達乳鐵蛋白可謂是乳腺生物反應(yīng)器的典型代表。

正確答案:轉(zhuǎn)基因牛9.連接反應(yīng)中，下列哪項物質(zhì)是T4DNA連接酶所必須的輔助因子

A、DTT

B、Tris-HCL

C、MgCl2

D、ATP

正確答案:D10.根據(jù)結(jié)構(gòu)和功能特性，可將DNA限制性內(nèi)切酶分為幾類

A、I型酶

B、II型酶

C、III型酶

D、IV型酶

E、V型酶

正確答案:A,B,C11.下面關(guān)于松弛型質(zhì)粒(relaxedplasmid)性質(zhì)的描述不正確的是

A、質(zhì)粒的復(fù)制只受本身的遺傳結(jié)構(gòu)的控制，而不受染色體復(fù)制機制的制約，因而有較多的拷貝數(shù)

B、可以在氯霉素作用下進行擴增

C、通常具有較少的拷貝數(shù)

D、同嚴緊型質(zhì)粒整合后，雜合質(zhì)粒優(yōu)先使用松弛型質(zhì)粒的復(fù)制子

正確答案:C12.末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶起作用時需要

A、二價陽離子

B、一價陰離子

C、二價陰離子

D、一價陽離子

正確答案:A13.轉(zhuǎn)錄水平的鑒定是指_________。

正確答案:mRNA檢測14.M1載體在多克隆位點的兩側(cè)引入了T7和T3兩個噬菌體的啟動子，這樣增加了該載體的功能，下述四種功能中哪一種是不正確的?

A、可以對插入到多克隆位點的外源片段進行轉(zhuǎn)錄分析

B、利用這兩個啟動子的通用引物進行PCR擴增

C、利用通用引物進行序列分析

D、利用這兩個啟動子進行定點突變

正確答案:D15.基因工程藥物的特點是高技術(shù)，短周期，高投入，高風(fēng)險，高收益。

正確答案:錯誤16.在分離DNA時，要戴手套操作，原因是手上常有________。

正確答案:核酸酶17.藍白斑篩選重組子時，白色菌落不一定就是陽性克隆。

正確答案:正確18.何謂限制作用？

正確答案:指細菌體內(nèi)產(chǎn)生的限制性核酸內(nèi)切酶對DNA的分解作用，一般是指對外源DNA侵入的限制。19.對柯斯質(zhì)粒(cosmid)描述正確的是

A、它具有COS位點，因而可進行體外包裝

B、它具有質(zhì)粒DNA的復(fù)制特性

C、進入受體細胞后，可引起裂解反應(yīng)

D、進入受體細胞后，可引起溶源化反應(yīng)

E、能與有同源序列的質(zhì)粒進行重組

正確答案:A,B,D,E20.切口平移法標記DNA探針時應(yīng)用的酶是_____。

正確答案:DNA聚合酶I21.限制性內(nèi)切核酸酶可以特異性地識別：

A、雙鏈DNA的特定堿基對

B、雙鏈DNA的特定堿基序列

C、特定的三聯(lián)密碼

D、以上都正確

正確答案:B22.LacZ基因通常用于構(gòu)建質(zhì)粒載體的目的是

A、編碼藍色色素產(chǎn)物，可用于示蹤轉(zhuǎn)化的細胞

B、編碼一種酶，將RNA轉(zhuǎn)化為DNA

C、編碼一種抗生素抗性的酶

D、編碼一種可檢測的酶,當基因內(nèi)部的位點插入任何外源片段，ORF遭到破壞時，產(chǎn)物即不能表達

正確答案:D23.基因治療通常采用哪種載體比較合適

A、逆轉(zhuǎn)錄病毒

B、Ti質(zhì)粒

C、噬菌體

D、質(zhì)粒pBR322

正確答案:A24.含有多種限制性內(nèi)切核酸酶識別序列的DNA片段稱為_________。

正確答案:多克隆位點25.融合表達載體中擔體蛋白比較常用的有（）

A、GST

B、六聚組氨酸肽

C、綠色熒光蛋白

D、LacZ

E、親水性多肽

正確答案:A,B,C,D,E26.克隆的進行依賴于各種參與DNA新陳代謝的_________的使用。

正確答案:酶27.受體細胞的_________是接受外源DNA的生理狀態(tài)_。

正確答案:感受態(tài)28.下列哪一項不屬于遺傳表型檢測法

A、抗藥性標記基因

B、LacZ基因藍白斑篩選

C、GFP

D、核酸分子雜交

正確答案:D29.在基因工程中，可用堿性磷酸酶

A、防止DNA的自身環(huán)化

B、同多核苷酸激酶一起進行DNA的5’端標記

C、制備突出的3’端

D、催化DNA連接

E、上述說法都正確

正確答案:A,B30.限制性內(nèi)切核酸酶BsuRI和HaeIII的來源不同，但識別的序列都是GGCC，因此他們屬于_________。

正確答案:同裂酶31.原核表達系統(tǒng)中通常使用的可調(diào)控的啟動子Tac又叫

A、乳糖啟動子

B、乳糖和色氨酸的雜合啟動子

C、噬菌體的左向啟動子

D、色氨酸啟動子

正確答案:B32.基因工程又叫

A、分子克隆

B、基因克隆

C、遺傳育種

D、遺傳工程

E、重組DNA技術(shù)

正確答案:A,B,D,E33.試述影響連接反應(yīng)的因素？

正確答案:DNA末端的形式；DNA分子濃度的影響；連接反應(yīng)溫度與時間的影響；連接緩沖液的影響；酶濃度的影響；ATP濃度的影響。34.下列測序方法哪個是屬于經(jīng)典的DNA測序方法

A、ABISOLID測序

B、Illumina測序

C、Roche454

D、雙脫氧終止法

正確答案:D35.DNA聚合酶I在基因工程中有哪些主要用途？

正確答案:用切口平移法標記DNA；利用其5'-3'核酸外切酶活性降解寡核苷酸作為合成cDNA第二鏈的引物；用于對DNA分子的3'突出末端進行末端標記，用于DNA序列分析。第III卷一.綜合考核題庫(共35題)1.______________也叫做依賴于RNA的DNA聚合酶或RNA指導(dǎo)的DNA聚合酶。

正確答案:逆轉(zhuǎn)錄酶2.克隆羊多利是用的________________法制備的。

正確答案:體細胞核移植3.將含有外源基因組一個酶切片段的質(zhì)粒稱之為含有一個基因組DNA克隆,各種此類質(zhì)粒的集合體稱之為構(gòu)建了一個_______.

正確答案:基因組文庫4._________是指真核生物基因組中能特異與核基質(zhì)結(jié)合并富含AT的DNA序列。

正確答案:核基質(zhì)附著區(qū)5.何謂轉(zhuǎn)基因動物？

正確答案:指利用基因工程技術(shù)，將人們想要研究的基因在動物體實現(xiàn)表達。6.關(guān)于黏粒載體的描述錯誤的是

A、是由λ噬菌體與質(zhì)粒DNA重組的載體

B、既有質(zhì)粒的特性，又有噬菌體DNA的特性(如可體外包裝)

C、可插入大片段的外源DNA片段

D、可像YAC載體那樣構(gòu)建大片段的基因組文庫

正確答案:D7.基因工程中有三種主要類型的載體：_________、病毒DNA質(zhì)粒和病毒DNA雜合體。

正確答案:質(zhì)粒DNA8.巴斯德畢赤氏酵母表達系統(tǒng)較釀酒酵母表達系統(tǒng)具有哪些優(yōu)勢？

正確答案:生長迅速，外源蛋白表達水平高，產(chǎn)物可翻譯后修飾，產(chǎn)物可正確折疊和高效分泌，可利用簡單無機鹽培養(yǎng)基，高密度發(fā)酵，生物量大，實驗室和工業(yè)操作簡單。9.連接反應(yīng)中，那種組分是為連接體系提供合適的pH

A、DTT

B、Tris-HCL

C、MgCl2

D、ATP

正確答案:B10.只有完整的復(fù)制子才能進行獨立復(fù)制，一個失去了復(fù)制起點的復(fù)制子不能進行獨立復(fù)制。

正確答案:正確11.下列關(guān)于限制酶命名的表示方法，正確的是

A、B.amHI

B、pstI

C、HindIII

D、Sau.3AI

正確答案:C12.限制性核酸內(nèi)切酶是由細菌產(chǎn)生的，其生理意義是

A、修復(fù)自身的遺傳缺陷

B、促進自身的基因重組

C、強化自身的核酸代謝

D、提高自身的防御能力

正確答案:D13.下面幾種序列中你認為哪一個(哪些)最有可能是Ⅱ類酶的識別序列：GAATCG，AAATTT，GATATC，ACGGCA？為什么？

正確答案:GATATC；AAATTT；因為它們是回文序列。14.噬菌體能夠克隆多大的DNA片段

A、5Kb

B、20kb

C、30kb

D、40kb

正確答案:B15.質(zhì)粒具備的特征不包括

A、賦予宿主細胞某種可檢測的特性

B、獨立復(fù)制的能力

C、可復(fù)制自身DNA以及插入的外源DNA

D、甲基化防止宿主的限制性內(nèi)切核酸酶對其降解

正確答案:D16.質(zhì)粒作為載體使用時必須具備如下條件

A、拷貝數(shù)較高

B、分子量較小

C、具有選擇標記

D、具有較多的限制性酶切位點

E、具有復(fù)制起始點

正確答案:A,B,C,D,E17._________是一種最為普遍的與年齡相關(guān)的認知障礙退行性疾病。

正確答案:阿爾茨海默病18.試述分子雜交技術(shù)的原理？

正確答案:將標記的核酸探針以堿基互補配對原則與組織細胞中的待測核酸進行特異性的雜交組合，形成探針標記與待測核酸的雜交體，然后利用各種標記物的顯色技術(shù)，在光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下探察待測目標核酸的存在及位置。19.啟動子

正確答案:是一段提供RNA聚合酶是被和結(jié)合的DNA序列，位于基因的上游，長度因生物種類而異。20.Sanger雙脫氧末端終止法和化學(xué)降解法的應(yīng)用原理是一樣的。

正確答案:錯誤21.BergP的創(chuàng)造性的工作是在體外構(gòu)建了重組DNA分子，所用的載體是一種具有復(fù)制能力的細胞質(zhì)質(zhì)粒。

正確答案:錯誤22.抗性基因（Resistant？gene）是目前使用的最廣泛的選擇標記，常用的抗生素抗性有哪幾種？

正確答案:氨芐青霉素抗性基因、四環(huán)素抗性基因、氯霉素抗性基因、卡那霉素和新霉素抗性基因以及琥珀突變抑制基因。23.現(xiàn)在科研人員又開發(fā)了紅色熒光蛋白、黃色熒光蛋白、_________等新型的熒光蛋白。

正確答案:藍色熒光蛋白24.用化學(xué)降解法進行DNA測序時，必須具有幾個反應(yīng)系統(tǒng)

A、2個

B、3個

C、4個

D、1個

正確答案:C25.用于基因治療的基因不需要滿足

A、外源基因能在靶細胞中長期穩(wěn)定存留

B、導(dǎo)入基因的方法及載體對宿主細胞安全無害

C、基因需要大量表達才能改善癥狀

D、外源基因可有效導(dǎo)入靶細胞

正確答案:C26.細菌抗藥性基因一般存在于

A