2024屆山東省齊河縣一中生物高三第一學(xué)期期末綜合測試試題注意事項：1．答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫在答題卡上。2．回答選擇題時，選出每小題答案后，用鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目的答案標(biāo)號涂黑，如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其它答案標(biāo)號。回答非選擇題時，將答案寫在答題卡上，寫在本試卷上無效。3．考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．下列有關(guān)“制作并觀察植物細胞有絲分裂的臨時裝片”活動的敘述，正確的是（）A．解離選用的試劑是10%的鹽酸，解離是否完成的標(biāo)準(zhǔn)是根尖細胞是否已經(jīng)分散開了B．選擇2?3mm的洋蔥根尖作為實驗材料，是因為該區(qū)域多數(shù)細胞處于分裂期C．漂洗是為了洗去未吸附的堿性染料D．若改用其他細胞作為實驗材料，視野中分裂期細胞的比例可能會增多2．同側(cè)屈反射涉及的反射弧結(jié)構(gòu)如圖所示，效應(yīng)器為肌肉。假設(shè)在該反射弧中放置了甲、乙兩個靈敏電表。下列敘述正確的是（）A．該反射屬于最簡單的反射B．結(jié)構(gòu)a為反射弧中的感受器C．在b處給予適宜電刺激，將觀察到電表甲、乙的指針偏轉(zhuǎn)情況不同D．反射過程中興奮在d上的傳導(dǎo)是雙向的，I和Ⅱ處的傳遞是單向的3．下列關(guān)于細胞代謝的敘述，正確的是A．蛔蟲在細胞呼吸過程中，釋放能量最多的結(jié)構(gòu)是線粒體內(nèi)膜B．外界溶液濃度大于細胞液濃度時，即使細胞沒有發(fā)生質(zhì)壁分離，也不能判斷是死細胞C．細胞內(nèi)能量通過ATP分子在吸能反應(yīng)和放能反應(yīng)之間循環(huán)流通D．在劇烈運動過程中，肌細胞釋放CO2量/吸收O2量的值將增大4．已知控制玉米某兩對相對性狀的基因在同一染色體上。但偶然發(fā)現(xiàn)這兩對基因均雜合的某玉米植株，自交后代的性狀分離比為9:3:3:1。出現(xiàn)此現(xiàn)象的原因可能是，該染色體上其中一對基因所在的染色體片段（）A．發(fā)生180°顛倒 B．重復(fù)出現(xiàn)C．移至非同源染色體上 D．發(fā)生丟失5．在實驗室里的一個果蠅種群中，10%的果蠅體色為黑色，體色為棕色的果蠅中純合子占1/3。該果蝸種群中黑色基因的頻率為A．10% B．20% C．40% D．60%6．持續(xù)干旱的地區(qū)容易發(fā)生蝗災(zāi)，導(dǎo)致玉米等農(nóng)作物減產(chǎn)?？茖W(xué)家對某蝗災(zāi)地區(qū)進行了相關(guān)研究，下列敘述正確的是（）A．當(dāng)?shù)厮谢认x和玉米等作物構(gòu)成一個群落B．蝗蟲災(zāi)害加快了當(dāng)?shù)厣锶郝涞难萏嫠俣菴．標(biāo)志重捕法是調(diào)查蝗蟲種群密度的最佳方法D．蝗災(zāi)過程中，蝗蟲的種群數(shù)量變化符合“J”型增長二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）蝴蝶蘭是一種觀賞植物，因其美觀、耐旱、易于栽培而備受青睞。某科研團隊為研究蝴蝶蘭的耐旱機理，測得該植株在正常和干旱條件下CO2吸收速率日變化曲線如下圖1；下圖2為蝴蝶蘭在干旱時CO2固定途徑。請回答：（1）由圖1可知，正常條件下P點時刻含義是______，W點時蝴蝶蘭葉肉細胞光合作用所需的CO2來自于______。（2）圖1表明，干旱條件下蝴蝶蘭CO2吸收的特點是______，原因是______。（3）根據(jù)圖2可知，蝴蝶蘭夜間吸收的CO2以化合物______的形式儲存。白天釋放CO2，通過光反應(yīng)提供的_____完成卡爾文循環(huán)（暗反應(yīng)）。（4）欲使栽培蝴蝶蘭較快生長，應(yīng)避免長期干旱，原因是干旱條件下蝴蝶蘭夜間會出現(xiàn)______。8．（10分）果蠅的杏紅眼與白眼、黃身與黑身兩對相對性狀，受三對等位基因控制。其中一對性狀受對等位基因（A、a）控制，基因位于性染色體上；另一對性狀受兩對等位基因（B、b和D、d）控制，均符合盂德爾遺傳規(guī)律?，F(xiàn)讓一只甲果蠅（杏紅眼黃身♂）與一只乙果蠅（杏紅眼黑身♀）單對多次雜交，后代無論雌雄果蠅的表現(xiàn)型均如圖所示。請根據(jù)該雜交實驗結(jié)果回答以下問題：（1）等位基因位于染色體的____________（填“相同”或“不同”）位置上。（2）控制杏紅眼與白眼這對相對性狀的基因在遺傳時遵循____________定律，原因是__________________________________________________________。（3）雜交后代中杏紅眼雌果蠅的基因型有__________種；若只考慮果蠅的身色，讓雜交實驗后代中雌雄果蠅隨機交配，其后代中黃身雄果蠅的比例為______________。（4）讓子代中的黑身雌果蠅和甲果蠅雜交，可用于子代中黑身雌果蠅基因型的確定，請寫出該雜交的遺傳圖解______________。9．（10分）甲磺酸乙酯（EMS）能使鳥嘌呤（G）的N位置上帶有乙基而成為7-乙基鳥嘌呤，這種鳥嘌呤不與胞嘧啶（C）配對而與胸腺嘧啶（T）配對，從而使DNA序列中G—C對轉(zhuǎn)換成A—T對。育種專家為獲得更多的變異水稻親本類型，常先將水稻種子用EMS溶液浸泡，再在大田種植，通?？色@得株高、穗形、葉色等性狀變異的多種植株。請回答下列問題。（1）由顯性基因突變成隱性基因叫隱性突變，由隱性基因突變成顯性基因叫顯性突變。經(jīng)過處理后發(fā)現(xiàn)一株某種性狀變異的水稻，其自交后代中出現(xiàn)兩種表現(xiàn)型，說明這種變異為____________（選填“顯性”或“隱性”）突變。（2）用EMS浸泡種子是為了提高____________，某一性狀出現(xiàn)多種變異類型，說明變異具有____________。（3）EMS誘導(dǎo)水稻細胞的DNA發(fā)生變化，而染色體的____________不變。（4）某水稻品種經(jīng)處理后光反應(yīng)酶的活性顯著提高，這可能與相關(guān)基因突變有關(guān)。在葉肉細胞內(nèi)控制光反應(yīng)酶的相關(guān)基因可能分布于____________（填細胞結(jié)構(gòu)名稱）中。（5）水稻矮桿是一種優(yōu)良性狀．某純種高稈水稻種子經(jīng)EMS溶液浸泡處理后仍表現(xiàn)為高桿，但其自交后代中出現(xiàn)了一定數(shù)量的矮桿植株．請簡述該矮桿植株形成的過程____________。10．（10分）人類胰島素基因位于第11號染色體上，長度8416bp，包含3個外顯子和2個內(nèi)含子，人類胰島素的氨基酸序列已知?；卮鹣嚓P(guān)問題：（1）上圖是利用PCR技術(shù)獲取人胰島素基因的方法，除了此方法外，還可以利用的方法是____________。（2）利用PCR技術(shù)獲取人胰島素基因，在緩沖液中除了要添加模板和引物外，還需要添加的物質(zhì)有_____________________________。（3）經(jīng)過______輪循環(huán)可以得到所需的目的基因，一個DNA分子經(jīng)過5輪循環(huán)，需要引物A_____個，從PCR的過程和DNA分子的特點，試著寫出設(shè)計引物需要注意的問題_____、_____（答出2點即可）。（4）利用SDS-凝膠電泳分離不同DNA分子，遷移速度取決于__________________。（5）利用圖示方法獲取的目的基因，直接構(gòu)建基因表達載體后導(dǎo)入大腸桿菌，（選能或不能）___________表達出人胰島素，理由是______________________________。11．（15分）請回答下列與生物工程有關(guān)的問題：（1）基因工程中常利用PCR技術(shù)擴增目的基因，此過程需要在________酶的作用下進行，主要利用了_________原理。此過程的前提是要有____________序列，以便根據(jù)這一序列合成_______。（2）在基因表達載體中，______是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出_______。（3）哺乳動物核移植可以分為體細胞核移植和胚胎細胞核移植。但實際操作中，利用體細胞核移植技術(shù)的難度很大，其原因是_________________________________________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、D【解析】

洋蔥根尖裝片的制作流程：解離→漂洗→染色→制片?！驹斀狻緼、實驗材料洋蔥根尖用質(zhì)量分數(shù)10%的鹽酸可解離，解離是否完成的標(biāo)準(zhǔn)是根尖細胞是否彼此分離，A錯誤；

B、選擇2?3mm的洋蔥根尖作為實驗材料，是因為該區(qū)域細胞處于分生區(qū)，B錯誤；

C、漂洗是為了洗去解離液，便于染色，C錯誤；

D、不同細胞的細胞周期不同，若改用其他細胞作為實驗材料，視野中分裂期細胞的比例可能會增加，D正確。

故選D。【點睛】本題考查觀察細胞有絲分裂實驗，對于此類試題，需要考生注意的細節(jié)較多，如實驗的原理、實驗采用的試劑及試劑的作用、實驗現(xiàn)象等，需要考生在平時的學(xué)習(xí)過程中注意積累。2、C【解析】

分析題圖：a為效應(yīng)器，b為傳出神經(jīng)，c為神經(jīng)中樞，d有神經(jīng)節(jié)為傳入神經(jīng)，e為感受器。Ⅰ為軸突，Ⅱ為樹突或胞體?！驹斀狻緼、該反射是三元反射弧，不是最簡單的反射弧，A錯誤；B、根據(jù)神經(jīng)節(jié)或神經(jīng)中樞中的突觸結(jié)構(gòu)，可以判斷興奮的傳遞方向是從e→a，故a為效應(yīng)器，B錯誤；C、在b處給予適宜電刺激，電表甲會發(fā)生兩次相反方向的偏轉(zhuǎn)，興奮無法逆向傳遞到c和d，電表乙不偏轉(zhuǎn)，C正確；D、反射過程中，從感受器開始興奮，興奮的傳導(dǎo)和傳遞都是單向的，D錯誤。故選C?！军c睛】本題主要考查興奮的傳遞的相關(guān)知識，意在考查對所學(xué)知識的理解，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系的能力。3、B【解析】

1、原核生物只有核糖體一種細胞器。2、外界溶液濃度大于細胞液濃度，細胞不發(fā)生質(zhì)壁分離，可以判定細胞死活，前提是那個細胞必須要有細胞壁，比如植物細胞。3、ATP含量少，在體內(nèi)可以分解，也可以迅速合成，供給生命活動的能量。4、人體細胞進行有氧呼吸吸收O2，釋放CO2，而進行無氧呼吸產(chǎn)生乳酸?！驹斀狻緼、蛔蟲寄生于人體消化道內(nèi)，沒有線粒體，A錯誤；B、質(zhì)壁分離是植物的原生質(zhì)層和細胞壁發(fā)生分離，細胞沒有發(fā)生質(zhì)壁分離有可能是動物細胞，所以不能判斷細胞死活，B正確；C、能量不能循環(huán)，C錯誤；D、人體細胞無氧呼吸既不吸收O2，也不釋放CO2，所以細胞釋放CO2量/吸收O2量的值將不變，D錯誤。故選B。【點睛】本題主要考查質(zhì)壁分離實驗以及呼吸作用的知識，理解質(zhì)壁分離的條件，易錯點是D項動物細胞無氧呼吸的過程。4、C【解析】

1.基因分離定律和基因自由組合定律的實質(zhì)：在減數(shù)第一次分裂的后期，由于同源染色體的分離，其上的等位基因分離；同時非同源染色體自由組合，導(dǎo)致非同源染色體上的非等位基因自由組合。2.染色體結(jié)構(gòu)的變異的類型：（1）缺失是指染色體中某一片段的缺失；（2）重復(fù)是指染色體中增加了某一片段；（3）倒位是指染色體中某一片段的位置顛倒了180°；（4）易位是指染色體中某一片段移接到另一條非同源染色體上。3.根據(jù)題意分析可知，控制玉米某兩對相對性狀的基因在同一染色體上，正常情況下符合基因的連鎖互換定律，假設(shè)這兩對基因用A、a和B、b表示，而偶然發(fā)現(xiàn)這兩對基因均雜合的某玉米植株（AaBb），自交后代的性狀分離比為9:3:3:1，說明符合自由組合定律F1自交的結(jié)果?！驹斀狻扛鶕?jù)以上分析可知，兩對基因均雜合的某玉米植株，自交后代的性狀分離比為9:3:3:1，符合自由組合定律F1自交的結(jié)果，說明控制這兩對性狀的基因分布在了兩對同源染色體上，而根據(jù)題意可知，控制玉米某兩對相對性狀的基因在同一染色體上，那么說明在上述過程中發(fā)生了染色體易位的現(xiàn)象，且原來染色體上其中一對基因所在的染色體片段易位到了非同源染色體上，因此符合自由組合定律的結(jié)果。綜上所述，C正確，A、B、D錯誤。故選C。5、C【解析】

本題考查種群的基因型頻率和基因頻率的計算，要求考生能根據(jù)題意確定種群內(nèi)AA、Aa、aa的基因型頻率，再根據(jù)公式計算出a的基因頻率=aa的基因型頻率+Aa的基因型頻率x1/2。根據(jù)題意可知，果蠅體色中棕色（A）對黑色（a）為顯性，10%的果蠅體色為黑色（aa），體色為棕色的果蠅中純合子（AA）占1/3，則種群中AA占（1-10%）x1/3=30%，Aa占（1-10%）×2/3=60%，因此該果蠅種群中黑色基因（a）的頻率為10%+60%×1/2=40%，C正確，ABD錯誤?！军c睛】解題思路點撥：關(guān)于常染色體上種群基因型頻率和基因頻率的計算可借助于下列公式進行：1）某種基因型頻率=某種基因型個體數(shù)/種群個體總數(shù)x100%。2）種群中A的基因頻率=AA基因型頻率+Aa的基因型頻率×1/2，a的基因頻率=aa基因型頻率+Aa的基因型頻率×1/2。6、B【解析】

群落是指生活在一定區(qū)域的所有生物，包括生產(chǎn)者、消費者和分解者。調(diào)查種群密度時，一般植物和個體小、活動能力小的動物以及蟲卵常用的是樣方法；活動能力大的動物常用標(biāo)志重捕法調(diào)查。【詳解】A、生物群落是一定地域中所有生物種群的集合，蝗蟲和玉米等作物不能構(gòu)成群落，A錯誤；B、蝗蟲災(zāi)害的發(fā)生可促進當(dāng)?shù)貎?yōu)勢種的取代，使演替的速度加快，B正確；C、標(biāo)志重捕法適用于活動能力強，活動范圍大的動物，調(diào)查蝗蟲種群密度的最佳方法是樣方法，C錯誤；D、在蝗蟲災(zāi)害發(fā)生和消除的過程中，蝗蟲種群數(shù)量經(jīng)歷了先增加再減少的變化，既不符合“J”型增長，也不符合“S”型增長，D錯誤。故選B。【點睛】本題以蝗蟲為載體，考查種群和群落的相關(guān)知識，意在考查學(xué)生理解群落的改變，掌握群落演替的方向和趨勢，區(qū)分調(diào)查種群密度的方法，理解種群數(shù)量變化，難度不大。二、綜合題：本大題共4小題7、蝴蝶蘭植株的光合作用速率等于呼吸作用速率從外界吸收和細胞內(nèi)線粒體有氧呼吸產(chǎn)生夜間吸收CO2，白天幾乎不吸收干旱條件下，為防止水分的過度蒸發(fā)，白天氣孔關(guān)閉，導(dǎo)致CO2無法通過氣孔進入葉片蘋果酸ATP、[H]將淀粉轉(zhuǎn)化為甘油酸【解析】

分析圖1：在長期干旱條件下，蝴蝶蘭除了可以進行呼吸作用外還可在夜間吸收CO2并貯存在細胞中，但是由于光照增強，溫度升高，蝴蝶蘭在4?10時之間吸收CO2的速率逐漸降低，而白天10?16時CO2的吸收速率降為0，這是由于光照過強蝴蝶蘭的氣孔是關(guān)閉的，但是到16點之后，光照強度減弱，氣孔有逐漸張開。而在正常情況下，在6點之前，20點之后，植物只進行呼吸作用；6點之后開始出現(xiàn)光合作用，并逐漸增強，在與橫軸的交點處，光合作用等于呼吸作用強度。

分析圖3：葉肉細胞吸收CO2并以蘋果酸的形式儲存于液泡中，白天某些時段氣孔關(guān)閉，“儲存的CO2”用于植物的光合作用?！驹斀狻浚?）由圖1可知，正常條件下P點時刻既不向外吸收CO2也不向外釋放CO2，表明蝴蝶蘭植株的光合作用速率等于呼吸作用速率；W點時蝴蝶蘭葉肉細胞還需要向外吸收CO2，表明光合作用速率大于呼吸作用速率，則光合作用所需的CO2來自于從外界吸收和細胞內(nèi)線粒體有氧呼吸產(chǎn)生。（2）圖1表明，干旱條件下蝴蝶蘭CO2吸收的特點是夜間吸收CO2，白天幾乎不吸收；原因是干旱條件下，為防止水分的過度蒸發(fā)，白天氣孔關(guān)閉，導(dǎo)致CO2無法通過氣孔進入葉片。（3）根據(jù)圖2可知，在夜間，線粒體中產(chǎn)生的CO2用于合成蘋果酸儲存CO2，用于白天植物的光合作用；白天釋放CO2，通過光反應(yīng)提供的ATP、[H]完成卡爾文循環(huán)（暗反應(yīng)）。（4）蝴蝶蘭在干旱條件下，干旱條件下蝴蝶蘭夜間會出現(xiàn)將淀粉轉(zhuǎn)化為甘油酸，細胞干重增加量小，因此栽培蝴蝶蘭應(yīng)避免干旱，以利于其較快生長?！军c睛】本題考查了影響光合作用和呼吸作用的環(huán)境因素及探究實驗的一般原則等知識，意在考查考生能從題目所給的圖形中獲取有效信息的能力，理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。8、相同自由組合雜交后代中無論雌雄果蠅杏紅眼∶白眼＝9∶783/8【解析】

分析題干信息可知：杏紅眼：白眼=(356十364)：(286十278)≈9：7，符合基因的自由組合定律,據(jù)此分析作答。【詳解】（1）等位基因是指位于同源染色體相同位置控制相對性狀的基因。（2）杏紅眼：白眼=(356十364)：(286十278)≈9：7，是9：3：3：1的特殊情況，故果蠅的眼色由兩對等位基因控制，并且遺傳時遵循自由組合定律。（3）雜交實驗后代中杏紅眼雌果蠅的基因型為B—D—XAXa或B—D—XaXa，故共有8種基因型；若只考慮果蠅的身色，雜交實驗后代中雌果蠅的基因型為XAXa或XaXa，比例為1:1，其產(chǎn)生的配子XA：Xa=1：3，雄果蠅的基因型為XAY或XaY，比例為1：1，其產(chǎn)生的配子XA：Xa：Y=1：1：2，它們隨機交配，其后代中黃身雄果蠅(XaY)的比例為3/4×1/2=3/8。（4）讓子代中的黑身雌果蠅和甲果蠅雜交，可用于子代中黑身雌果蠅基因型的確定，該雜交的遺傳圖解如下：【點睛】寫遺傳圖解時應(yīng)注意寫清雜交符號、表現(xiàn)型、基因型以及最后的表現(xiàn)型及比例。9、顯性基因突變頻率不定向性結(jié)構(gòu)和數(shù)目細胞核、葉綠體高桿基因經(jīng)處理發(fā)生（隱性）突變，自交后代（或F1）因性狀分離出現(xiàn)矮桿【解析】

本題是對基因突變的概念、特點和誘變育種的考查，基因突變是基因的堿基對的增添、缺失或替換，基因突變具有低頻性、不定向性和多害少利性；由題意可知，甲磺酸乙酯（EMS）進行育種的原理是甲磺酸乙酯（EMS）能使DNA中堿基對發(fā)生替換，因此屬于基因突變，該過程中染色體的結(jié)構(gòu)和數(shù)目不變?！驹斀狻浚?）一株某種性狀變異的水稻，其自交后代中出現(xiàn)兩種表現(xiàn)型，說明后代發(fā)生了性狀分離，該植株是雜合子，雜合子表現(xiàn)出的性狀是顯性性狀，控制顯性性狀的基因是顯性基因，即經(jīng)過處理后由隱性基因突變成顯性基因，因此該變異是顯性突變。（2）基因突變具有低頻性，用甲磺酸乙酯（EMS）浸泡種子可以提高突變頻率，該方法稱為化學(xué)誘變；某一性狀出現(xiàn)多種變異類型，這說明基因突變具有不定向性。（3）EMS誘導(dǎo)水稻細胞的DNA發(fā)生變化的原理是基因突變，其實質(zhì)是基因中堿基對的增添、缺失或替換，染色體的結(jié)構(gòu)和數(shù)目不變。（4）某水稻品種經(jīng)處理后光反應(yīng)酶的活性顯著提高，這可能與相關(guān)基因突變有關(guān)。在葉肉細胞內(nèi)控制光反應(yīng)酶的相關(guān)基因可能分布于細胞核、葉綠體中。（5）水稻矮稈是一種優(yōu)良性狀，某純種高稈水稻種子經(jīng)EMS溶液浸泡處理后仍表現(xiàn)為高稈，但其自交后代中出現(xiàn)了一定數(shù)量的矮稈植株，說明高桿是顯性性狀，利用誘變育種獲得矮桿植株的過程是：高稈基因經(jīng)處理發(fā)生隱性突變，自交后代因性狀分離而出現(xiàn)矮稈。【點睛】本題的知識點是基因突變的概念、基因突變的特點，誘變育種的原理，突變基因的顯隱性的判斷，對于有害基因的檢測方法等。對于基因突變的概念、基因突變的特點、誘變育種的原理的理解與掌握是解題的關(guān)鍵。10、從基因文庫獲取或人工合成四種脫氧核苷酸（dNTP）和熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）331引物自身不能有互補序列引物之間不能有互補序列DNA分子的大小不能因為此方法獲得的目的基因中含有內(nèi)含子，大腸桿菌無法正常識別內(nèi)含子而對內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進行翻譯，導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯誤【解析】

根據(jù)題干信息和圖形分析，基因工程的基本步驟包括目的基因的獲取、構(gòu)建基因表達載體、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與表達；圖示目的基因為人類胰島素基因（位于11號常染色體上），其通過PCR技術(shù)進行擴增，需要A、B兩種引物；PCR擴增目的基因的過程包括變性、退貨、延伸?！驹斀狻浚?）獲取目的基因的方法除了PCR技術(shù)，還有從基因文庫獲取或人工合成。（2）用PCR技術(shù)擴增目的基因（人胰島素基因）時，所需的條件有引物、模板(目的基因或人胰島素基因)、原料(4種脫氧核糖核苷酸)和熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）等。（3）根據(jù)PCR過程和DNA分子半保留復(fù)制特點可知，前兩輪循環(huán)產(chǎn)生的四個DNA分子的兩條鏈均不等長，第三輪循環(huán)產(chǎn)生的DNA分子存在等長的兩條核苷酸鏈，即僅含引物之間的序列，因此，經(jīng)過三輪循環(huán)可以得到所需的目的基因；一個DNA分子經(jīng)過5輪循環(huán)，理論上至少需要26-2=62個引物，其中A引物31個。引物設(shè)計時需要注意以下幾點：引物自身不能有互補序列；引物之間不能有互補序列；引物長度適當(dāng)；引物能與目