桑葉多糖降血糖作用

及其機(jī)制(jīzhì)研究——邵童2011172301852011級(jí)臨床醫(yī)學(xué)(línchuánɡyīxué)八年制第一頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件桑葉系?？粕僦参锷orusalbaL.的葉子。據(jù)本草綱目記載：“桑葉乃手足陽(yáng)明之藥，汁煎代茗，能止消渴，名目長(zhǎng)發(fā)?！蔽覈?guó)歷代均有用桑葉治消渴癥的記載。近年來(lái)研究(yánjiū)表明，桑葉富含多糖、黃酮、生物堿、蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素、微量元素等活性成分，具有降血糖、調(diào)血脂、抗應(yīng)激、抗衰老、抗凝血等功效，而桑葉多糖（mulberryleavespolysaccharide，MLP）是其降血糖作用的主要功效成分第二頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件氧化應(yīng)激氧化應(yīng)激是指機(jī)體在遭受各種有害刺激時(shí)，體內(nèi)高活性分子如活性氧自由基(reactiveoxygenspecies,ROS）和活性氮自由基（reactivenitrogenspecies,RNS）產(chǎn)生過(guò)多，氧化程度超出氧化物的清除，氧化系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)失衡，從而導(dǎo)致組織損傷。氧化應(yīng)激可通過(guò)損傷胰島β細(xì)胞和降低外周組織對(duì)胰島素的敏感性，導(dǎo)致糖尿病的發(fā)生發(fā)展。ROS還可作為重要的細(xì)胞內(nèi)信使，活化許多信號(hào)傳導(dǎo)(chuándǎo)通路，間接導(dǎo)致組織和細(xì)胞的損傷，導(dǎo)致糖尿病慢性并發(fā)癥

第三頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件氧化應(yīng)激對(duì)胰島β細(xì)胞(xìbāo)的損害胰島β細(xì)胞抗氧化酶SOD、CAT(過(guò)氧化氫酶)、GSH-Px的含量及活性相對(duì)(xiāngduì)較低，因而對(duì)ROS介導(dǎo)的損害非常敏感。ROS可直接損傷胰島β細(xì)胞，還可通過(guò)影響胰島素合成和分泌的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路間接損傷胰島β細(xì)胞。四氧嘧啶和鏈脲佐菌素(STZ)現(xiàn)已廣泛用于糖尿病動(dòng)物模型的建立，它們主要通過(guò)增加ROS的產(chǎn)生和抑制自由基防御系統(tǒng)，使ROS直接損傷胰島β細(xì)胞，誘導(dǎo)糖尿病的發(fā)生第四頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件氧化應(yīng)激降低(jiàngdī)外周組織

對(duì)胰島素的敏感性ROS類(lèi)似于第二信使的信號(hào)分子，激活許多氧化還原敏感性信號(hào)通路這些通路激活后,使氧化還原敏感性絲氨酸/蘇氨酸激酶信號(hào)級(jí)聯(lián)活化(huóhuà)，從而導(dǎo)致胰島素信號(hào)傳導(dǎo)通路中的胰島素受體(InsulinReceptor,InSR)和胰島素受體底物(IRS)蛋白磷酸化。抑制了胰島素刺激的酪氨酸磷酸化，導(dǎo)致胰島素信號(hào)傳導(dǎo)通路下游信號(hào)分子如磷脂酰肌醇－3激酶(PI3K)等的相關(guān)性和(或)活性降低，降低了胰島素的生物效應(yīng)，導(dǎo)致胰島素抵抗。第五頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件氧化應(yīng)激與糖尿病慢性(mànxìng)并發(fā)癥關(guān)系密切已證實(shí)氧化應(yīng)激與糖尿病慢性并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切。ROS在糖尿病慢性并發(fā)癥發(fā)病機(jī)制中的作用(zuòyòng)主要是其對(duì)組織和細(xì)胞的細(xì)胞毒性損傷，ROS還可作為重要的細(xì)胞內(nèi)信使，活化許多信號(hào)傳導(dǎo)通路，間接導(dǎo)致組織和細(xì)胞的損傷。第六頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件實(shí)驗(yàn)(shíyàn)目的

探討桑葉(sānɡyè)多糖降血糖的作用機(jī)制。第七頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路(sīlù)以四氧嘧啶誘導(dǎo)小鼠糖尿病模型，桑葉多糖以0.25、0.50、1.00g/kgig給藥，連續(xù)6周，每周稱(chēng)體質(zhì)量；在實(shí)驗(yàn)2、4、6周末各測(cè)空腹血糖；實(shí)驗(yàn)?zāi)┢谶M(jìn)行糖耐量試驗(yàn)，測(cè)定糖化(tánghuà)血清蛋白、血清胰島素水平；測(cè)定肝組織肝糖元、肝勻漿蛋白水平及己糖激酶（HK）、丙酮酸激酶（PK）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）活性和丙二醛（MDA）水平。第八頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件相關(guān)(xiāngguān)指標(biāo)糖化血清蛋白（GSP）血液中的葡萄糖與白蛋白和其他蛋白分子N未端發(fā)生(fāshēng)非酶促糖化反應(yīng)，形成糖化血清蛋白。由于血清中白蛋白的半衰期約21天，糖化血清蛋白測(cè)定可有效反映患者過(guò)去1～2周內(nèi)平均血糖水平，而且不受當(dāng)時(shí)血糖濃度的影響，是糖尿病病人血糖控制非常適宜的良好指標(biāo)。第九頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件相關(guān)(xiāngguān)指標(biāo)肝糖原（glycogen）又稱(chēng)作肝糖，是一類(lèi)多糖，由葡萄糖脫水縮合而成。結(jié)構(gòu)與支鏈淀粉相似主要生物學(xué)功能是作為動(dòng)物和細(xì)菌(xìjūn)的能量?jī)?chǔ)存物質(zhì)。人體主要儲(chǔ)存在肝臟和肌肉中。葡萄糖聚合物以糖原的形式儲(chǔ)存于肝臟，當(dāng)機(jī)體需要時(shí)，便可分解成葡萄糖，轉(zhuǎn)化為能量。一般肝中糖原含量約100克。第十頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件相關(guān)(xiāngguān)指標(biāo)己糖激酶（HK）在糖酵解的第一個(gè)步驟中，此酵素(jiàosù)會(huì)將葡萄糖轉(zhuǎn)變成為葡萄糖-6-磷酸，并消耗一個(gè)ATP。第十一頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件相關(guān)(xiāngguān)指標(biāo)丙酮酸激酶（PK）在糖酵解系統(tǒng)里，它是催化形成(xíngchéng)第二個(gè)ATP反應(yīng)的酶，丙酮酸激酶使磷酸烯醇式丙酮酸和ADP變?yōu)锳TP和丙酮酸，是糖酵解過(guò)程中的主要限速酶之一。第十二頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件相關(guān)(xiāngguān)指標(biāo)超氧化物歧化酶（SOD）是生物體內(nèi)重要的抗氧化酶，廣泛分布于各種生物體內(nèi)，如動(dòng)物(dòngwù)，植物，微生物等。SOD具有特殊的生理活性，是生物體內(nèi)清除自由基的首要物質(zhì)。SOD在生物體內(nèi)的水平高低意味著衰老與死亡的直觀指標(biāo)；現(xiàn)已證實(shí)，由氧自由基引發(fā)的疾病多達(dá)60多種。它可對(duì)抗與阻斷因氧自由基對(duì)細(xì)胞造成的損害，并及時(shí)修復(fù)受損細(xì)胞，復(fù)原因自由基造成的對(duì)細(xì)胞傷害第十三頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件相關(guān)(xiāngguān)指標(biāo)谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）是機(jī)體內(nèi)廣泛存在的一種重要的過(guò)氧化物分解酶。

它能催化GSH變?yōu)镚SSG，使有毒的過(guò)氧化物還原成無(wú)毒的羥基(qiǎngjī)化合物，從而保護(hù)細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)及功能不受過(guò)氧化物的干擾及損害。第十四頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件相關(guān)(xiāngguān)指標(biāo)丙二醛（MDA）生物體內(nèi)，自由基作用于脂質(zhì)發(fā)生(fāshēng)過(guò)氧化反應(yīng)，氧化終產(chǎn)物為丙二醛，會(huì)引起蛋白質(zhì)、核酸等生命大分子的交聯(lián)聚合，且具有細(xì)胞毒性。第十五頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件材料(cáiliào)與方法取120只小鼠，禁食16h，按190mg/kg劑量ip四氧嘧啶生理鹽水溶液，72h后，尾靜脈采血測(cè)空腹血糖（禁食5h），取血糖值在10～28mmol/L的造模成功小鼠48只，按血糖值、體質(zhì)量(zhìliàng)隨機(jī)分成4組，分別為模型組（蒸餾水）和桑葉多糖0.25、0.50、1.00g/kg3個(gè)劑量組；另取正常小鼠設(shè)為對(duì)照組（蒸餾水），每組12只第十六頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件小鼠分籠飼養(yǎng)(sìyǎng)，每天按劑量ig給藥1次，自由進(jìn)食、飲水，每周稱(chēng)體質(zhì)量1次。實(shí)驗(yàn)周期6周，在實(shí)驗(yàn)2、4、6周末尾靜脈采血，測(cè)空腹血糖。實(shí)驗(yàn)第6周末，小鼠禁食5h，一次性ig葡萄糖2.0g/kg，20min后尾靜脈采血測(cè)定給葡萄糖后0、0.5、2h的血糖值，進(jìn)行糖耐量試驗(yàn)，計(jì)算血糖曲線下面積。第十七頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件實(shí)驗(yàn)?zāi)┢?，小鼠股?dòng)脈采血，測(cè)糖化血清蛋白、血清胰島素水平；脫臼處死，取肝臟立刻置于冰浴，并用冰生理鹽水(shēnglǐyánshuǐ)清洗、濾紙拭干，稱(chēng)取適量，用冰生理鹽水(shēnglǐyánshuǐ)制成10%肝勻漿，置冰浴，供肝勻漿蛋白、SOD、GSH-Px、MDA、HK、PK測(cè)定；另取適量肝臟組織測(cè)肝糖元第十八頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件實(shí)驗(yàn)結(jié)果(jiēguǒ)分析思路小鼠一般觀察桑葉多糖對(duì)糖尿病小鼠血糖值的影響桑葉多糖對(duì)糖尿病小鼠糖耐量的影響桑葉多糖對(duì)糖尿病小鼠糖化血清蛋白的影響桑葉多糖對(duì)糖尿病小鼠糖代謝(dàixiè)的影響桑葉多糖對(duì)糖尿病小鼠抗氧化作用的影響桑葉多糖對(duì)糖尿病小鼠體質(zhì)量的影響桑葉多糖對(duì)糖尿病小鼠臟器指數(shù)的影響第十九頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件實(shí)驗(yàn)(shíyàn)結(jié)果：小鼠一般觀察

造模后小鼠多飲、多食、多尿、體質(zhì)量減輕，即“三多一少”癥狀十分明顯，桑葉多糖3個(gè)劑量組隨實(shí)驗(yàn)進(jìn)程小鼠癥狀逐漸(zhújiàn)緩解。在實(shí)驗(yàn)期間，模型組和桑葉多糖低、高劑量組各有2只小鼠死亡，中劑量組有3只小鼠死亡，系死于糖尿病。第二十頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件桑葉(sānɡyè)多糖對(duì)糖尿病小鼠血糖值的影響第二十一頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件第二十二頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件表明桑葉多糖具有明顯控制糖尿病小鼠空腹(kōngfù)血糖值升高、降低其血糖值的作用，并存在一定的劑量依賴(lài)關(guān)系。第二十三頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件桑葉(sānɡyè)多糖對(duì)糖尿病小鼠糖耐量的影響第二十四頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件第二十五頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件桑葉多糖3個(gè)劑量組小鼠血糖曲線下面積均低于模型組，且桑葉多糖中、高劑量組差異非常顯著(xiǎnzhù)（P＜0.01）。表明桑葉多糖具有明顯降低糖尿病小鼠血糖曲線下面積的作用。第二十六頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件桑葉多糖對(duì)糖尿病小鼠糖化(tánghuà)血清蛋白的影響第二十七頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件表明糖尿病小鼠糖化血清蛋白水平明顯升高；桑葉(sānɡyè)多糖具有降低糖尿病小鼠糖化血清蛋白的作用。第二十八頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件桑葉多糖對(duì)糖尿病小鼠糖代謝(dàixiè)的影響第二十九頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件表明四氧嘧啶糖尿病小鼠血清(xuèqīng)胰島素、肝PK的分泌和肝糖元的合成明顯減少；桑葉多糖具有促進(jìn)其血清胰島素、肝PK的分泌和肝糖元的合成等作用；而中劑量桑葉多糖還具有促進(jìn)肝PK分泌的作用。第三十頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件桑葉多糖對(duì)糖尿病小鼠抗氧化作用(zuòyòng)的影響第三十一頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件表明四氧嘧啶(mìdìnɡ)糖尿病小鼠肝SOD活性明顯降低、肝MDA水平明顯增加；桑葉多糖具有明顯提高糖尿病小鼠肝SOD活性、降低肝MDA水平的作用，而對(duì)肝GSH-Px活性影響不明顯。第三十二頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件桑葉多糖(duōtánɡ)對(duì)糖尿病小鼠體質(zhì)量的影響第三十三頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件第三十四頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件表明桑葉多糖具有促進(jìn)糖尿病小鼠體質(zhì)量恢復(fù)的作用，并存在一定(yīdìng)的劑量依賴(lài)關(guān)系。第三十五頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件桑葉多糖對(duì)糖尿病小鼠臟器指數(shù)(zhǐshù)的影響第三十六頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件表明糖尿病小鼠肝臟指數(shù)、腎臟質(zhì)量和腎臟指數(shù)均升高，而桑葉(sānɡyè)多糖具有降低臟器指數(shù)的作用。第三十七頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件實(shí)驗(yàn)(shíyàn)結(jié)論

桑葉多糖能明顯緩解糖尿病小鼠癥狀；具有明顯控制糖尿病小鼠空腹血糖值升高，降低糖化血清蛋白和血糖曲線下面積的作用；具有促進(jìn)血清胰島素、肝HK的分泌(fēnmì)和肝糖元的合成，提高肝SOD活性，降低肝MDA水平，促進(jìn)體質(zhì)量恢復(fù)的作用；桑葉多糖中劑量還具有促進(jìn)肝PK分泌的作用，而對(duì)肝GSH-Px活性影響不明顯；糖尿病小鼠肝臟、腎臟和脾臟指數(shù)均增高，桑葉多糖具有降低臟器指數(shù)的作用。第三十八頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件實(shí)驗(yàn)(shíyàn)結(jié)論

桑葉多糖通過(guò)提高四氧嘧啶糖尿病小鼠抗氧化能力，使胰島素分泌增加，同時(shí)提高肝HK、PK活性等綜合作用，促使血糖(xuètáng)進(jìn)入肝細(xì)胞，使肝糖元合成增加，葡萄糖氧化分解加快，從而達(dá)到調(diào)節(jié)糖代謝、降低血糖(xuètáng)、改善糖尿病癥狀的作用。綜合分析，桑葉多糖具有較好的降血糖作用，且作用機(jī)制是多方面的，值得對(duì)其進(jìn)行深入研究。第三十九頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件我的觀點(diǎn)(guāndiǎn)優(yōu)點(diǎn)：1.本實(shí)驗(yàn)對(duì)照設(shè)置(shèzhì)嚴(yán)密謹(jǐn)慎，說(shuō)服力強(qiáng)2.結(jié)果進(jìn)行多指標(biāo)的檢測(cè)，準(zhǔn)確客觀3.運(yùn)用數(shù)理統(tǒng)計(jì)的方法，進(jìn)行單因素方差分析第四十頁(yè)，共四十三頁(yè)。編輯課件不足：1.對(duì)于(duìyú)機(jī)制的研究不夠深入，具體的機(jī)制尚未明朗2.對(duì)于藥物的長(zhǎng)期效果尚未進(jìn)行跟蹤，藥物的作用時(shí)間不明確，能否根本治愈3.藥物本身是否具有副作用或毒性4.藥物劑量與效果之