關(guān)于色譜法的基本原理第1頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三2.1色譜法概述

2.1.1色譜法的起源和發(fā)展

胡蘿卜素(黃色)石油醚+植物色素石油醚CaCO3固定相葉綠素(綠色)葉黃素(黃色)第2頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三液液分配色譜硅膠水乙醇－氯仿(流動(dòng)相)各種氨基酸硅膠為載體水為固定相第3頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三年代發(fā)明者發(fā)明的色譜方法或重要應(yīng)用1906Tswett用碳酸鈣作吸附劑分離植物色素。最先提出色譜概念。1931Kuhn,Lederer用氧化鋁和碳酸鈣分離a-、b-和g-胡蘿卜素。使色譜法開(kāi)始為人們所重視。1938Izmailov,Shraiber最先使用薄層色譜法。1938Taylor,Uray用離子交換色譜法分離了鋰和鉀的同位素。1941Martin,Synge提出色譜塔板理論；發(fā)明液-液分配色譜；預(yù)言了氣體可作為流動(dòng)相（即氣相色譜）。1944Consden等發(fā)明了紙色譜。1949Macllean在氧化鋁中加入淀粉黏合劑制作薄層板使薄層色譜進(jìn)入實(shí)用階段。1952Martin,James從理論和實(shí)踐方面完善了氣-液分配色譜法。1956VanDeemter等提出色譜速率理論，并應(yīng)用于氣相色譜。1957

基于離子交換色譜的氨基酸分析專(zhuān)用儀器問(wèn)世。1958Golay發(fā)明毛細(xì)管柱氣相色譜。1959Porath,Flodin發(fā)表凝膠過(guò)濾色譜的報(bào)告。1964Moore發(fā)明凝膠滲透色譜。1965Giddings發(fā)展了色譜理論，為色譜學(xué)的發(fā)展奠定了理論基礎(chǔ)。1975Small發(fā)明了以離子交換劑為固定相、強(qiáng)電解質(zhì)為流動(dòng)相，采用抑制型電導(dǎo)檢測(cè)的新型離子色譜法。1981Jorgenson等創(chuàng)立了毛細(xì)管電泳法。第4頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三一、色譜法的定義2.1.2色譜法定義和分類(lèi)定義：利用不同溶質(zhì)（樣品）與固定相和流動(dòng)相之間的作用力（分配、吸附、離子交換等）的差別，當(dāng)兩相做相對(duì)移動(dòng)時(shí)，各溶質(zhì)在兩相間進(jìn)行多次平衡，使各溶質(zhì)達(dá)到相互分離。特點(diǎn)：

高超的分離能力，是一種物理化學(xué)分析方法第5頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三具體優(yōu)點(diǎn)：（1）分離效率高。（2）應(yīng)用范圍廣。（3）分析速度快。（4）樣品用量少。（5）靈敏度高。（6）分離和測(cè)定一次完成。（7）易于自動(dòng)化，可在工業(yè)流程中使用。定性能力較差。

色譜法的缺點(diǎn)第6頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三二、色譜法的重要概念固定相流動(dòng)相色譜柱

第7頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三1、按流動(dòng)相所處的狀態(tài)分類(lèi)

氣相色譜---用氣體作流動(dòng)相液相色譜---用液體作流動(dòng)相氣—固色譜氣—液色譜液—固色譜液—液色譜三、色譜法的分類(lèi)超臨界流體色譜第8頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三2、按固定相使用的形狀分類(lèi)①柱色譜：固定相裝在柱管內(nèi)。②紙色譜③薄層色譜(紙色譜和薄層色譜又統(tǒng)稱(chēng)作平板色譜)第9頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三第10頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三第11頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三3、按分離過(guò)程的物理化學(xué)原理分類(lèi)

①吸附色譜(L－S，G－S)②分配色譜(L－L，G－L)③離子交換色譜(L－S)④空間排阻色譜(L－S)第12頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三吸附色譜(L－S，G－S)第13頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三分配色譜(L－L，G－L)ConditionedsorbentGoodtransportbetweensampleandsorbent硅膠水第14頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三離子交換色譜(L－S)OHElectrostaticattractionSilicabaseCO2HCO2-OCON(CH3)2+NNH3+SO3-

第15頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三空間排阻色譜(L－S)第16頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三2.2色譜分離原理1.分配系數(shù)（K）Cs：被測(cè)組分在固定相中的濃度Cm：被測(cè)組分在流動(dòng)相中的濃度2.2.1分配系數(shù)和分配比

第17頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三分配系數(shù)意義：①K是熱力學(xué)常數(shù)，K值除了與溫度、壓力有關(guān)外，還與被測(cè)物、固定相和流動(dòng)相的性質(zhì)有關(guān)。②K值大→Cs大→tR長(zhǎng)→移動(dòng)速度慢。③若兩組分的K值相等→兩個(gè)組分分離開(kāi)。

第18頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三2.分配比（k）β：相比

第19頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三分配比的意義：①k隨K和β的變化而變化；②k值越大→ms越多→柱的容量大

k又稱(chēng)作容量因子。③k是表征色譜柱對(duì)被測(cè)組分保留能力的主要參數(shù)。第20頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三2.2.2色譜法分離原理第21頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三色譜分離過(guò)程的特點(diǎn)：不同組分在通過(guò)色譜柱時(shí)移動(dòng)速度不等。流動(dòng)相BBA空氣BA+BA檢測(cè)和記錄A+B+空氣進(jìn)樣固定相流動(dòng)相第22頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三10020030040050.0310.00160.0780.00470.1180.00880.1380.01490.1380.021100.1250.03110.1050.04120.0830.045130.0630.05第23頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三2.3色譜流出曲線(xiàn)

五種磺胺的色譜圖第24頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三氣相色譜分離多環(huán)芳烴色譜圖第25頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三一、色譜流出曲線(xiàn)或色譜圖以檢測(cè)器對(duì)組分的響應(yīng)信號(hào)為縱坐標(biāo)，流出時(shí)間(或流出體積)為橫坐標(biāo)作圖所得的曲線(xiàn)。

R——f(t,V)二、色譜流出曲線(xiàn)構(gòu)成：由基線(xiàn)和色譜峰組成?；€(xiàn)：指僅有流動(dòng)相通過(guò)而沒(méi)有待測(cè)物，檢測(cè)器響應(yīng)信號(hào)隨流出時(shí)間的變化。色譜峰：在基線(xiàn)上突起的部分，它是由引入流動(dòng)相中被測(cè)物引起的。第26頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三色譜圖或色譜流出曲線(xiàn)第27頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三描述色譜峰三種參數(shù)

峰高(或峰面積)——

峰的大小

區(qū)域?qū)挾取?/p>

峰的形狀

保留值(時(shí)間t、體積v)——

峰的位置2.3.1色譜峰高斯分布曲線(xiàn)第28頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三1．峰高h(yuǎn)2．標(biāo)準(zhǔn)偏差σ，0.607h處，拐點(diǎn)處，峰寬正好為2σ3．峰面積AA＝1.065hY1/24．半峰寬Y1/2Y1/2=2.354σ5．峰底寬Y=4σ，拐點(diǎn)作切線(xiàn)與基線(xiàn)相交，相交兩點(diǎn)間距離為峰底寬Y。Y1/2、Y統(tǒng)稱(chēng)為區(qū)域?qū)挾鹊?9頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三

通常用將各組分帶出色譜柱所需的載氣體積或時(shí)間表示。2.3.2保留值定義：

在一定的固定相和操作條件下，任何一種物質(zhì)都有一個(gè)固定的保留值，故組分的保留值可用于該組分的定性鑒定。特點(diǎn)：第30頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三1．死時(shí)間tM說(shuō)明：①實(shí)際上就是流動(dòng)相通過(guò)色譜柱所需要的時(shí)間?；蚴墙M分在流動(dòng)相中所消耗的時(shí)間。②tM由色譜柱中流動(dòng)相體積Vm與流動(dòng)相流速?zèng)Q定，與被測(cè)組分和固定相無(wú)關(guān)。第31頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三2.保留時(shí)間tR

定義：從進(jìn)樣開(kāi)始到柱后,組分出現(xiàn)響應(yīng)信號(hào)極大值時(shí)所需時(shí)間。說(shuō)明：組分的保留時(shí)間就是組分通過(guò)色譜柱所需的時(shí)間。即組分在色譜柱內(nèi)運(yùn)行的時(shí)間。影響因素：①流動(dòng)相——性質(zhì)、在色譜柱中的體積Vm和流速②固定相——性質(zhì)、在色譜柱中的體積Vs；③被測(cè)組分——性質(zhì)第32頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三3.調(diào)整保留時(shí)間（）定義：扣除死時(shí)間后的保留時(shí)間。說(shuō)明：組分在固定相中停留的時(shí)間。=

注意：第33頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三4.流動(dòng)相的流速

定義：?jiǎn)挝粫r(shí)間流動(dòng)相所通過(guò)的距離----線(xiàn)流速，u單位時(shí)間通過(guò)流動(dòng)相的體積-----體積流速，F(xiàn)單位時(shí)間通過(guò)流動(dòng)相的量-----質(zhì)量流速，F(xiàn)m和摩爾流速，F(xiàn)n)F、Fm和Fn常稱(chēng)作流量。第34頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三線(xiàn)流速l/t(m/min)體積流速v/t(ml/min)質(zhì)量流速m/t(g/min)F說(shuō)明：①在流路的任何一點(diǎn)，質(zhì)量流速或摩爾流速相等。Fm=Fn②對(duì)于氣相色譜，線(xiàn)流速和體積流速可能各處不同；對(duì)于液相色譜，線(xiàn)流速可能不一樣，但體積流速可視為各處相同。氣體狀態(tài)方程不同位置處，線(xiàn)流速不同第35頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三氣相色譜中柱內(nèi)平均體積流速的確定c點(diǎn)處的平均體積流速為柱內(nèi)氣體的平均摩爾流速

為流量計(jì)內(nèi)r處氣體的摩爾流速Fc很難測(cè)，且為柱內(nèi)平均值，F(xiàn)r易測(cè)，求Fr與Fc的關(guān)系即可。第36頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三第37頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三第38頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三柱內(nèi)平均壓力Pcr點(diǎn)處載氣的壓力Pr

Pr=Po－Pw第39頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三壓力校正項(xiàng)濕度校正項(xiàng)溫度校正項(xiàng)第40頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三5.死體積VM定義：不被固定相保留的組分，通過(guò)色譜柱時(shí)所需流動(dòng)相的體積。

計(jì)算：VM

=tM

第41頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三6.保留體積VR

定義：從進(jìn)樣開(kāi)始到柱后出現(xiàn)待測(cè)組分響應(yīng)信號(hào)極大值時(shí)所通過(guò)的載氣體積。計(jì)算：

VR=tR

注意：各種保留時(shí)間受流動(dòng)相流速的影響，各種保留體積與流動(dòng)相流速無(wú)關(guān)。第42頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三7.調(diào)整保留體積定義：保留體積扣除死體積后的體積計(jì)算公式：

==VR－VM

計(jì)算公式：第43頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三8.相對(duì)保留值r2,1

（選擇性因子

α

）定義：相對(duì)保留值r2,1是指組分2的調(diào)整保留值與組分1的調(diào)整保留值之比公式：α越大→兩組分容易分離；α=1時(shí)→兩組分不能分開(kāi)。說(shuō)明：α只與柱溫和固定相性質(zhì)有關(guān)第44頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三9.保留值與分配比的關(guān)系被測(cè)物在色譜柱內(nèi)的平均線(xiàn)流速ūx為流動(dòng)相在色譜柱內(nèi)的平均線(xiàn)流速ū為L(zhǎng)為色譜柱長(zhǎng)被測(cè)物出現(xiàn)在流動(dòng)相中的幾率為

ūx與ū的關(guān)系為第45頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三色譜柱長(zhǎng)是一定的，所以

第46頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三色譜過(guò)程方程：表達(dá)了保留時(shí)間與分配系數(shù)或容量因子兩個(gè)重要參數(shù)的關(guān)系。

①容量因子越大，溶質(zhì)的保留時(shí)間也越長(zhǎng)。

②對(duì)于混合物，分配系數(shù)不等是分離的前提。第47頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三例2.1已知Vs=2.0mL，F(xiàn)c=50mL·min-1，tR=5min，tM=1min。求VM，VR，，k，K。

第48頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三第49頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三

色譜流出曲線(xiàn)可以解決的問(wèn)題1．樣品所含最少組分個(gè)數(shù)2．可以進(jìn)行定性分析3．可以進(jìn)行定量分析4．可對(duì)色譜柱效能進(jìn)行評(píng)價(jià)5.色譜過(guò)程的熱力學(xué)問(wèn)題6.色譜過(guò)程的動(dòng)力學(xué)問(wèn)題總結(jié)第50頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三色譜理論

色譜理論需要解決的問(wèn)題：影響分離及柱效的因素與提高柱效的途徑，柱效與分離度的評(píng)價(jià)指標(biāo)及其關(guān)系色譜分離過(guò)程的熱力學(xué)和動(dòng)力學(xué)問(wèn)題。。第51頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三2.4塔板理論

第52頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三2.4.1塔板理論的假設(shè)1.柱分成n段，n為理論塔板數(shù)，每段高為H，H為塔板高度，柱長(zhǎng)為L(zhǎng)，則n=L/H2.所有組分開(kāi)始都加在第零號(hào)塔板上。3.在每塊塔板上被測(cè)物在兩相間平衡是瞬間建立的。4.流動(dòng)相是以脈沖式(塞子式)進(jìn)入色譜柱進(jìn)行沖洗的，每次恰好為一個(gè)塔板體積ΔV。5.在所有塔板上，同一組分的分配系數(shù)為常數(shù)，即和組分的量無(wú)關(guān)。6.沿色譜柱方向不存在塔板與塔板間被測(cè)物的縱向擴(kuò)散。第53頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三第54頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三假定：K=1Vs/Vm=1k=1n=5進(jìn)樣量m=1mg

板體積數(shù)（ΔV）0123400.50.51ΔV0.250.250.250.252ΔV0.1250.250.1250.1250.250.1253ΔV0.06250.1880.1880.06250.06250.1880.1880.06254ΔV0.03120.1250.1880.1250.03120.03120.1250.1880.1250.0312檢測(cè)器第55頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三這一理論得到結(jié)果1．分布有一最大，兩邊逐漸減小2．色譜流出曲線(xiàn)的形狀類(lèi)似于數(shù)學(xué)上的正態(tài)分布曲線(xiàn)正態(tài)分布方程為：第56頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三C：不同流出體積時(shí)的組分濃度m：進(jìn)樣量VR：保留體積n：塔板數(shù)V：流出體積將正態(tài)分布方程用于色譜流出曲線(xiàn)方程的數(shù)學(xué)表達(dá)式，也稱(chēng)塔板理論方程：第57頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三令：σ為標(biāo)準(zhǔn)偏差

令：m=1

當(dāng)V＝VR時(shí)，

當(dāng)則則：第58頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三將代入第59頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三由Y1/2=2.354σ

和

Y=4σ

可證明Y1/2=0.5885Y第60頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三為了準(zhǔn)確評(píng)價(jià)色譜柱效能，宜采用有效塔板數(shù)neff和有效塔板高度Heff第61頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三理論塔板數(shù)和有效塔板數(shù)關(guān)系說(shuō)明：對(duì)于n和neff以及H和Heff，用同一色譜柱時(shí)對(duì)不同物質(zhì)是不一樣的；同一物質(zhì)，對(duì)不同柱子也不一樣。第62頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三塔板理論的成功與不足成功：1、導(dǎo)出了色譜流出曲線(xiàn)的數(shù)學(xué)表達(dá)式；2、說(shuō)明了色譜峰的形狀呈正態(tài)分布；3、解釋了濃度極大點(diǎn)；4、提出了評(píng)價(jià)柱效的參數(shù)(n)及其計(jì)算式不足：1、僅考慮了熱力學(xué)因素，沒(méi)有考慮動(dòng)力學(xué)因素；2、不能說(shuō)明影響柱效的因素及譜帶擴(kuò)張的原因；3、不能說(shuō)明流動(dòng)相流速對(duì)柱效的影響，而實(shí)驗(yàn)事實(shí)是流速不同時(shí)測(cè)得的n

(或H)不同第63頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三2.5速率理論2.5.1氣相色譜法色譜過(guò)程的動(dòng)力學(xué)理論塔板高度H與載氣線(xiàn)速度的關(guān)系第64頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三A

為渦流擴(kuò)散項(xiàng)，B為分子擴(kuò)散項(xiàng)系數(shù)，C

為傳質(zhì)阻力項(xiàng)系數(shù)，為載氣的平均線(xiàn)流速范弟姆特方程第65頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三1．渦流擴(kuò)散項(xiàng)——AA=2λdPλ：填充不規(guī)則因子dP：填充物顆粒的平均直徑第66頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三第67頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三影響：

填充物顆粒的大小、分布以及填充均勻的程度；不受影響：載氣性質(zhì)、線(xiàn)速度和組分無(wú)關(guān)。減小渦流擴(kuò)散提高柱效的有效途徑：使用適當(dāng)小的顆粒，且顆粒均勻的填充物，并盡量填充均勻。對(duì)于空心毛細(xì)管柱，A=0。A=2λdP第68頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三12與顆粒的均勻程度有關(guān)及填充的均勻程度有關(guān)第69頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三2．分子擴(kuò)散項(xiàng)——分子擴(kuò)散項(xiàng)的系數(shù)B

：

B=2Dg：

彎曲因子Dg：組分在氣相中的擴(kuò)散系數(shù)(cm2·s-1)第70頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三第71頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三γ與填充物有關(guān)：對(duì)于填充柱，γ=0.5～0.7；對(duì)于毛細(xì)管柱，γ=1.0。

Dg與組分的性質(zhì)、載氣的性質(zhì)、柱溫和柱壓等因素有關(guān)：

①分子量大的組分Dg??；

②Dg反比于載氣分子量的平方根,故采用分子量較大的載氣可使B項(xiàng)降低；

③Dg隨柱溫升高而增大，而隨柱壓增大而減小。B=2Dg第72頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三3．傳質(zhì)阻力項(xiàng)

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C傳質(zhì)：物質(zhì)因濃度不均勻而發(fā)生的遷移過(guò)程稱(chēng)為傳質(zhì)傳質(zhì)阻力：影響此遷移過(guò)程速度的阻力稱(chēng)為傳質(zhì)阻力傳質(zhì)阻力種類(lèi)：包括氣相和液相傳質(zhì)阻力，而傳質(zhì)阻力系數(shù)也包括氣相傳質(zhì)阻力系數(shù)Cg和液相傳質(zhì)阻力系數(shù)ClC=Cg+Cl

第73頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三氣相傳質(zhì)過(guò)程氣相傳質(zhì)過(guò)程是待測(cè)組分從氣液界面移動(dòng)到氣相內(nèi)部而后又移動(dòng)到液相表面的過(guò)程。第74頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三影響：Cg與填充物粒度dp的平方成正比，與組分在載氣流中的擴(kuò)散系數(shù)Dg成反比。解決方法：因此采用粒度小的填充物和分子量小的氣體作載氣可使Cg減小,從而提高柱效。對(duì)于填充柱：氣相傳質(zhì)阻力系數(shù)第75頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三液相傳質(zhì)過(guò)程液相傳質(zhì)過(guò)程是指待測(cè)組分從氣液界面移動(dòng)到液相內(nèi)部，發(fā)生質(zhì)量交換以達(dá)到分配平衡，然后又返回氣液界面的傳質(zhì)過(guò)程。第76頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三影響：固定相液膜厚度（df）和組分在液相中的擴(kuò)散系數(shù)（Dl

）。解決方法：減小液膜厚度df，增大組分在液相中的擴(kuò)散系數(shù)Dl，均可提高柱效。液相傳質(zhì)阻力系數(shù)第77頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三速率理論方程①填料性質(zhì)：填料顆粒均勻程度、填料顆粒大?、谔畛淝闆r：填料在色譜柱中填充均勻程度③流動(dòng)相：流動(dòng)相種類(lèi)和流速④固定相：固定液厚度公式說(shuō)明影響n(yōu)或H的因素結(jié)論：范弟姆特方程對(duì)色譜分離條件的選擇具有指導(dǎo)意義第78頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三2.6分離度(Rs)2.6.1定義Rs是相鄰兩組分色譜峰保留值和之差與兩個(gè)組分色譜峰峰底寬Y1和Y2總和的一半的比值衡量色譜圖中相鄰兩峰分離程度意義第79頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三熱力學(xué)因素（兩峰離開(kāi)距離）動(dòng)力學(xué)因素（兩峰寬窄）第80頁(yè)，講稿共90頁(yè)，2023年5月2日，星期三不同分離度下色譜峰示意圖通常用Rs=1.5作為相鄰兩色譜峰完全分開(kāi)的指